畜牧人

標(biāo)題: 蛋白消化液測(cè)定鈣磷 [打印本頁]
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-1-5 13:30
標(biāo)題: 蛋白消化液測(cè)定鈣磷
用蛋白消化液測(cè)定鈣磷怎么計(jì)算？
還有用這種方法測(cè)定鈣磷應(yīng)該注意什么？
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-1-8 19:49
各位：怎么沒有人用這種方法測(cè)鈣磷嘛？期待高手解答
作者: 粗蛋白    時(shí)間: 2008-1-8 20:11
我也想知道.這樣可以少稱一次樣品又可以節(jié)約時(shí)間了:D::
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-1-8 20:43
是??！用灰份做的話很費(fèi)時(shí)
我們也做了，可是鈣的結(jié)果總是偏高。不知道是哪里出了問題。
麻煩大家一起解決了
作者: wujianping992    時(shí)間: 2008-1-8 21:03
期待有高手的指點(diǎn)？？
作者: 粗蛋白    時(shí)間: 2008-1-10 16:53
我查了下資料, 測(cè)鈣和磷分別移取蛋白消化液10毫升和1毫升, 后面的也就是象用灰份測(cè)鈣,磷的步驟一樣了.這樣就節(jié)約了稱樣的時(shí)間和灰化的時(shí)間了.:D::  查了資料我還沒驗(yàn)證,改天作作對(duì)比看看誤差大否. 這種檢測(cè)方法在"飼料檢驗(yàn)化驗(yàn)員"書上的高級(jí)部分里介紹有.

[ 本帖最后由 粗蛋白 于 2008-1-13 12:48 編輯 ]
作者: 粗蛋白    時(shí)間: 2008-1-11 17:02
沒有朋友感興趣嗎? 今天我將蛋白消化液用于檢測(cè)鈣和磷, 可是在加入乙二胺時(shí)樣品有紫色現(xiàn)象,依次加入孔雀石綠色澤有異常,再加入KOH樣品完全呈紫紅色.......先前的竊喜完全化成了泡影! 再仔細(xì)看看"飼料檢驗(yàn)化驗(yàn)員"書上寫的方法, 自己所用的蛋白催化劑與書上的有異,我用的是硫酸銅和硫酸鉀,而該方法用的催化劑是硫酸鉀和硒粉(或雙氧水). 用消化液繼續(xù)檢測(cè)磷含量,過程中無異?，F(xiàn)象,得出一結(jié)果略偏低.
     我不能用自己檢測(cè)蛋白的消化液來檢測(cè)鈣含量,也許就是催化劑的不同吧? 期待朋友們來參與 討論并實(shí)驗(yàn)....
作者: 白冰    時(shí)間: 2008-1-11 20:01
我沒有做過，方法哪有呀？
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-1-12 06:25
我們的催化劑也是使用的硫酸銅和硫酸鈉（1：15），
是直接移取5ml蛋白消化液進(jìn)行鈣的測(cè)定，在加入三乙醇胺的時(shí)候溶液顯藍(lán)色，加入如kon溶液顏色會(huì)加深，這對(duì)滴定時(shí)判斷終點(diǎn)確實(shí)有很大影響。我想是不是因?yàn)檫@樣才使鈣的測(cè)定結(jié)果偏高。
而取10ml樣液的話在滴定時(shí)綠色熒光會(huì)越來越深，我不知道是怎么回事。
期待高手相助！
作者: siky    時(shí)間: 2008-1-12 08:00
沒做過, 我們直接用NIR的
作者: tony2005428    時(shí)間: 2008-1-12 11:47
很感興趣哦
但是還是第一次聽說過
有多少家公司用過此方法，能否介紹一下經(jīng)驗(yàn)？？？
謝謝

