畜牧人

江蘇省、安徽省、浙江省規(guī)?；i場豬瘟抗體血清學(xué)調(diào)查與分析

朱思鋒 南京天邦生物科技有限公司，南京， 211100；

摘要：豬瘟目前仍然是危害國內(nèi)外養(yǎng)豬業(yè)的主要傳染病之一，本文采用北京愛德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體阻斷ELISA檢測試劑盒對江蘇省、安徽省、浙江省32個規(guī)?；i場送檢的650份血清進行了抗體檢測。結(jié)果顯示，被檢樣本平均阻斷率為52.72%，平均陽性率（有豬瘟抗體存在）為71.47%，個體豬場陽性率最低的為7%，最高為100%。這說明這些省份豬群豬瘟免疫效果不能達到完全防控豬瘟的目的，仍需不斷加強。

關(guān)鍵詞：豬場；豬瘟；血清學(xué)；調(diào)查

豬瘟(The hog cholera，HC & The classical swine fever，CSF)具有高度接觸傳染性，流行廣泛，發(fā)病率、死亡率高，危害極大。國際獸疫局(OIE)將之列為A類16種法定傳染病之一，我國亦將之列為一類動物傳染病。由于豬瘟造成的經(jīng)濟損失嚴重，促使很多國家制定和執(zhí)行豬瘟的防制和根除計劃，并在歐美20多個國家取得成功。但目前世界上仍有40多個國家和地區(qū)有豬瘟流行，近年來國內(nèi)外豬瘟發(fā)病率亦有上升的趨勢。目前在各國的HC流行中，除典型的病例外，HC流行和發(fā)病的特點已發(fā)生了很大變化，流行形式轉(zhuǎn)變?yōu)榈貐^(qū)性散發(fā)流行，病程由急性變?yōu)槁赃^程，臨床癥狀由典型變?yōu)榉堑湫偷臏睾托虷C，癥狀顯著減輕，發(fā)病率不高，疫勢較緩和，死亡率減低。仔豬死亡率較高；成年豬較輕或可耐過，病理變化也不特征。由于病原毒力降低。出現(xiàn)持續(xù)感染(亞臨床隱性感染)、胎盤垂直感染(仔豬先天性感染)，妊娠母豬帶毒綜合征(母豬繁殖障礙)及新生仔豬的免疫耐受等。這些帶毒病豬的存在，成為豬瘟發(fā)生的禍根，尤其是亞臨床感染豬。依靠常規(guī)方法很難確診并剔除此類病豬。從而給HC的防制工作帶來新的困難。為了了解目前規(guī)模豬場豬群的免疫情況，即使掌握流行病學(xué)動態(tài)，從而有針對性地開展防治工作，09年我們對32個規(guī)?；i場送檢血清進行了豬瘟抗體檢測。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 血清
各地區(qū)豬場送檢血清。

1.1.2 試劑盒 北京愛德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體檢測試劑盒。

1.1.3 器材 美國Thermo Labsystems Multiskan Mk3酶標儀、德國Eppendorf移液器(50μL和100μL)、一次性微量移液器使用的吸頭等。

1.1.4 實驗室環(huán)境 溫度23℃、相對濕度55%

1.2 實驗方法

1.2.1 血清分離
全血室溫靜置2～3h，吸取血清。如有少量紅細胞存在，可用離心機低速2000～3000r/m離心出去紅細胞。短時間存放可放于4℃，如需長期存放，應(yīng)放入-70℃低溫冰箱，并盡量減少反復(fù)凍融次數(shù)。

1.2.2 ELISA檢測方法 使用該試劑盒檢測時，所有組分都必須恢復(fù)到室溫18～25℃。使用前應(yīng)將各組分別放置于室溫至少一小時。此外，洗滌液在使用前必須用超純水進行10倍的稀釋。詳細的檢測步驟參見北京愛德士元亨生物科技有限公司生產(chǎn)的豬瘟病毒抗體試劑盒配套說明書。

2 結(jié)果

對檢測的數(shù)據(jù)應(yīng)用試劑盒配套的軟件分析，被檢樣本平均阻斷率為52.72%，平均陽性率（有豬瘟抗體存在）為71.47%， 個體豬場陽性率最低的為7%，最高為100%。各豬場的詳細檢測數(shù)據(jù)見表1。

表1豬場ELISA檢測數(shù)據(jù)

3 討論

3.1 對于豬群來說，血清陽性率達到90%以上才能有效地預(yù)防豬瘟的流行，總保護率小于50%者為免疫無效或HC不穩(wěn)定地區(qū)，需加強免疫或采取措施消除不穩(wěn)定因素。而本研究結(jié)果顯示，這些規(guī)模豬場針對豬瘟的免疫情況均參差不齊，被檢樣本平均阻斷率為52.72%，血清總陽性合格率僅為71.5%，有的豬場甚至只有7%，這樣的免疫效果遠遠不能達到完全防控豬瘟的目的，這應(yīng)引起規(guī)?；i場管理者的高度重視和警惕。

