畜牧人

標(biāo)題: 急需幫助！ [打印本頁(yè)]
作者: zmyqhdcl    時(shí)間: 2009-5-30 10:32
標(biāo)題: 急需幫助！
好長(zhǎng)時(shí)間了，測(cè)原料蛋白高，高2-3個(gè)，始終找不到原因，急需幫助，大家給分析一下原因吧！
作者: 金峰    時(shí)間: 2009-5-30 11:02
回答不了，幫你頂一下。
作者: ３８５２３８７    時(shí)間: 2009-5-30 11:16
再把你的標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)定一下，滴定是一定要做空白。
作者: kltdzhong    時(shí)間: 2009-5-30 11:21
使用的標(biāo)準(zhǔn)液標(biāo)有沒(méi)有問(wèn)題
作者: 無(wú)照駕駛    時(shí)間: 2009-5-30 11:54
造成誤差有很多原因的，找標(biāo)準(zhǔn)樣品做一下對(duì)照吧！
作者: 冰夜衣    時(shí)間: 2009-5-30 13:37
也許你這些都做了，但是還是高！
那就是操作和儀器的原因了！
作者: 雨不碎    時(shí)間: 2009-5-30 14:00
有哥們這么做，每次測(cè)完老低兩個(gè)蛋白，所以他每次測(cè)完再加兩個(gè)蛋白就正常了，估計(jì)是一起問(wèn)題，要么你操作當(dāng)中有啥問(wèn)題！
作者: zmyqhdcl    時(shí)間: 2009-5-30 16:18
我做這項(xiàng)工作三年了，如果操作有問(wèn)題我想不會(huì)一直找不出。
首先我懷疑天平不準(zhǔn)，于是校正天平，結(jié)果不行。
堿液我也換了
空白也做了
標(biāo)準(zhǔn)溶液我也重新標(biāo)了
基準(zhǔn)物質(zhì)我也換了還是不行
這些原因都排除了
我不知道還與什么有關(guān)系
和儀器有什么關(guān)系呢
和蒸餾裝置有關(guān)系嗎

真是該想到的都想了，就是找不出來(lái)
怎么辦??？
作者: 葉知秋    時(shí)間: 2009-5-30 16:37
用硫酸銨測(cè)定一下定氮裝置的氮回收率！如果用 回收率進(jìn)行較正后還不正常！有可能是原料變異引起的，比如配方時(shí)未計(jì)算氨基酸的粗蛋白含量等！
如果用的是杜馬斯燃燒法測(cè)定的，那通常都比凱氏法高（玉米和豆粕等通常會(huì)高出2-4個(gè)百分點(diǎn)）。
作者: zmyqhdcl    時(shí)間: 2009-5-30 18:02
也就是測(cè)測(cè)回收率可以證明有沒(méi)有問(wèn)題，如果回收率好了會(huì)是什么問(wèn)題呢？
作者: XIANGTONGQIANGL    時(shí)間: 2009-5-30 19:41
在線時(shí)加我,我做化驗(yàn)有十年,一定可以幫你找到原因,qq:414147713
作者: zmyqhdcl    時(shí)間: 2009-5-31 09:24
11# XIANGTONGQIANGL
怎么沒(méi)人給出答案??？

[ts]zmyqhdcl 于 2009-5-31 11:16 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

用硫酸銨測(cè)回收率，21.15%

[ts]zmyqhdcl 于 2009-5-31 17:36 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

但是測(cè)出來(lái)就是高啊，2-3個(gè)蛋白?。?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: 葉知秋    時(shí)間: 2009-5-31 18:19
回收率是正常的，可以排除氫氧化鈉和酸，以及蒸餾裝置的問(wèn)題，樓主的操作也不會(huì)有問(wèn)題！
樓主是不是測(cè)配合飼料時(shí)才高2-3個(gè)點(diǎn)??？還是測(cè)所有的原料都高2-3個(gè)點(diǎn)呢？
作者: kxwwj    時(shí)間: 2009-5-31 18:36
回答不了，幫你頂一下
作者: zmyqhdcl    時(shí)間: 2009-6-1 07:32
測(cè)所有的原料都高2-3個(gè)點(diǎn)
作者: tj4587_78    時(shí)間: 2009-6-1 08:35
本帖最后由 tj4587_78 于 2009-6-1 08:39 編輯

到一步,問(wèn)題已不能在網(wǎng)上解決了,只有到現(xiàn)場(chǎng)看看了!
作者: 510228206    時(shí)間: 2009-6-1 08:39
那成品結(jié)果呢，也高2-3個(gè)蛋白嗎？如果成品都正常是不是找一下原料的原因呢
作者: wangxiang213    時(shí)間: 2009-6-1 08:43
找不同的人來(lái)測(cè),每個(gè)人的細(xì)心程度不同,對(duì)加試劑的準(zhǔn)確估計(jì)度也不同
作者: gbsyyx    時(shí)間: 2009-6-1 11:22
是不是水質(zhì)問(wèn)題？樣品空白和試劑空白怎么樣?。?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: 馬林艾斯    時(shí)間: 2009-6-1 15:04
儀器有換過(guò)什么零件嗎？如管。
作者: glory143    時(shí)間: 2009-6-1 16:07
測(cè)所有的原料都高2-3個(gè)點(diǎn)
zmyqhdcl 發(fā)表于 2009-6-1 07:32

