公豬站精液質(zhì)量好壞直接與豬場情期受胎率、產(chǎn)仔數(shù)相關(guān),所以再怎么強調(diào)公豬精液的重要性都不為過。那么公豬站標準化操作究竟應(yīng)該如何做?溫氏集團這方面的操作規(guī)范可以給我們啟示。 一、目的 規(guī)范公豬站按照嚴格的操作規(guī)程進行精液生產(chǎn),減少次品精液的發(fā)生率,確保人工授精所用精液的質(zhì)量得到保證。 二、范圍 適用于各公豬站與豬場實驗室。 [attach]213002[/attach] 三、職責 1、 采精員負責采精公豬的調(diào)教和采精工作。 2、 有公豬站的實驗室負責公豬站所在豬場所有公豬的精液品質(zhì)檢查;各豬場實驗室負責生產(chǎn)線公豬的精液品質(zhì)檢查。 3、 實驗室操作人員負責配制稀釋液和精液的稀釋工作。 4、 公豬站實驗室負責精液的分裝與保存; 5、 精液車司機負責精液的運輸; 6、 各豬場實驗室負責精液到場后的貯存。 四、工作程序 (一)采精公豬的調(diào)教 1、 后備公豬在7.5月齡開始采精調(diào)教。先調(diào)教性欲旺盛的公豬,下一頭隔欄觀察、學(xué)習。 2、 擠出包皮積尿,清洗公豬的后腹部及包皮部,按摩公豬的包皮部。 3、 誘發(fā)爬跨:用發(fā)情母豬的尿或陰道分泌物涂在假母豬上,同時模仿母豬叫聲,也可以用其他公豬的尿或口水涂在假母豬上,目的都是誘發(fā)公豬的爬跨欲。 4、 上述方法都不奏效時,可趕來一頭發(fā)情母豬,讓公豬空爬幾次,在公豬很興奮時趕走發(fā)情母豬,萬不得已時采取強制將公豬抬上假臺畜的方法。 5、 公豬爬上假母豬后即可進行采精。 6、 對于難調(diào)教的公豬,可實行多次短暫訓(xùn)練,每周4~5次,每次15~20分鐘,調(diào)教成功以后,每天采一次,連采3次,如果公豬的性欲很好,調(diào)教以后7天采一次;公豬性欲一般,則調(diào)教成功后2-3天采一次,連采3次。如果公豬表現(xiàn)任何厭煩、受挫或失去興趣,應(yīng)該立即停止調(diào)教訓(xùn)練。 7、 注意:在公豬很興奮時,要注意公豬和采精員自己的安全,采精欄必須設(shè)有安全角。無論哪種調(diào)教方法,公豬爬跨后一定要進行采精,不然,公豬很容易對爬跨假母豬失去興趣。調(diào)教時,不能讓兩頭或以上公豬同時在一起,以免引起公豬打架等,影響調(diào)教的進行和造成不必要的經(jīng)濟損失。
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(二)采精 1、 采精杯的制備:先在保溫杯內(nèi)襯一只一次性食品袋,再在杯口覆一層過濾紙,用橡皮筋固定,要松一些,使其能沉入2cm左右。制好后放在37°C恒溫箱備用。為了保證采精杯內(nèi)的實際溫度,采精杯蓋與杯分開放在恒溫箱內(nèi)。 2、 在采精之前先剪去公豬包皮上的被毛,防止干擾采精及細菌污染。 3、 將待采精公豬趕至采精欄,擠出包皮積尿,用0.1%KMnO4溶液清洗腹部及包皮部。 4、 用清水洗凈,抹干。按摩公豬的包皮部,待公豬爬上假母豬后,用溫暖清潔的手(有無手套皆可)握緊伸出的龜頭,順公豬前沖時將陰莖的"S"狀彎曲拉直,握緊陰莖螺旋部的第一和第二摺,在公豬前沖時允許陰莖自然伸展,不必強拉。充分伸展后,陰莖將停止推進,達到強直“鎖定”狀態(tài),開始射精。射精過程中不要松手,否則壓力減輕將導(dǎo)致射精中斷。(注意在采精時不要碰陰莖體,否則陰莖將迅速縮回。) 5、 有乳白色濃份精液出現(xiàn)時開始收集,直至公豬射精完畢(陰莖變軟)時才放手,注意在收集精液過程中防止包皮部液體或其他如雨水等進入采精杯。 6、 下班之前徹底清洗采精欄。 7、 采精頻率:后備公豬調(diào)教合格后,采精間隔天數(shù)為7天;然后每3個月,對供精份數(shù)每次在平均份數(shù)以上的公豬的采精間隔減少1天,采精間隔天數(shù)最低不少于3天。 [attach]213004[/attach]
