畜牧人

標題: 急需幫助！ [打印本頁]
作者: zmyqhdcl    時間: 2009-5-30 10:32
標題: 急需幫助！
好長時間了，測原料蛋白高，高2-3個，始終找不到原因，急需幫助，大家給分析一下原因吧！
作者: 金峰    時間: 2009-5-30 11:02
回答不了，幫你頂一下。
作者: ３８５２３８７    時間: 2009-5-30 11:16
再把你的標準液標定一下，滴定是一定要做空白。
作者: kltdzhong    時間: 2009-5-30 11:21
使用的標準液標有沒有問題
作者: 無照駕駛    時間: 2009-5-30 11:54
造成誤差有很多原因的，找標準樣品做一下對照吧！
作者: 冰夜衣    時間: 2009-5-30 13:37
也許你這些都做了，但是還是高！
那就是操作和儀器的原因了！
作者: 雨不碎    時間: 2009-5-30 14:00
有哥們這么做，每次測完老低兩個蛋白，所以他每次測完再加兩個蛋白就正常了，估計是一起問題，要么你操作當中有啥問題！
作者: zmyqhdcl    時間: 2009-5-30 16:18
我做這項工作三年了，如果操作有問題我想不會一直找不出。
首先我懷疑天平不準，于是校正天平，結果不行。
堿液我也換了
空白也做了
標準溶液我也重新標了
基準物質我也換了還是不行
這些原因都排除了
我不知道還與什么有關系
和儀器有什么關系呢
和蒸餾裝置有關系嗎

真是該想到的都想了，就是找不出來
怎么辦啊？
作者: 葉知秋    時間: 2009-5-30 16:37
用硫酸銨測定一下定氮裝置的氮回收率！如果用 回收率進行較正后還不正常！有可能是原料變異引起的，比如配方時未計算氨基酸的粗蛋白含量等！
如果用的是杜馬斯燃燒法測定的，那通常都比凱氏法高（玉米和豆粕等通常會高出2-4個百分點）。
作者: zmyqhdcl    時間: 2009-5-30 18:02
也就是測測回收率可以證明有沒有問題，如果回收率好了會是什么問題呢？
作者: XIANGTONGQIANGL    時間: 2009-5-30 19:41
在線時加我,我做化驗有十年,一定可以幫你找到原因,qq:414147713
作者: zmyqhdcl    時間: 2009-5-31 09:24
11# XIANGTONGQIANGL
怎么沒人給出答案??？

[ts]zmyqhdcl 于 2009-5-31 11:16 補充以下內容[/ts]

用硫酸銨測回收率，21.15%

[ts]zmyqhdcl 于 2009-5-31 17:36 補充以下內容[/ts]

但是測出來就是高啊，2-3個蛋白?。?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: 葉知秋    時間: 2009-5-31 18:19
回收率是正常的，可以排除氫氧化鈉和酸，以及蒸餾裝置的問題，樓主的操作也不會有問題！
樓主是不是測配合飼料時才高2-3個點啊？還是測所有的原料都高2-3個點呢？
作者: kxwwj    時間: 2009-5-31 18:36
回答不了，幫你頂一下
作者: zmyqhdcl    時間: 2009-6-1 07:32
測所有的原料都高2-3個點
作者: tj4587_78    時間: 2009-6-1 08:35
本帖最后由 tj4587_78 于 2009-6-1 08:39 編輯

到一步,問題已不能在網上解決了,只有到現(xiàn)場看看了!
作者: 510228206    時間: 2009-6-1 08:39
那成品結果呢，也高2-3個蛋白嗎？如果成品都正常是不是找一下原料的原因呢
作者: wangxiang213    時間: 2009-6-1 08:43
找不同的人來測,每個人的細心程度不同,對加試劑的準確估計度也不同
作者: gbsyyx    時間: 2009-6-1 11:22
是不是水質問題？樣品空白和試劑空白怎么樣啊？
作者: 馬林艾斯    時間: 2009-6-1 15:04
儀器有換過什么零件嗎？如管。
作者: glory143    時間: 2009-6-1 16:07
測所有的原料都高2-3個點
zmyqhdcl 發(fā)表于 2009-6-1 07:32