既然是原料,何來(lái)高2-3個(gè)點(diǎn)?
你的標(biāo)準(zhǔn)是什么?
作者: 白云旭飛    時(shí)間: 2009-6-1 16:56
測(cè)蛋白時(shí)，不要同時(shí)使用氨水，因?yàn)榘彼菀讚]發(fā)，硼酸接收瓶外置時(shí)容易吸收氨氣。
作者: 4531883    時(shí)間: 2009-6-1 19:18
試劑的問(wèn)題或者機(jī)器的問(wèn)題?。?！
作者: zmyqhdcl    時(shí)間: 2009-6-8 10:59
蛋白質(zhì)含量的測(cè)定
衡量食品的營(yíng)養(yǎng)成分時(shí)，要測(cè)定蛋白質(zhì)含量，但由于蛋白質(zhì)組成及其性質(zhì)的復(fù)雜性，在食品分析中，通常用食品的總氮量表示，蛋白質(zhì)是食品含氮物質(zhì)的主要形式，每一蛋白質(zhì)都有其恒定的含氮量，用實(shí)驗(yàn)方法求得某樣品中的含氮量后，通過(guò)一定的換算系數(shù)。即可計(jì)算該樣品的蛋白質(zhì)含量。
    一般食品蛋白質(zhì)含氮量為l0％如肉、蛋、豌豆、玉米等，其換算系數(shù)為6.25，小麥取5.70，大米5.95、乳制品6.38、大豆5.17，動(dòng)物膠5.55。
   一、目的與要求：
    掌握微量凱氏法測(cè)定蛋白質(zhì)總氮量的原理及操作技術(shù)。包括樣品的消
化，蒸餾吸收及滴定與含氮量的計(jì)算。
    二、原理：
    凱氏定氮法：食品經(jīng)加硫酸消化使蛋白質(zhì)分解，其中氮素與硫酸化合成硫酸銨。然后加堿蒸餾使氨游離，用硼酸液吸收后，再用鹽酸或硫酸滴定根據(jù)鹽酸消耗量，再乘以一定的數(shù)值即為蛋白含量，其化學(xué)反應(yīng)式如下。
    (1)  2NH2(CH2)2COOH+13H2S04    (NH4)2S04+6C02+12S02+  16H2
    (2)(NH4)2SO4+2NAOH-----2NH2+2H2O+NA2SO4
    (3)2NH3+4H3BO3----(NH4)2B4O7+5H2O
(4)(NH4)2B407+H2S04+5H20-(NH4)9SO4+4H2BO2
三、試劑與儀器：
1、硫酸鉀
2、硫酸銅   
3、硫酸
4、2％硼酸溶液
5、40％氫氧化鈉溶液
6、混合指示劑：把溶解于95％乙醇的0.l％溴甲酚綠溶液10毫升和溶于95％乙醇的0.l％甲基紅溶液2毫升混合而成．
    7、0.OINHCL標(biāo)準(zhǔn)溶液或0．01N硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液．
8、凱氏微量定氮儀一套。
9、定氮瓶100m1或50ml一只。
10、三角瓶150ml 3只。
11、量筒50ml、lOml、lOOml。
12、吸量管10ml只。
13、酸式滴定管1支。
14、容量瓶100毫升1只。
15、小漏斗1只。
四、操作方法：
1、
樣品處理：精密稱取0.2-2.0g固體樣品或2-5g半固體樣品或吸取10-20ml液體樣品（約相當(dāng)?shù)?/font>30-40mg），移入干燥的100ml或500ml定氮瓶中，加入0.2g硫酸銅，3g硫酸鉀及20毫升硫酸，稍搖勻后于瓶口放一小漏斗，將瓶以45度角斜支于有小孔的石棉網(wǎng)上，小火加熱，待內(nèi)容物全部炭化，泡沫完全停止后，加強(qiáng)火力，并保持瓶?jī)?nèi)液體微沸，至液體呈藍(lán)綠色澄清透明后，再繼續(xù)加熱0.5小時(shí)。取下放冷，小心加20ml水，放冷后，移入100ml容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混勻備用。取與處理樣品相同量的硫酸銅、硫酸鉀、硫酸銨同一方法做試劑空白試驗(yàn)。
2、
按圖裝好定氮裝置，于水蒸氣發(fā)生器內(nèi)裝水約2/3處加甲基紅指示劑數(shù)滴及數(shù)毫升硫酸，以保持水呈酸性，加入數(shù)粒玻璃珠以防暴沸，用調(diào)壓器控制，加熱煮沸水蒸氣發(fā)生瓶?jī)?nèi)的水。
3、
想接收瓶?jī)?nèi)加入10ml 2%硼酸溶液及混合指示劑1滴，并使冷凝管的下端插入液面下，吸取10.0ml樣品消化液由小玻璃杯流入反應(yīng)室，并以10ml水洗滌小燒杯使流入反應(yīng)室內(nèi)，塞緊小玻璃杯的棒狀玻璃塞。將10ml 40%氫氧化鈉溶液倒入小玻璃杯，提起玻璃塞使其緩慢流入反應(yīng)室，立即將玻璃蓋塞緊，并加水于小玻璃杯以防漏氣。夾緊螺旋夾，開始蒸餾，蒸氣通入反應(yīng)室使氨通過(guò)冷凝管而進(jìn)入接收瓶?jī)?nèi)，蒸餾5min。移動(dòng)接收瓶，使冷凝管下端離開液皿，再蒸餾1min，然后用少量水沖洗冷凝管下端外部。取下接收瓶，以0.01N硫酸或0.01N鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液定至灰色或藍(lán)紫色為終點(diǎn)。
同時(shí)吸取10.0ml試劑空白消化液按3操作。
計(jì)算：
X =(（V1-V2）*N*0.014)/( m*（10/100）) +F*100　
X：樣品中蛋白質(zhì)的含量，g；
V1：樣品消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液的體積，ml；
V2：試劑空白消耗硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，ml；
N：硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度；
0.014：1N硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1ml相當(dāng)于氮克數(shù)；
m：樣品的質(zhì)量（體積），g（ml）；
F：氮換算為蛋白質(zhì)的系數(shù)。

