畜牧人

稀釋劑的制備

采精杯的準(zhǔn)備

1.取一個(gè)300ml-450ml的一次性泡沫塑料杯，它的作用是保溫，在采集精液過(guò)程中能夠減少精液溫度的流失。

2．在杯子頂部放置2至4層的過(guò)濾紙，作用是隔離精液中的凝膠。

3. 用橡皮筋將過(guò)濾紙固定在泡沫塑料杯，防止移動(dòng)。

4.在過(guò)濾紙中間用手指壓下得凹下去一點(diǎn)，避免采精時(shí)精液溢出杯外。

5.在泡沫杯外面再套一個(gè)塑料袋。

6.將套有塑料袋的杯子放入采精保溫杯中，將塑料袋沿著保溫杯邊沿翻下來(lái)，這樣保溫杯在采精過(guò)程中能保持干凈。

7.將保溫杯放在恒溫箱內(nèi)備用。注意：保溫杯敞開(kāi)，不要蓋蓋子。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備的準(zhǔn)備

A 將上次剩余稀釋液放入水浴鍋，預(yù)熱到人體溫度。

B 將瓶子和瓶蓋放入恒溫箱

C為了滿足一天的需要，你可能需要再配制一些新的稀釋液

D查看檔案，確定今天采精的公豬，這些公豬是否有某些問(wèn)題以及行為怪癖需要告知采精人員。

F 確保預(yù)熱板中能提供足夠的蓋玻片和載玻片來(lái)滿足當(dāng)天工作需要。

精液采集方法

A 從恒溫箱里拿出準(zhǔn)備好的采精杯

B用蓋子將保溫瓶蓋上，直到公豬射出精液才打開(kāi)。

C將公豬帶入采精間，讓公豬爬跨假母臺(tái)或發(fā)情母豬。

D 當(dāng)公豬開(kāi)始沖插時(shí)，輕柔將陰莖鞘里包皮液和尿液擠出(擠牛奶程序)，用干燥的紙巾將陰莖鞘擦拭干凈。一些公豬（特別是年老的公豬）的陰莖鞘有很長(zhǎng)的毛發(fā)，小心修剪掉毛發(fā)，以方便采精。

E 戴上一只無(wú)菌、無(wú)塵、抗靜電的手套，戴手套的手握空拳。

F 當(dāng)公豬的陰莖進(jìn)入你的空拳中，握住陰莖。當(dāng)公豬認(rèn)為陰莖是被子宮頸鎖住，就會(huì)伸長(zhǎng)陰莖，停止沖插。

G 不要強(qiáng)拉陰莖，溫柔地順著它伸長(zhǎng)，開(kāi)始收集精液。

H要保持陰莖在包皮之外，防止尿液或包皮液沿著陰莖流入樣本，對(duì)精子產(chǎn)生傷害。

射精包括四個(gè)階段：初期精液期；富含精子期；后期精液期；啫喱部分。初期和后期的精液不要采集，這兩個(gè)階段主要成分為精液血漿，外觀呈透明到半透明狀；富含精子期的成份外觀為白色或米白色，是應(yīng)該采集的精液；啫喱部分自始自終存在于整個(gè)射精過(guò)程。通過(guò)采精杯上的過(guò)濾紙可以將精液與啫喱分離。

第一階段與第二節(jié)段變化明顯，而第二與第三階段是逐漸變化的，當(dāng)射出的精液變成較白的米白色，就可以開(kāi)始收集了。相反的，當(dāng)精液開(kāi)始出現(xiàn)水樣時(shí)，停止收集將采精杯拿走。但一定要讓公豬做完整個(gè)射精過(guò)程。