既然是原料,何來高2-3個點?
你的標準是什么?
作者: 白云旭飛    時間: 2009-6-1 16:56
測蛋白時，不要同時使用氨水，因為氨水容易揮發(fā)，硼酸接收瓶外置時容易吸收氨氣。
作者: 4531883    時間: 2009-6-1 19:18
試劑的問題或者機器的問題?。?！
作者: zmyqhdcl    時間: 2009-6-8 10:59
蛋白質含量的測定
衡量食品的營養(yǎng)成分時，要測定蛋白質含量，但由于蛋白質組成及其性質的復雜性，在食品分析中，通常用食品的總氮量表示，蛋白質是食品含氮物質的主要形式，每一蛋白質都有其恒定的含氮量，用實驗方法求得某樣品中的含氮量后，通過一定的換算系數。即可計算該樣品的蛋白質含量。
    一般食品蛋白質含氮量為l0％如肉、蛋、豌豆、玉米等，其換算系數為6.25，小麥取5.70，大米5.95、乳制品6.38、大豆5.17，動物膠5.55。
   一、目的與要求：
    掌握微量凱氏法測定蛋白質總氮量的原理及操作技術。包括樣品的消
化，蒸餾吸收及滴定與含氮量的計算。
    二、原理：
    凱氏定氮法：食品經加硫酸消化使蛋白質分解，其中氮素與硫酸化合成硫酸銨。然后加堿蒸餾使氨游離，用硼酸液吸收后，再用鹽酸或硫酸滴定根據鹽酸消耗量，再乘以一定的數值即為蛋白含量，其化學反應式如下。
    (1)  2NH2(CH2)2COOH+13H2S04    (NH4)2S04+6C02+12S02+  16H2
    (2)(NH4)2SO4+2NAOH-----2NH2+2H2O+NA2SO4
    (3)2NH3+4H3BO3----(NH4)2B4O7+5H2O
(4)(NH4)2B407+H2S04+5H20-(NH4)9SO4+4H2BO2
三、試劑與儀器：
1、硫酸鉀
2、硫酸銅   
3、硫酸
4、2％硼酸溶液
5、40％氫氧化鈉溶液
6、混合指示劑：把溶解于95％乙醇的0.l％溴甲酚綠溶液10毫升和溶于95％乙醇的0.l％甲基紅溶液2毫升混合而成．
    7、0.OINHCL標準溶液或0．01N硫酸標準溶液．
8、凱氏微量定氮儀一套。
9、定氮瓶100m1或50ml一只。
10、三角瓶150ml 3只。
11、量筒50ml、lOml、lOOml。
12、吸量管10ml只。
13、酸式滴定管1支。
14、容量瓶100毫升1只。
15、小漏斗1只。
四、操作方法：
1、
樣品處理：精密稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當氮30-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45度角斜支于有小孔的石棉網上，小火加熱，待內容物全部炭化，泡沫完全停止后，加強火力，并保持瓶內液體微沸，至液體呈藍綠色澄清透明后，再繼續(xù)加熱0.5小時。取下放冷，小心加20ml水，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸銨同一方法做試劑空白試驗。
2、
按圖裝好定氮裝置，于水蒸氣發(fā)生器內裝水約2/3處加甲基紅指示劑數滴及數毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數粒玻璃珠以防暴沸，用調壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶內的水。
3、
想接收瓶內加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示劑1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯流入反應室，并以10ml水洗滌小燒杯使流入反應室內，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應室，立即將玻璃蓋塞緊，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾，蒸氣通入反應室使氨通過冷凝管而進入接收瓶內，蒸餾5min。移動接收瓶，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min，然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.01N硫酸或0.01N鹽酸標準溶液定至灰色或藍紫色為終點。
同時吸取10.0ml試劑空白消化液按3操作。
計算：
X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) +F*100　
X：樣品中蛋白質的含量，g；
V1：樣品消耗硫酸或鹽酸標準液的體積，ml；
V2：試劑空白消耗硫酸或鹽酸標準溶液的體積，ml；
N：硫酸或鹽酸標準溶液的當量濃度；
0.014：1N硫酸或鹽酸標準溶液1ml相當于氮克數；
m：樣品的質量（體積），g（ml）；
F：氮換算為蛋白質的系數。

注：
（1）
樣品應是均勻的，固體樣品應預先研細混勻，液體樣品應振搖或攪拌均勻。
（2）
樣品放入定氮瓶內時，不要沾附頸上，萬一沾附可用少量水沖下，以免被檢樣消化不完全，結果偏低。
（3）
消化時如不容易呈透明溶液，可將定氮瓶放冷后，慢慢加入30%過氧化氫2-3ml，促使氧化。
（4）
在整個消化過程中，不要用強火，保持和緩的沸騰，使火力集中在凱氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白質在無硫酸存在的情況下。使氮有損失。
（5）
如硫酸缺少，過多的硫酸鉀會引起氨的損失，這樣會形成硫酸氫鉀，而不與氨作用，因此當硫酸過多的被消耗或樣品中脂肪含量過高時，要增加硫酸的量。
（6）
加入硫酸鉀的作用為增加溶液的沸點，硫酸銅為催化劑，硫酸銅在蒸餾時作堿性反應的指示劑。
（7）
混合指示劑在堿性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。如果沒有溴甲酚綠，可單獨使用0.1%甲基紅乙醇溶液。
（8）
氨是否完全蒸餾出來，可用PH試紙試餾出液是否為堿性。
（9）
吸收葉也可以用0.01當量的酸代表硼酸，過剩的酸液用0.01N堿液滴定，計算時，A為試劑空白消耗堿液數，B為樣品消耗堿液數，N為堿液濃度，其余均相同。
（10）
以硼酸為氨的吸收液，可省去標定堿液的操作，且硼酸的體積要求并不嚴格，亦可免去用移液管，操作比較簡便。
（11）
向蒸餾瓶中加入濃堿時，往往出現(xiàn)褐色沉淀物，這是由于分解促進堿與加入的硫酸銅反應，生成氫氧化銅，經加熱后又分解生成氧化銅的沉淀。有時銅離子與氨作用，生成深蘭色的結合物[Cu(NH3)4]++


[ts]zmyqhdcl 于 2009-6-8 11:00 補充以下內容[/ts]

這種方法準不準啊
作者: 做飼料的    時間: 2009-6-8 16:41
粉碎樣品呢？？樣品發(fā)熱會使水份含量變少，蛋白變高的?。?guzhang:
作者: ziyoutianxia    時間: 2009-6-10 08:36
你把同批原料樣品留出兩份，一份化驗室自檢，一份送質量監(jiān)督局檢驗，對比一下化驗結果，然后再分析原因！



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