畜牧人

標(biāo)題: 人工授精室操作標(biāo)準(zhǔn) [打印本頁]

作者: 田永勝    時(shí)間: 2010-7-9 21:23
標(biāo)題: 人工授精室操作標(biāo)準(zhǔn)
  1.采精:
  1-1.采精前的準(zhǔn)備:準(zhǔn)備好消毒過的集精瓶、過濾紗布、假臺(tái)畜等所需物品
  1-2.采精公豬的調(diào)教:
  1-2-1公豬的采精調(diào)教,公豬采精調(diào)教人員要有足夠的耐性并掌握一定的技巧,先調(diào)教性欲旺盛的公豬采精,利用涂上其它公豬精液或尿液的采精架或發(fā)情母豬,逐步訓(xùn)練公豬騎在它們的背上。
  1-2-2對(duì)性欲較弱的公豬, 可將發(fā)情旺盛的母豬趕到假母豬旁邊,讓被訓(xùn)練的公豬爬跨,待公豬性欲旺盛時(shí)把母豬趕走,再引誘公豬爬跨假母豬,或直接將公豬由母豬身上搬到假母豬臺(tái)上采精。
  1-2-3調(diào)教時(shí),盡量模仿發(fā)情母豬的叫聲,可提高公豬的性欲。一旦爬跨成功,要連續(xù)幾天對(duì)該公豬進(jìn)行采精,以鞏固剛建立起來的條件反射。
  1`-3
  采精方法: 1-3-1 當(dāng)公豬性欲達(dá)到旺盛時(shí),它將爬上母豬臺(tái),并伸出陰莖龜頭來回抽動(dòng)。右手抓住公豬陰莖的螺旋頭處,并順勢(shì)拉出陰莖,稍微回縮,直至和公豬陰莖同時(shí)運(yùn)動(dòng),左手拿采精杯;若用左手采精時(shí),則要蹲在公豬的右側(cè),左手抓住陰莖,右手拿采精杯。
  1-3-2無論用左手或右手,當(dāng)握住公豬的陰莖時(shí),都要注意要用拇指和食指抓住陰莖的螺旋體部分,其余三個(gè)手指予以配合,象擠牛奶一樣隨著陰莖的勃?jiǎng)佣泄?jié)律地捏動(dòng),給予公豬刺激。1-3-3采精時(shí),握陰莖的那只手一般要戴雙層手套,最好是聚乙烯制品,用這種手套對(duì)精子殺傷力較小,當(dāng)將公豬包皮內(nèi)的尿液擠出后,應(yīng)將外層手套去掉,以免污染精液或感染公豬的陰莖。
  1-3-4手握陰莖的力度,太大或太小都不行,應(yīng)以不讓其滑落并能抓住為準(zhǔn)。用力太小,陰莖容易脫掉,采不到精;用力太大,一是容易損傷陰莖,二是公豬很難射出精液。公豬一旦開始射精,手應(yīng)立即停止捏動(dòng),而只是握住陰莖,射精完后,應(yīng)馬上捏動(dòng),以刺激其再次射精。
  1-3-5當(dāng)公豬射精時(shí),一般射出的前面較稀的精清部分應(yīng)棄去不要,當(dāng)射出乳白色的液體時(shí),即為濃精液,就要用采精杯收集起來,
  1-3-6射精的過程中,公豬都會(huì)再次或多次射出較稀的精清,和最后射出的較為稀薄的部分、膠體都應(yīng)棄去不要。
  1-3-7精液品質(zhì)的好壞,量的多少只是其中的一個(gè)衡量指標(biāo),在相同的取舍方法下,關(guān)鍵要看精子的密度和活力的高低。 ,在相同的采精方法下,應(yīng)以精子密度、活力為主進(jìn)行評(píng)價(jià),而精液量只是其中一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。
  1-3-8采精杯上套的四層過濾用紗布,使用前不能用水洗,若用水洗則要烘干,因水冼后,相當(dāng)于采得的精液進(jìn)行了部分稀釋,既使水分含量較少,也將會(huì)影響精液的濃度。
  2精液的處理
  2-1.精液品質(zhì)的檢查:由采精室遞過來的精液,要馬上進(jìn)行鑒定,以便決定可否留用,從而保證母豬的受胎率和產(chǎn)仔數(shù)的提高。檢查精液的主要指標(biāo)有如下幾個(gè):精液量、顏色、氣味、精子密度、精子活力、酸堿度、粘稠度、畸形精子率等。每一份經(jīng)過檢查的公豬精液,都要有一份詳細(xì)的檢查記錄,以備對(duì)比及總結(jié).檢查前,將精液轉(zhuǎn)移到在37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱的燒杯中,或直接將精液袋放入37℃水浴鍋內(nèi)保溫,以免因溫度降低而影響精子活力。整個(gè)檢查活動(dòng)要迅速、準(zhǔn)確,一般在5~10分鐘內(nèi)完成。
  2-1 -1精液量:后備公豬的射精量一般為150~200毫升,成年公豬的為200~300毫升,有的高達(dá)700~800毫升。精液量的多少因品種、品系、年齡、采精間隔、氣候和飼養(yǎng)管理水平等不同而不同。
