畜牧人

標(biāo)題: 求助：硫苷含量的測定方法 [打印本頁]
作者: glory143    時(shí)間: 2008-10-13 11:14
標(biāo)題: 求助：硫苷含量的測定方法
誰能提供一下菜籽粕中硫苷含量的測定方法，簡便實(shí)用的，多謝了
作者: 317sunny    時(shí)間: 2008-12-17 22:12
硫苷的測定方法有多種，根據(jù)被分析的對(duì)象，硫苷分析方法可分為兩類：第一類是測定硫苷降解產(chǎn)物，間接計(jì)算硫苷的含量；第二類是直接測定完整硫苷或其衍生物；根據(jù)分析目的不同，硫苷的分析方法又可分為總量法和分量法：總量法是測定樣品中所有硫苷總含量，而不考慮其側(cè)鏈（R-）的差異；分量法是測定樣品中硫苷的每一種硫苷組份的含量，以研究樣品中硫苷組成類型的差異及不同硫苷組份的生物效應(yīng)。按化學(xué)方法分類則有重量法、銀鹽滴定法、碘量法、比色法、色譜法和近紅外光譜法。高效液相色譜法、專用速測儀法（分光光度法）和近紅外光譜法是目前國內(nèi)外油菜籽中硫苷含量測定最常用的方法，下面對(duì)這三種方法作重點(diǎn)介紹。
一、高效液相色譜法
1.方法原理
用70%甲醇水溶液提取硫苷，在陰離子交換樹脂上純化并酶解脫去硫酸根，反相C18柱分離，紫外檢測器檢測硫代葡萄糖苷。
2.儀器設(shè)備
（1）分析天平
（2）研缽或粉碎機(jī)
（3）漩渦混合器
（4）水浴鍋
（5）離心機(jī)
（6）高效液相色譜儀
3.結(jié)果表示
檢測結(jié)果顯示為色譜峰，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)樣品對(duì)檢測結(jié)果進(jìn)行定性和定量換算。硫苷測定結(jié)果表示方法有三種，一是干基餅粕中硫苷含量；二是含8.5%水雜餅粕中硫苷含量；三是含8.5%水雜油菜籽中硫苷含量。
該方法的優(yōu)點(diǎn)是測定準(zhǔn)確、可測定硫苷分量和總量，適于國家及部級(jí)質(zhì)檢中心用于出據(jù)第三方公正數(shù)據(jù)的檢測及品種審定和區(qū)域試驗(yàn)材料硫苷含量的精確測定。缺點(diǎn)是儀器設(shè)備昂貴、測試費(fèi)用高、條件嚴(yán)格，硫酸酯酶等大部分試劑及消耗品均需進(jìn)口，且分離測定時(shí)間長，不適用于菜籽收購過程中的現(xiàn)場快速測定。
二、專用速測儀法（分光光度法）
1.方法原理
油菜籽中硫苷與特異性酶和專用顯色劑反應(yīng)生成有特征吸收峰的有色產(chǎn)物，采用分光光度法測定硫苷含量。
2.儀器設(shè)備
（1）微型粉碎機(jī)
（2）芥酸硫苷速測儀
3.結(jié)果表示
測定結(jié)果直接顯示為每克餅粕或每克油菜籽中所含硫苷總量的微摩爾數(shù)（μmol/g），結(jié)果直接讀數(shù)，不需要換算。
三、近紅外光譜法
1.方法原理
根據(jù)光譜與硫苷含量之間的數(shù)學(xué)模型預(yù)測硫苷含量。
2.儀器設(shè)備
（1）近紅外儀
3.結(jié)果表示
近紅外預(yù)測結(jié)果表示與建模用油菜籽樣品標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)值表示一致。
該方法是80年代后期迅速崛起的一種物理測試技術(shù)，具有分析速度快、對(duì)材料無損傷、無化學(xué)試劑污染等特點(diǎn)，但受測定原理的影響，適用于高含量成分的檢測，在雙低優(yōu)質(zhì)油菜中硫苷含量的檢測應(yīng)用受到限制。



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