(三)精液品質(zhì)檢查 整個檢查過程要迅速、準確,一般在5分鐘內(nèi)完成,以免時間過長影響精子的活力。精液質(zhì)量檢查的主要指標有:精液量、顏色、氣味、精子密度、精子活力、畸形精子率等。檢查結(jié)束后應(yīng)立即填寫《公豬精液品質(zhì)檢查記錄表》,每頭公豬應(yīng)有完善的《公豬精檢檔案》。 1、 精液量:后備公豬的射精量一般為150~200毫升,成年公豬為200~600毫升,稱重量算體積,1克計為1毫升。 2、 顏色:正常精液的顏色為乳白色或灰白色。如果精液顏色有異常,則說明精液不純或公豬有生殖道病變,凡發(fā)現(xiàn)顏色有異常的精液,均應(yīng)棄去不用。同時,對公豬進行檢查,然后對癥處理、治療。 3、 氣味:正常的公豬精液具有其特有的微腥味,無腐敗惡臭氣味。有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它異物,一旦發(fā)現(xiàn),不應(yīng)留用。并檢查采精時是否有失誤,以便下次糾正做法。 4、 密度:指每毫升精液中含有的精子數(shù),它是用來確定精液稀釋倍數(shù)的重要依據(jù)。正常公豬的精子密度為2.0~3.0億/毫升,有的高達5.0億個精子/毫升。檢查精子密度的方法常用以下兩種: (1) 精子密度儀測量法:它極為方便,檢查時間短,準確率高。若用國產(chǎn)分光光度計改裝,也較為適用。該法有一缺點,就是會將精液中的異物按精子來計算,應(yīng)予以重視。
[attach]213005[/attach] (2) 紅細胞計數(shù)法:該法最準確,但速度慢,其具體操作步驟為: 用不同的微量取樣器分別取具有代表性的原精100微升和3%的KCl溶液900微升,混勻。在計數(shù)板的計數(shù)室上放一蓋玻片,取少量上述混合精液放入計數(shù)板槽中。在高倍顯微下計數(shù)5個中方格內(nèi)精子的總數(shù),將該數(shù)乘以50萬即得原精液的精子密度。 5、 精子活力 每次采精后及使用精液前,都要進行活力的檢查,檢查精子活力前必須使用37℃左右的保溫板預(yù)熱:一般先將載玻片放在38℃保溫板上預(yù)熱2至3分鐘,再滴上1小滴精液,蓋上蓋玻片,然后在顯微鏡下進行觀察。保存后的精液在精檢時要先在玻片預(yù)熱2分鐘。 精子活力一般采用10級制,即在顯微鏡下觀察一個視野內(nèi)作直線運動的精子數(shù),若有90%的精子呈直線運動則其活力為0.9;有80%呈直線運動,則活力為0.8;依次類推。新鮮精液的精子活力以高于0.7為正常,稀釋后的精液;當活力低于0.6時,則棄去不用。 6、 畸形精子率 畸形精子包括巨型、短小、斷尾、斷頭、頂體脫落、有原生質(zhì)滴、大頭、雙頭、雙尾、折尾等精子。它們一般不能作直線運動,受精能力差,但不影響精子的密度。公豬的畸形精子率一般不能超過18%,否則應(yīng)棄去。采精公豬要求每兩周檢查一次畸形率。 不合格公豬或精液的處理辦法:公豬站發(fā)現(xiàn)不合格的精液一律作廢,不得用于生產(chǎn)。 (四)精液稀釋液的配制 常用稀釋劑配方:
稀釋液的配制的具體操作步驟為: 1、 所用藥品要求選用分析純,對含有結(jié)晶水的試劑按摩爾濃度進行換算。 2、 按稀釋液配方,用稱量紙和電子天平按1000ml和2000ml劑量準確稱取所需藥品,稱好后裝入密閉袋。 3、 使用1小時前將稱好的稀釋劑溶于定量的雙蒸水中,用磁力攪拌器加速其溶解。 4、 如有雜質(zhì)需要用濾紙過濾。 5、 稀釋液配好后及時貼上標簽,標明品名、配制時間和經(jīng)手人等。 6、 放在水浴鍋內(nèi)進行預(yù)熱,以備使用,水浴鍋溫度設(shè)置不能超過39℃。 7、 認真檢查配好的稀釋液,發(fā)現(xiàn)問題及時糾正。 (五)精液稀釋 處理精液必須在恒溫環(huán)境中進行,品質(zhì)檢查后的精液和稀釋液都要在37℃恒溫下預(yù)熱,稀釋處理時,嚴禁太陽光直射精液。稀釋液應(yīng)在采精前準備好,并預(yù)熱好。精液采集后要盡快稀釋,精子活力在0.7以下的精液不得用于稀釋。稀釋處理每一步結(jié)束時應(yīng)及時登記《精液稀釋記錄》。 