精液評(píng)估

檢測(cè)新鮮精液，以DVM精子濃度測(cè)試儀為例：

• 按ON/OFF打開(kāi)DVM濃度測(cè)試儀，會(huì)出現(xiàn)VALUE DIAGNOSTIC SYSTEM （有價(jià)值的診斷系統(tǒng)），接著出現(xiàn)MODEL 942 %T （942模型）。顯示INSERT BLACK （插入空白對(duì)照）
• 用移液器從稀釋劑里取1ml加入到試管中，將只裝有稀釋劑的試管放入DVM中，當(dāng)出現(xiàn)REMOVE BLACK取走試管，DVM上面顯示INSERT SAMPLE 。
• 用移液器向試管里添加25ul精液，混勻。注意：添加時(shí)要清除槍頭外壁所粘精液。
• 然后將裝有測(cè)試精液樣本的稀釋劑試管放入，會(huì)顯示READING SAMPLEM PLEASE WAIT ：即正在讀取，請(qǐng)等候，最后出現(xiàn) 15-90%T的數(shù)字。
• 記錄百分?jǐn)?shù)，對(duì)照所給表格得出所測(cè)精液濃度。
• 如果數(shù)據(jù)結(jié)果出現(xiàn)大于90%時(shí)，從新檢測(cè)，1ml稀釋劑加入50ul的精液樣本，測(cè)得結(jié)果對(duì)照表格的濃度數(shù)除以2 即為所測(cè)精液濃度。
• 如果數(shù)據(jù)結(jié)果出現(xiàn)小于15%時(shí)，從新檢測(cè)，2ml稀釋劑加入25ul的精液樣本，測(cè)得結(jié)果對(duì)照表格的濃度數(shù)乘2 即為所測(cè)精液濃度。
•  測(cè)量精液溫度。
• 向精液中加入等量的稀釋液。確保稀釋液的溫度比精液的溫度低，但溫差小于一度。將稀釋液沿精液杯邊沿倒入，注意在任何環(huán)境下稀釋液的燒杯與精液杯都不能接觸，防止沾染到稀釋液和其他精液樣本。
• 緩慢攪勻上述1：1液體，吸取一滴稀釋精液放在載玻片上，蓋上蓋玻片。
• 樣本評(píng)估：用1-10分評(píng)判a精子活性、b尾巴畸形率，c尾巴上的小點(diǎn)。

儲(chǔ)存精液的檢查

精液冷藏超過(guò)24小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間，在人工授精前，都必須檢查精子活性。

A從冷藏箱中取出精液管，使精子混勻。

B 吸取一滴稀釋精液放在預(yù)熱的載玻片上

C蓋上預(yù)熱好的蓋玻片

D用1-10分標(biāo)準(zhǔn)，評(píng)估樣本的活性和活動(dòng)能力

E精液樣本數(shù)值為5或低于5就不能用于人工授精。如果你仍想要用這些精液做人工受精，就必須雙倍用量。

精液處理

把1：1精液放置至少10分鐘，使其達(dá)到平衡，然后再把它稀釋到確定的量。

A  根據(jù)精液質(zhì)量分析數(shù)據(jù)，確定能夠配置的最大精液劑量。

劑量數(shù)=精液體積╳精子濃度╳精子活率 /每瓶活性精子數(shù)量。每瓶的精子數(shù)量范圍為30億個(gè)左右優(yōu)良精子細(xì)胞。

B計(jì)算所需精液總量減去1：1稀釋精液的量，既得到配成所需精液量所需要的稀釋液的量。

C確保稀釋液的溫度比1：1溶液的溫度低，但溫差小于1 度，將精液沿著燒杯壁倒入，注意不要使兩個(gè)容器相互接觸。

D慢慢的在收集杯和燒杯之間來(lái)回倒稀釋精液，使精液充分混勻。

E 將所需數(shù)量的瓶子和蓋子從恒溫箱里取出，放在紙巾上。

F將樣本倒入試管，然后開(kāi)始裝瓶，每瓶裝80ml精液。蓋好瓶蓋，寫上公豬編號(hào)，采精日期。

G將瓶子放入紙盒，在室溫內(nèi)放置一段時(shí)間后，再將紙盒和樣本試管放入冷藏箱，或用毛巾包裹瓶子后直接放入冷藏箱內(nèi) 保持在16C.

H使用過(guò)的燒杯和保溫杯放入水槽內(nèi)，避免采集其他精液樣本再次使用它們。