畜牧人

標(biāo)題: DL-蛋氨酸氮含量問題 [打印本頁]
作者: yangj    時(shí)間: 2010-6-1 10:28
標(biāo)題: DL-蛋氨酸氮含量問題
今化驗(yàn)室檢測一DL-蛋氨酸氮含量僅8.96%（理論含量9.4%），不合格，而用滴定法檢測含量為98.83%，合格，鑒別發(fā)現(xiàn)：其溶于稀酸，在稀堿中沒完全溶有懸浮物，想請(qǐng)各位幫我們分析一下原因，謝謝！（注：各項(xiàng)操作均按要求）
作者: 陽光綠茶008    時(shí)間: 2010-6-1 12:39
你用什么方法做的呀，居然是8.9而且還說標(biāo)準(zhǔn)是9。4%？
作者: 陽光綠茶008    時(shí)間: 2010-6-1 12:39
1.4 蛋氨酸含量的測定

1.4.1  間接碘量法（甲硫法）

1.4.1.1  原理 DL-蛋氨酸及其類似物都有CH3-S-CH2-CH2-基團(tuán)結(jié)構(gòu)，可以與碘反應(yīng)，被碘氧化，與蛋氨酸反應(yīng)后剩余的碘用硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)消耗碘量的多少可以得到蛋氨酸的含量

1.4.1.2 方法步驟

稱取0.3g（0.0002g）干燥的樣品，置于250ml碘量瓶中，加入100ml水溶解，加入2g 磷酸二氫鉀、5g磷酸氫二鉀、2g碘化鉀，充分搖勻溶解。準(zhǔn)確加入50ml0.05mol/l碘溶液，蓋緊瓶塞，避光靜置30min，加入1ml淀粉指示劑，用0.1mol/l硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，溶液從藍(lán)色變成綠色再至無色為終點(diǎn)，同時(shí)做試劑空白試驗(yàn)。

按下式計(jì)算蛋氨酸含量：

    蛋氨酸含量（%）=[C(V0-V1)×74.60]/ W   

式中：V0——滴定空白時(shí)所需硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml）；

         V1——滴定樣品時(shí)所需硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml）；

         C——硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/l）；

         W——樣品重量（g）；

74.60——1/2C5H11NO2S的摩爾質(zhì)量（g/ mol）。

1.4.2 凱氏定氮法

1.4.2.1原理  蛋氨酸在還原性催化劑（如CuSO4,K2SO4或Na2SO4或Se粉）的幫助下用濃硫酸進(jìn)行消化作用,使蛋氨酸中的氮轉(zhuǎn)變成NH4+并與H2SO4化合成(NH4)2SO4；而非含氮物質(zhì)，則以CO2↑、H2O↑、SO2↑狀態(tài)逸出。消化液在濃堿的作用下進(jìn)行蒸餾，釋放出氨態(tài)氮,用硼酸溶液吸收之并與之結(jié)合成為四硼酸銨,然后以甲基紅-溴基酚綠混合溶液作指示劑，用HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液（0.05mol/l）滴定,求出氮的含量，進(jìn)而求出蛋氨酸的含量。

1.4.2.2方法步驟

    稱取經(jīng)105°C干燥4h后試樣0.5g（稱準(zhǔn)至0.0002g）放入100ml凱氏燒瓶中，加入7g硫酸鉀、0.5g硫酸銅和15ml濃硫酸。在電爐上慢慢消化至透明，取下冷卻，定量轉(zhuǎn)入100ml容量瓶，冷卻后定容。移取該試液10.00ml，裝上半微量水蒸汽蒸餾裝置進(jìn)行蒸餾，蒸出氨用50毫升2%硼酸溶液吸收，用甲基紅-溴基酚綠混合溶液作指示劑，用0.05mol/l HCl標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至暗紅色。并用同樣方法做空白試驗(yàn)。