注：
（1）
樣品應(yīng)是均勻的，固體樣品應(yīng)預(yù)先研細(xì)混勻，液體樣品應(yīng)振搖或攪拌均勻。
（2）
樣品放入定氮瓶?jī)?nèi)時(shí)，不要沾附頸上，萬(wàn)一沾附可用少量水沖下，以免被檢樣消化不完全，結(jié)果偏低。
（3）
消化時(shí)如不容易呈透明溶液，可將定氮瓶放冷后，慢慢加入30%過(guò)氧化氫2-3ml，促使氧化。
（4）
在整個(gè)消化過(guò)程中，不要用強(qiáng)火，保持和緩的沸騰，使火力集中在凱氏瓶底部，以免附在壁上的蛋白質(zhì)在無(wú)硫酸存在的情況下。使氮有損失。
（5）
如硫酸缺少，過(guò)多的硫酸鉀會(huì)引起氨的損失，這樣會(huì)形成硫酸氫鉀，而不與氨作用，因此當(dāng)硫酸過(guò)多的被消耗或樣品中脂肪含量過(guò)高時(shí)，要增加硫酸的量。
（6）
加入硫酸鉀的作用為增加溶液的沸點(diǎn)，硫酸銅為催化劑，硫酸銅在蒸餾時(shí)作堿性反應(yīng)的指示劑。
（7）
混合指示劑在堿性溶液中呈綠色，在中性溶液中呈灰色，在酸性溶液中呈紅色。如果沒(méi)有溴甲酚綠，可單獨(dú)使用0.1%甲基紅乙醇溶液。
（8）
氨是否完全蒸餾出來(lái)，可用PH試紙?jiān)囸s出液是否為堿性。
（9）
吸收葉也可以用0.01當(dāng)量的酸代表硼酸，過(guò)剩的酸液用0.01N堿液滴定，計(jì)算時(shí)，A為試劑空白消耗堿液數(shù)，B為樣品消耗堿液數(shù)，N為堿液濃度，其余均相同。
（10）
以硼酸為氨的吸收液，可省去標(biāo)定堿液的操作，且硼酸的體積要求并不嚴(yán)格，亦可免去用移液管，操作比較簡(jiǎn)便。
（11）
向蒸餾瓶中加入濃堿時(shí)，往往出現(xiàn)褐色沉淀物，這是由于分解促進(jìn)堿與加入的硫酸銅反應(yīng)，生成氫氧化銅，經(jīng)加熱后又分解生成氧化銅的沉淀。有時(shí)銅離子與氨作用，生成深蘭色的結(jié)合物[Cu(NH3)4]++


[ts]zmyqhdcl 于 2009-6-8 11:00 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

這種方法準(zhǔn)不準(zhǔn)啊
作者: 做飼料的    時(shí)間: 2009-6-8 16:41
粉碎樣品呢？？樣品發(fā)熱會(huì)使水份含量變少，蛋白變高的?。?guzhang:
作者: ziyoutianxia    時(shí)間: 2009-6-10 08:36
你把同批原料樣品留出兩份，一份化驗(yàn)室自檢，一份送質(zhì)量監(jiān)督局檢驗(yàn)，對(duì)比一下化驗(yàn)結(jié)果，然后再分析原因！



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