具體的稀釋程序為: 1、 精液稀釋頭份的確定:人工授精的正常劑量一般為40億個精子/頭份,體積為80ml,假如有一份公豬的原精液,密度為2億/ml,采精量為150ml,稀釋后密度要求為40億/80ml頭份。則此公豬精液可稀釋150×2/40=7.5頭份,需加稀釋液量為(80×7.50-150)ml=450ml。 2、 測量精液和稀釋液的溫度,調(diào)節(jié)稀釋液的溫度與精液一致(兩者相差0.5℃以內(nèi))。注 意:必須以精液的溫度為標準來調(diào)節(jié)稀釋液的溫度,不可逆操作。 3、 將精液移至2000ml大塑料杯中,稀釋液沿杯壁緩緩加入精液中,輕輕攪勻或搖勻。 4、 如需高倍稀釋,先進行1:1低倍稀釋,1分鐘后再將余下的稀釋液緩慢分步加入。因精子需要一個適應(yīng)過程,不能將稀釋液直接倒入精液。 5、 精液稀釋的每一步操作均要檢查活力,稀釋后要求靜置片刻再作活力檢查?;盍ο陆当仨毑槊髟虿⒓右愿倪M。 6、 混精的制作:兩頭或兩頭以上公豬的精液1:1稀釋或完全稀釋以后可以做混精。做混精之前需各倒一小部分混合起來,檢查活力是否有下降,如有下降則不能做混精。把溫度較高的精液倒入溫度較低的精液內(nèi)。每一步都需檢查活力。 7、 用具的洗滌:精液稀釋的成敗,與所用儀器的清潔衛(wèi)生有很大關(guān)系。所有使用過的燒杯、玻璃棒及溫度計,都要及時用蒸餾水洗滌,并進行高溫消毒,以保證稀釋后的精液能適期保存和利用。 8、 精液的分裝:稀釋好的精液,檢查其活力,前后一致便可以進行分裝。稀釋后的精液也可以采用大包裝集中貯存。但要在包裝上貼好標簽,注明公豬的品種、耳號以及采精的日期和時間。
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(六)精液的分裝 1、 精液瓶和輸精管必須為對精子無毒害作用的塑料制品。 2、 稀釋好精液后,先檢查精子的活力,活力無明顯下降則可進行分裝。 3、 按每頭份60-80ml進行分裝。如果精液需要運輸,應(yīng)對瓶子進行排空,以減少運輸中震蕩。 4、 分裝后的精液,將精液瓶加蓋密封,貼上標簽,清楚標明公豬站號、公豬品種、采精日期及精液編號。 (七)精液的保存 1、 需保存的精液應(yīng)先在22℃左右室溫下放置1~2小時后放入17℃(變動范圍16~18℃)冰箱中,或用幾層干毛巾包好直接放在17℃冰箱中。冰箱中必須放有靈敏溫度計,隨時檢查其溫度。分裝精液放入冰箱時,不同品種精液應(yīng)分開放置,以免拿錯精液。精液應(yīng)平放,可疊放。 2、 查看:從放入冰箱開始,每隔12小時,要小心搖勻精液一次(上下顛倒),防止精子沉淀聚集造成精子死亡。一般可在早上上班、下午下班時各搖勻一次,并做好搖勻時間和人員的記錄。夜間超過12小時應(yīng)安排夜班于凌晨搖勻一次。
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3、 冰箱應(yīng)一直處于通電狀態(tài),盡量減少冰箱門的開關(guān)次數(shù),防止頻繁升降溫對精子的打擊。保存過程中,一定要隨時觀察冰箱內(nèi)溫度的變化,出現(xiàn)溫度異?;蛲k?,必須普查貯存精液的品質(zhì)。 4、 精液一般可成功保存3~7天。 (八)精液的運輸: 精液運輸成敗的關(guān)鍵在于保溫和防震是否做得足夠好。公豬站與豬場之間的精液運輸采用專業(yè)的精液運輸箱來運送,要求達到17±1℃恒溫。 (九)運輸后的貯存 1、 精液運輸?shù)礁髫i場以后的貯存方法:不同品種精液應(yīng)分開放置,以免拿錯精液。精液應(yīng)平放,可疊放。 2、 從放入冰箱開始,每隔12小時要小心搖勻精液一次(上下顛倒幾次),冰箱應(yīng)一直處于通電狀態(tài),盡量減少冰箱門的開關(guān)次數(shù)。出現(xiàn)溫度異?;蛲k?,必須普查貯存精液的品質(zhì)。 五、相關(guān)記錄 公豬精液品質(zhì)檢查記錄表
公豬耳號: 品種:
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