粗蛋白你做過比較，也有這方面的資料，能否貼出來供大家參考一下，謝謝！?。。。?br /> :huahua: :xuehu:
作者: 粗蛋白    時(shí)間: 2008-1-13 11:39
04年取化驗(yàn)上崗證發(fā)的"飼料檢驗(yàn)化驗(yàn)員"書上有這種檢測(cè)法, 我對(duì)比了一下,只是自己所用的催化劑與書上的不一致,  書上是硫酸鉀和硒粉(或雙氧水)作的催化劑,而我用的是硫酸銅與硫酸鉀(1:15), 因此在檢測(cè)鈣時(shí)加入乙二胺色澤就有一點(diǎn)異常,加入KOH時(shí)全變成紫紅色無法進(jìn)行下去; 然后我又做,加入乙二胺和孔雀石綠后就未加KOH, 色澤已顯熒光,繼續(xù)加鹽酸羥胺和鈣指示劑, 用EDTA滴定,耗了50多毫升標(biāo)液熒光卻一直不消失......最終用此法測(cè)鈣含量以失敗宣告結(jié)束. 測(cè)磷得出了數(shù)據(jù)但還需繼續(xù)檢測(cè)驗(yàn)證.
     如果有朋友是使用硫酸鉀和硒粉(或雙氧水)作催化劑的,不防做做, 這樣可節(jié)約很多時(shí)間的少很多事情!!  書上已給出此法來"快速檢測(cè)鈣磷", 我想肯定是行的!!
作者: 月亮花    時(shí)間: 2008-1-13 12:11
原帖由 dy3166 于 2008-1-5 13:30 發(fā)表
用蛋白消化液測(cè)定鈣磷怎么計(jì)算？
還有用這種方法測(cè)定鈣磷應(yīng)該注意什么？

大家討論的蛋白消化液是已經(jīng)蒸餾后的（測(cè)完氮）還是剛消化完的。如果是前者就比較有意義，如果是后者蛋白質(zhì)如何測(cè)定。另外，整個(gè)體系的體積和濃度如何定，需要準(zhǔn)確才能算出準(zhǔn)確的濃度或含量。如果測(cè)鈣用EDTA法不好，能否用沉淀法？但如果使用蒸餾后的，過量堿造成的黑色以及pH偏高對(duì)草酸鈣的影響會(huì)對(duì)結(jié)果不利。期待大家找出好方法。
作者: any_wyb    時(shí)間: 2008-1-13 12:20
沒做過,請(qǐng)高手來解決了
作者: 粗蛋白    時(shí)間: 2008-1-15 16:07
標(biāo)題: 飼料中粗蛋白、鈣、總磷的快速測(cè)定方法
飼料中粗蛋白、鈣、總磷的快速測(cè)定方法

一，方法原理：在催化劑或氧化劑存在下，用硫酸破壞試樣中的有機(jī)物，使含氮化合物轉(zhuǎn)變成成硫酸銨，鈣、磷以離子形式進(jìn)入硫酸溶液中，制備成試樣溶液。分取部分溶液用凱氏定氮法測(cè)定粗蛋白，分取部分溶液用EDTA法測(cè)定鈣，分取部分溶液用釩鉬酸銨法測(cè)定磷。
二，試劑與溶液：濃硫酸  硫酸鉀   硒粉  催化劑（硫酸鉀+硒為 1000+1，磨細(xì)混勻壓制成3.5克左右的圓餅備用）    過氧化氫(30%)   硼酸溶液(20克/升)    氫氧化鈉(400克/升溶液)    混合指示劑(甲基紅1克/升乙醇溶液與溴甲酚綠5克/升乙醇溶液等體積混合,在陰涼棕色瓶?jī)?nèi)保存)  0.02mol/l鹽酸標(biāo)液   蔗糖   硫酸銨  
鹽酸羥胺   氫氧化鉀(20%)  三乙醇胺溶液(1:1)  乙二胺溶液(1:1)   1%淀粉溶液   1克/升孔雀石綠水溶液   鈣黃綠素-甲基百里香酚藍(lán)指示劑   乙二胺四乙酸二鈉標(biāo)準(zhǔn)液   鈣標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.001克/亳升)   
釩鉬酸銨顯色劑    磷標(biāo)準(zhǔn)溶液   