3.2針對目前這一結(jié)果和結(jié)合實際生產(chǎn)情況，分析如下

3.2.1生豬和肉品市場流通頻繁，檢疫不嚴。防疫效果不夠是HC傳播流行的重要因素。近年來集體、個體養(yǎng)豬發(fā)展迅速，使豬的自由貿(mào)易增多，大量生豬頻繁調(diào)動?？墒笻C隱性感染豬在全國范圍內(nèi)流傳。

3.2.2疫苗質(zhì)量問題。

有部分豬免疫后，抗體水平不能達到防止亞臨床感染水平，這部分豬感染強毒后?？梢饋喤R床感染。此種亞臨床感染豬雖無明顯癥狀。但在其存活期終生帶毒、散毒，常是這些帶毒的母豬導(dǎo)致所產(chǎn)仔豬會產(chǎn)生免疫耐受或者發(fā)病死亡。

用不同劑量的C株苗免疫豬，證實免疫劑量與保護水平密切相關(guān)。歐洲藥典規(guī)定用C株疫苗免疫時，肌肉注射劑量為100PD50(400RID)。我國豬瘟細胞苗出廠檢驗以5萬倍稀釋能致兔體熱反應(yīng)為合格，即每毫升原液含5萬RID。規(guī)定的免疫劑量為150RID，折算為37PD50。這一劑量遠低于國際標準。

豬瘟病毒(HCV) 和牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)2種瘟病毒之間有較密切的抗原性和血清學(xué)關(guān)系，兩者同源性很高，能互相誘導(dǎo)一定程度的同源病毒抗體。用BVDV污染的HC疫苗免疫母豬后，抗體檢測結(jié)果很低。

疫苗的運輸、保存、使用不當，亦易影響免疫效果。有人曾在夏季進行試驗，早晨剛稀釋的疫苗經(jīng)檢驗完全符合出廠標準，即每頭份含150RID，但到傍晚，自注苗點抽檢最后剩下1瓶稀釋的疫苗檢測，每1頭份只有15RID，在一天中效價已損失90%。

3.2.3免疫程序問題。免疫程序的關(guān)鍵是排除母源抗體干擾，確定合適的首免日齡。如在母源抗體效價尚高時接種疫苗，即會被母源抗體中和掉部分弱毒，阻礙疫苗弱毒的復(fù)制，仔豬就不能產(chǎn)生堅強的主動免疫力。

3.2.4．其它免疫抑制疾病的影響。如PRRS、PCV等

3.3 雖然本次僅對32個規(guī)?；i場豬瘟免疫情況進行檢測，但有助于了解目前一些豬場豬群豬瘟免疫情況，從而為該病的監(jiān)測及其防控提供科學(xué)的依據(jù)。

4 防控措施

4.1強化疫苗接種工作

由于我國豬瘟病毒弱毒株的出現(xiàn)，亞臨床感染豬和持續(xù)性感染豬來臨床上大量存在，所以當前預(yù)防豬瘟的發(fā)生，仍需加強疫苗的接種工作。制定合理的免疫程序與使用新型高效豬瘟疫苗（比脾淋苗應(yīng)激性小，無BVDV，每頭份是原標準的10倍，突破母源抗體干擾，可阻斷豬瘟病毒亞臨床感染）應(yīng)停止使用政府免費發(fā)放疫苗。

4.2加強豬瘟病毒和抗體的實驗室檢測

典型豬瘟可根據(jù)主要臨床癥狀和病理變化做出診斷,實驗室診斷為輔助手段。非典型豬瘟由于癥狀不明顯和缺乏特征性癥狀和病變,通常需取決于實驗室診斷。現(xiàn)在臨床上主要發(fā)生的非典型豬瘟，這就要求我們加強豬瘟病毒和抗體的實驗室檢測工作，及時淘汰引起仔豬感染和免疫耐受的傳染源，從而保證整個豬群的健康。

4.3實施豬場凈化

對豬群尤其是種豬群實施凈化，淘汰亞臨床癥狀感染陽性豬，防止豬瘟病毒的水平傳播和垂直傳播。凈化方法：將阻斷率低于50%的種豬用豬瘟疫苗補充免疫一次，對這些豬6-8周后再進行重測，抗體水平達到50%以上者保留，抗體水平?jīng)]有達到要求者淘汰，母豬第一年兩次：以后每年一次，公豬每年至少兩次。另外至少每季度對種豬群抗體狀況進行抽樣調(diào)查，不少于60頭。后備豬對25-27周齡豬全群采樣，觀察免疫程序的效果，將抗體阻斷率低于50%的豬進行補針，以保證后備豬具有良好的抗體和免疫性能，30-32周對補針的豬進行抗體檢測，將抗體仍然是隱形的豬移除，不留做后備。

4.4加強豬群的飼養(yǎng)管理與生物安全措施

注意欄舍的通風(fēng)和保溫工作，及時調(diào)整豬群飼料配方，滿足不同階段豬群對營養(yǎng)的需要，隨時觀察豬群的健康狀況，并采取相應(yīng)的措施。此外，還應(yīng)加強對欄舍、生產(chǎn)用具的消毒工作。

參考文獻略