畜牧人

標(biāo)題: 請(qǐng)教：測(cè)定真蛋白 [打印本頁]
作者: 阿土    時(shí)間: 2008-9-12 10:28
標(biāo)題: 請(qǐng)教：測(cè)定真蛋白
我們單位以前都不測(cè)真蛋白的，可現(xiàn)在突然讓測(cè)了，不會(huì)啊。我就自己照書上操作的，現(xiàn)在有幾個(gè)問題，希望高手們幫忙解答啊，
1：加硫酸銅和氫氧化鈉的時(shí)候是繼續(xù)讓樣品液體在電爐子上加熱呢還是不用再加熱了
2：為什么我把過濾后的沉淀和濾紙放在65攝氏度的烘箱干燥2小時(shí)候，濾紙都還是濕的呢
3：有什么方法能把濾紙上的沉淀全部簡(jiǎn)單的轉(zhuǎn)到凱氏燒瓶中呢
作者: glory143    時(shí)間: 2008-9-12 10:35
直接把沉淀加濾紙丟進(jìn)燒瓶中就好了，難道還要把沉淀從濾紙上取下來？？
作者: 阿土    時(shí)間: 2008-9-12 10:56
哦，我還真以為是把沉淀都弄下來呢，謝啦
作者: 長(zhǎng)沙雙胞胎    時(shí)間: 2008-9-12 11:06
:P: :D:: 太專:lol :P: 業(yè)
作者: beijingbrill    時(shí)間: 2008-9-12 11:19
在測(cè)定真蛋白時(shí)可以直接水洗，其結(jié)果和堿洗幾乎無差別，而且過濾起來速度快，另外過濾完后無需徹底烘干，只要感覺濾紙無水即可
作者: dy3166    時(shí)間: 2008-9-12 11:40
標(biāo)題: 回復(fù) 樓主 阿土 的帖子
加硫酸銅時(shí)要加熱，但假氫氧化鈉則不用加熱
沉淀要i烘干一些，如水分太多會(huì)降低硫酸濃度，易起泡，加長(zhǎng)消化時(shí)間。
作者: tony2005428    時(shí)間: 2008-9-12 11:49
1、加硫酸銅和氫氧化鈉的時(shí)候是不用繼續(xù)加熱就可以
2、把過濾后的沉淀和濾紙放在烘箱烘干，是防止水分太多在消化時(shí)易起泡沫，消化不完全
3、直接把過濾后的沉淀和濾紙一起放在消化管內(nèi)消化就可以了，不用取下來
:xuehu: :xuehu:
作者: tony2005428    時(shí)間: 2008-9-12 16:59
標(biāo)題: 回復(fù) 8樓 wujianping992 的帖子
wujianping992
你做出來的真蛋白是不是比粗蛋白還高?。?？
呵呵呵
那肯定是出錯(cuò)了？？
@@004: :tiaotiao:
作者: houweqi    時(shí)間: 2008-11-3 10:38
標(biāo)題: 請(qǐng)教
我第一次測(cè)一個(gè)氨基酸粉的真蛋白，粗蛋白為106%左右，可測(cè)真蛋白才7%左右。我覺得是在加完硫酸銅和氫氧化鈉過濾時(shí)，燒杯壁上粘了很多，怎么洗都洗不下來，是不是這個(gè)原因引起的。請(qǐng)教高手燒杯壁上粘的對(duì)結(jié)果有影響嗎？如果有，怎么洗下來。
作者: yarain10    時(shí)間: 2009-12-21 20:04
嘎嘎，今天也做了第一次，
作者: yarain10    時(shí)間: 2009-12-21 20:05
在試樣的前處理過程中，“煮沸”要求是加熱至沸并保持30分鐘，目的是使試樣中的非蛋白氮類物質(zhì)充分溶解于水中。加10％硫酸銅溶液和25％氫氧化鈉溶液時(shí)最好采用移液管移取，然后沿著燒杯內(nèi)壁緩慢滴加，一方面防止局部氫氧化鈉太濃將溶解部分蛋白質(zhì)，這樣會(huì)導(dǎo)致最終結(jié)果偏低；另一方面是為了使試樣中的真蛋白質(zhì)充分鹽析：放置2小時(shí)或靜置過夜也是這個(gè)道理。沉淀物宜以雙層中速定量濾紙過濾，雙層濾紙可以加快過濾速度，同時(shí)又不致于將沉淀物過濾掉。濾液無SO+2表明了已充分洗滌沉淀物，因?yàn)槿绻麨V液中仍有SO+2 。則表明沉淀物中間仍可能夾雜有部分可溶性非蛋白氮類物質(zhì)(如NH )，若不繼續(xù)洗滌則將導(dǎo)致最終結(jié)果偏高。將濾紙和殘?jiān)?沉淀物)包好放入烘箱中于65～70cc下干燥2小時(shí)是為了使沉淀物充分干燥。一方面是為了避免沉淀物中仍?shī)A雜有一些氨類物質(zhì)(盡管這種情況一般不會(huì)發(fā)生。因?yàn)闉V液已經(jīng)過了氯化鋇試液的檢驗(yàn)，但仍不能排除因人眼觀察的局限性使其中間仍?shī)A雜有部分熱烘干的過程中揮發(fā)掉)；另一方面也是為了下一步試樣消化的順利進(jìn)行。因?yàn)槿绻嚇映睗?，炭化升溫過快，氣體驟然膨脹不易從凱氏燒瓶中散發(fā)出去，很容易使試樣與氣體一同沖出凱氏燒瓶從而導(dǎo)致消化失敗
作者: 孫銳利    時(shí)間: 2009-12-22 16:41
我還沒測(cè)過真蛋白呢？
作者: hongmei86    時(shí)間: 2010-1-14 15:53
真蛋白不是還可以用三氯乙酸法的蠻
作者: 煙花雨    時(shí)間: 2010-8-1 22:46
回復(fù) 11# yarain10
非常實(shí)用的解答，真蛋白困惑我的問題，這里都能找到答案！:)3:
作者: 陽光綠茶008    時(shí)間: 2010-8-1 22:53
學(xué)習(xí)了，但是你不知道你用的什么方法呀，有沒有考慮過準(zhǔn)確性的問題



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