畜牧人

標(biāo)題: 半微量測(cè)蛋白時(shí)爆沸 [打印本頁(yè)]
作者: yyang    時(shí)間: 2009-6-12 22:13
標(biāo)題: 半微量測(cè)蛋白時(shí)爆沸
半微量測(cè)蛋白時(shí)爆沸是什么原因，我們?cè)诶锩嬉布恿瞬Ａе楹痛晒艿?，原?lái)都沒(méi)有發(fā)生，最近發(fā)生這種現(xiàn)象，可能是什么原因?qū)е拢?hr noshade size="2" width="100%" color="#808080"> 作者: soloshow6138    時(shí)間: 2009-6-13 00:10
、 半微量凱氏定氮法（微量、 常量凱氏定氮法） 1 、 原理： 蛋白質(zhì)與硫酸和催化劑一同加熱消化使蛋白質(zhì)分解。 分解的氨與硫酸生成硫酸銨， 然后堿化蒸餾使氨分離。 用硼酸吸收后， 再用標(biāo)準(zhǔn)硫酸或鹽酸滴定， 根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)。 即為蛋白質(zhì)含量。 2 、 過(guò)程： 消化——蒸餾——吸收與滴定 （ 1 ） 消化： 樣品中含氮有機(jī)化合物經(jīng)濃H 2 SO 4 加熱消化， SO 2 使N 還原為 NH 3 氣， NH 3 與硫酸結(jié)合成（ NH 3 ） 2 SO 4 。 硫酸使有機(jī)物脫水， 有機(jī)物炭化生成碳， C 將 H 2 SO 4 還原為 SO 2 ， C 變?yōu)?CO 2 。 SO 2 使N 還原為 NH 3 ， SO 2 氧化為 SO 3 ， NH 3 +H 2 SO 4———— （ NH 4 ） 2 SO 4  （ 2 ） 蒸餾： （ NH 3 ） 2 SO 4 在堿性條件下， 釋放出氨。 （ 3 ） 吸收與滴定： 蒸餾時(shí)放出的氨， 可用一定量的標(biāo)準(zhǔn)硫酸溶液吸收， 用標(biāo)準(zhǔn)NaOH 反滴定過(guò)量的 H 2 SO 4 ， （或用硼酸溶液吸收， 再用標(biāo)準(zhǔn)HCL 或 H 2 SO 4 溶液直接滴定。） 則計(jì)算出總氮量， 推算pro 含量。 反應(yīng)如下： 2CH 3 CHNH 2 COOH+1 3H 2 SO 4 ——  （ NH 4 ） 2 SO 4 +6CO 2 +1 2SO 2 +1 6H 2 O （ pro 為氨基丙酸） （ NH 4 ） 2 SO 4 +2NaOH——２ NH 3 +2H 2 O+Na 2 SO 4  NH 4 HB 4 O 7 +HCL+5H 2 O——NH 4 CL+4H 3 BO 3  3 、 樣品的分解條件： 在消化過(guò)程中， 為了加速分解過(guò)程， 常加入下列物質(zhì)： （ 1 ） K 2 SO 4 或 Na 2 SO 4 作用： 是提高溶液的沸點(diǎn)， 加速對(duì)有機(jī)物的分解作用。 Na 2 SO 4 不及 K 2 SO 4 效果好。（ 2 ） 催化劑： 而且Hgo. Hg 是劇毒物質(zhì)。 注意通風(fēng)污染環(huán)境價(jià)格貴。 a. CuSO 4 作催化劑呈藍(lán)色， 還可作下一步蒸餾時(shí)作堿性反應(yīng)的指示劑。 b. 氧化汞和汞： HgO 是效能較高的催化劑， 可得氮的最佳回收率。 注意： 容易生成硫化汞沉淀可使反應(yīng)液引起暴沸， 防止暴沸的措施是添加鋅粒。 而且Hgo. Hg 是劇毒物質(zhì)。注意通風(fēng)污染環(huán)境價(jià)格貴。  c. 硒粉： 催化效能較強(qiáng)， 可大大縮短消化 時(shí)間， 但用量不宜過(guò)多， 消化時(shí)間不可過(guò)久， 并小心控制溫度， 否則將引起氮素?fù)p失。 (3) 氧化劑： 添加氧化劑是幫助有機(jī)物消化， 但要防止NH 3 進(jìn)一步氧化為 N 。 a. 次氯酸鉀和高錳酸鉀： 強(qiáng)氧化劑會(huì)使氨氧化為氮而損失， 一般不易使用， 但含C 高時(shí)， 可用 KmnO 4 。 b. 過(guò)氧化氫： 消化速度高， 操作簡(jiǎn)便， 須冷卻后加入過(guò)氧化氫。
作者: 雙胞胎    時(shí)間: 2009-6-13 00:22
重新?lián)Q過(guò)玻璃珠就可，以前我是不用玻璃珠的，放入兩三小塊陶瓷塊，用過(guò)一段時(shí)間后把陶瓷塊拿出來(lái)，用電爐燒一下，再入回去。這種方法比玻璃珠好多了。



歡迎光臨 畜牧人 (http://www.ffers.com.cn/) Powered by Discuz! X3.5