    按下式計(jì)算蛋氨酸含量：

蛋氨酸含量（%）= [C(V2- V1)×149.21]/ W     

    式中：V2——滴定試樣時(shí)所需酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml），

         V1——為滴定空白時(shí)所需酸標(biāo)準(zhǔn)溶液體積（ml），

         C——鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度（mol/l），

         W——試樣重量（g），

149.21——C5H11NO2S的摩爾質(zhì)量（g/ mol）。

2 兩種含量測定方法的比較

2.1 比較兩種方法的測定結(jié)果

間接碘量法（甲硫法）與凱氏定氮法測定蛋氨酸含量，其結(jié)果常常差別較大。事實(shí)上，兩種方法測定結(jié)果的忽高忽低受到多鐘因素的影響。具體情況分析如下：若樣品里混入一些還原性雜質(zhì)（如含硫的物質(zhì)），會(huì)與加入的碘液反應(yīng)，導(dǎo)致間接碘量法（甲硫法）結(jié)果偏高；而樣品里摻入一些含氮化合物如尿素、碳銨等時(shí)，凱氏定氮法結(jié)果將偏高。

蛋氨酸是既含有氨基又含有硫基的有機(jī)物，所以必須同時(shí)采用間接碘量法（甲硫法）與凱氏定氮法來確定蛋氨酸的含量才是科學(xué)的，僅用間接碘量法（甲硫法）或僅用凱氏定氮法來確定蛋氨酸的含量顯然是不妥的。

2.2 比較兩種方法的準(zhǔn)確度

不含干擾雜質(zhì)時(shí)間接碘量法（甲硫法）與凱氏定氮法測定結(jié)果均準(zhǔn)確、可靠，但如果從更加細(xì)致的角度來看，凱氏定氮法的測定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)含量更為接近。在用間接碘量法時(shí)，淀粉指示劑容易因保存期較短而失效，碘液中的碘也有部分會(huì)被空氣氧化，從而導(dǎo)致消耗的硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液增多，使測定值偏高；另外，蛋氨酸中的硫也會(huì)不同程度的被空氣氧化，從而導(dǎo)致消耗的碘液減少，使測定值偏低。因此，今后在使用間接碘量法時(shí)，應(yīng)在避光、密封條件下進(jìn)行。相比較而言，凱氏定氮法的測定結(jié)果受外界一些理化因素的干擾較小一些，測定結(jié)果的準(zhǔn)確度更高一些。

2.3 比較兩種方法的精密度

間接碘量法（甲硫法）與凱氏定氮法都是經(jīng)典的分析方法，兩種方法重現(xiàn)性好，有很高的精密度。單就這兩種方法的比較而言，凱氏定氮法比間接碘量法（甲硫法）有更高的精密度。

3 結(jié)論

用化學(xué)分析法同時(shí)測甲硫基和氨基來確定蛋氨酸的含量的方法簡便、可靠，結(jié)合定性分析判別蛋氨酸質(zhì)量優(yōu)劣的方法是完全可行的，也是科學(xué)的。本方法也適用于羥基蛋氨酸、羥基蛋氨酸鈣、N-羥基蛋氨酸鈣等類似產(chǎn)品的檢測。
作者: yangj    時(shí)間: 2010-6-1 16:35
蛋氨酸氮含量為8.96%（定氮法）即換算成C5H11NO2S的含量為95.49%
作者: 杜韶霞    時(shí)間: 2010-6-1 19:56
如果做得沒問題的話，應(yīng)該蛋氨酸有問題，我做過好幾個(gè)廠家的，住友的曹達(dá)的迪高沙的，含氮量都和標(biāo)準(zhǔn)值差不多，你做的差的太多了，考慮原因吧
作者: yangj    時(shí)間: 2010-6-2 08:04
你們的蛋氨酸水溶性怎樣，是否完全溶于稀酸和稀堿？

[ts]yangj 于 2010-6-2 13:02 補(bǔ)充以下內(nèi)容[/ts]

請(qǐng)教陽光綠茶：蛋氨酸凱氏定氮法是那里的方法，謝謝



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