三，試樣消化:
法1  硫酸、硒催化消化法：稱取樣0.5-1克,無損失的倒入凱氏瓶中,加入3.5克催化劑和12亳升硫酸,在電爐上加熱待泡沫消失后升溫至360-410度,加熱至透明的微黃色,取下冷卻，加20亳升水,轉(zhuǎn)入100亳升容量瓶中流水冷卻，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻?yàn)樵嚇酉?
法2  過氧化氫、硫酸、硒消化法：稱取樣0.5-1克,無損失的倒入凱氏瓶中,加入3.5克催化劑和12亳升硫酸,10亳升過氧化氫，小心混勻待反應(yīng)泡沫消失后，置360度左右電爐上消化至透明的微黃色,取下冷卻,加20亳升水,流水冷卻，轉(zhuǎn)入100亳升容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻?yàn)樵嚇酉?
法3  過氧化氫、硫酸消化法：稱取樣0.5-1克,無損失的倒入凱氏瓶中,加12亳升硫酸,10亳升過氧化氫，小心混勻待泡沫消失后置于升溫至約250度電爐上加熱至硫酸冒煙、溶液呈棕黑色，取上冷卻，補(bǔ)加過氧化氫至溶液呈白色，再加熱，如此反復(fù)數(shù)次至高溫下溶液清亮，冷卻,加25亳升水,流水冷卻，轉(zhuǎn)入100亳升容量瓶中,用蒸餾水稀釋至刻度搖勻?yàn)樵嚇酉?
四，粗蛋白測(cè)定：略
五，鈣的測(cè)定：準(zhǔn)確移取試樣消化液10-25亳升，加水50亳升，1%淀粉液10亳升，三乙醇胺液2亳升，乙二胺液1亳升，1滴孔雀石綠液，滴加20%氫氧化鉀至無色再過量10亳升，加0.1克鹽酸羥胺,加鈣黃綠素-甲基百里香酚藍(lán)指示劑少許,在黑色背景下立即用EDTA標(biāo)液滴定至綠色熒光消失呈現(xiàn)紫紅色為止,同時(shí)作空白.
               計(jì)算:Ca%= T*V2*V0*100  /  m*V1
                  T為EDTA標(biāo)液對(duì)鈣的滴定度(克/亳升); m為樣品重(克)
             V0 V1 V2分別為試樣消化液總體積, 分取試樣體積,實(shí)際消耗EDTA標(biāo)液體積(亳升)

六, 磷的測(cè)定: 準(zhǔn)確移取試樣消化液1-10亳升于50ml容量瓶中，加入釩鉬酸銨顯色劑10ml，定容搖勻,放置10分鐘以上 .以標(biāo)準(zhǔn)空白液為參比,用1cm比色皿在分光光度計(jì)上400nm波長(zhǎng)下測(cè)定試樣液的吸光度.在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得試樣消化液的含磷量。
計(jì)算          M1
P%=        ---------------------           *100
                M * V1/V *1000000  
M1——由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的磷的量，ug  M 為試樣質(zhì)量 g  
V和 V1 分別為試樣消化液總體積和分取試樣體積 ml
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-1-17 07:07
真的只有換催化劑才行嗎？
作者: 粗蛋白    時(shí)間: 2008-1-17 20:00
我用的硫酸銅作催化劑,  鈣含量是無法檢測(cè)出, 但磷含量能檢測(cè)出.這幾天做了幾個(gè)對(duì)比樣, 用蛋白消化液檢測(cè)的磷比用灰份檢測(cè)的磷高0.1% (用的是一個(gè)肉鴨料和一個(gè)蛋雞料分別作對(duì)比試驗(yàn))
作者: 王天西    時(shí)間: 2008-2-20 22:25
標(biāo)題: 求教飼料中鈣的快速測(cè)定方法的幾個(gè)問題
在測(cè)定過程中加入1%淀粉溶液和孔雀石綠起什么作用,還有鹽酸羥胺又是干什么用的,鈣黃綠素--甲基百里香酚藍(lán)指示劑在EDTA滴定前后是怎么反應(yīng),顏色為什么是這樣變化的.感激不盡
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-2-22 19:36
哪天，有位前輩告訴說取樣后加10ml20%KOH溶液，然后再加淀粉、乙二胺、三乙醇胺、KOH等。這樣的話一共就加了20mlKOH，但我做出來后鈣含量還是高。
看來只有在研究了
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-2-22 19:37
哪天，有位前輩告訴說取樣后加10ml20%KOH溶液，然后再加淀粉、乙二胺、三乙醇胺、KOH等。這樣的話一共就加了20mlKOH，但我做出來后鈣含量還是高。
看來只有在研究了
作者: 冰兒9447    時(shí)間: 2008-3-18 15:15
標(biāo)題: 回復(fù) 13樓 的帖子
我和同意這種說法，確實(shí)讓我很疑惑?希望有好的方法！期待著??！
作者: 冰兒9447    時(shí)間: 2008-3-18 15:16
標(biāo)題: 回復(fù) 13樓 的帖子
我和同意這種說法，確實(shí)讓我很疑惑?希望有好的方法！期待著！！
作者: 冰兒9447    時(shí)間: 2008-3-18 15:19
標(biāo)題: 回復(fù) 13樓 的帖子
我和同意這種說法，確實(shí)讓我很疑惑?希望有好的方法！期待著?。?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: zhaolili    時(shí)間: 2009-5-22 22:40
我也是用灰份做，我用的是仲裁法高錳酸鉀滴定，可是鈣的結(jié)果偏低，不知道是哪里出的問題。
麻煩各位幫我解決一下。謝謝



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