  2-1 -2、顏色:正常精液的顏色為乳白色或灰白色,精子的密度愈大,顏色愈白;越小,則越淡。如果精液顏色有異常,則說明精液不純或公豬有生殖道病變,如呈綠色或黃綠色時(shí)則可能混有化膿性的物質(zhì);呈紅色時(shí)則有新鮮血液;呈褐色或暗褐色時(shí)則有陳舊血液及組織細(xì)胞;呈淡黃色時(shí)則可能混有尿液等。凡發(fā)現(xiàn)顏色有異常的精液,均應(yīng)棄去不用,同時(shí),對(duì)公豬進(jìn)行對(duì)癥處理、治療。
  2-1 -3、氣味:正常的公豬精液含有公豬精液特有的微腥味,這種腥味不同于魚類的腥味,沒有腐敗惡臭的氣味。有特殊臭味的精液一般混有尿液或其它異物,一旦發(fā)現(xiàn),不應(yīng)留用,并檢查采精時(shí)是否有失誤,以便下次糾正做法。
  2-1 -4、酸堿度:可用PH試紙進(jìn)行測(cè)定。公豬精液的酸堿度一般呈弱堿性或中性,其酸堿度與精子密度呈負(fù)相關(guān)的關(guān)系,PH值越接近中性或弱酸性,則精子密度越大,但過酸過堿都會(huì)影響精子的活力。
  2-1-5精子活力:精子活力的高低關(guān)系到配母豬受胎率和產(chǎn)仔數(shù)的高低,因此,每次采精后及使用精液前,都要進(jìn)行活力的檢查,以便確定精液能否使用及如何正確使用。精子活率的檢查必須用37℃左右的保溫板,以維持精子的溫度需要。一般先將載玻片和蓋玻片放在保溫板上預(yù)熱至37℃左右后,再滴上精液,在顯微鏡下進(jìn)行觀察。檢查前應(yīng)先將精液瓶上下輕輕翻轉(zhuǎn)使精液混勻,然后制作涂片,用顯微鏡100倍觀察精子活力,計(jì)算活精子和死精子的百分比。隨后再在400倍下觀察精子尾部擺動(dòng)情況并記錄其活動(dòng)情況。每次檢查精子活力,要進(jìn)行人工授精的精子活力質(zhì)量要求必須不低于70+++,異常精子不超過20%。
  2-1-6精子密度:指每毫升精液中含有的精子量,它是用來確定精液稀釋倍數(shù)的重要依據(jù)。
  2-1-6-1用精子密度儀計(jì)算精子密度:美國(guó)和歐洲等養(yǎng)豬業(yè)發(fā)達(dá)的國(guó)家多采用這種方法,它極為方便,檢查時(shí)間短,準(zhǔn)確率高,使用壽命長(zhǎng),但價(jià)格較貴,一般國(guó)外進(jìn)口都在一萬元人民幣以上,但若用國(guó)產(chǎn)分光光度計(jì)改裝,也較為適用。它有兩種類型:一是德國(guó)的精子密度儀,它是將原精液滴一滴在一個(gè)一次性的特制塑料板上,然后通過儀器直接測(cè)量精子的密度,這種方法一般要先進(jìn)密度儀的校正;另一種是利用光電比色法,以精子對(duì)光通透性差為依據(jù),用分光光度計(jì)讀出一個(gè)數(shù)字,然后再根據(jù)事先準(zhǔn)備好的標(biāo)準(zhǔn)曲線確定精子的密度。這兩種類型都 有一個(gè)缺點(diǎn),就是會(huì)將精液中的異物按精子來計(jì)算。用精子密度儀檢查精子密度,將是國(guó)內(nèi)外豬人工授精人員較好的選擇。
  2-1-6-2若達(dá)不到以上的設(shè)備要求,可用以下方法粗略測(cè)定精子密度:
  2-1-6-2-1、白細(xì)胞稀釋吸管計(jì)數(shù)法:這種方法是用手動(dòng)計(jì)數(shù)器和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板來統(tǒng)計(jì)精子密度的。目前,在國(guó)內(nèi)應(yīng)用較多,成本低,計(jì)算較準(zhǔn)確,但所用時(shí)間多,使用效率低。
  主要做法是先用紅血球稀釋吸管取精液到球下的0.5(稀釋200倍)或1.0刻度處(稀釋100倍),然后再吸取注射用生理鹽水到膨大部上方的101刻度處,用兩指(拇指和食指或中指)緊緊壓住吸管的兩端進(jìn)行搖動(dòng)混合均勻,吸取的過程中,不允許有空氣混入吸管,以免影響準(zhǔn)確度。搖均后,將吸管未端的液體擦干,并去掉前幾滴混合液,然后順著蓋有蓋玻片的血細(xì)球計(jì)數(shù)板的邊緣,讓混合液滲入到計(jì)數(shù)板內(nèi),再通過顯微鏡觀察,用計(jì)數(shù)器點(diǎn)數(shù),這種檢查一般為總精子數(shù)。然后利用公式計(jì)算每毫升精子的密度。精子密度的計(jì)算公式為:
  全方格內(nèi)的精子數(shù)×10(厚度的倍數(shù))×稀釋倍數(shù)(100或200)×1000=精子數(shù)/毫升
  2-1-6-2-2簡(jiǎn)單檢查密度法:這種方法不用計(jì)數(shù),用眼觀察顯微鏡下精子的分布,精子所覆蓋的面積大過空間面積的為“密”,小于空間面積的為“稀”,介于二者之間的為中等。一般只用密和中等的精液,稀的應(yīng)棄去。這種方法簡(jiǎn)單,但對(duì)于不同檢查人員而言,主觀性強(qiáng),誤差較大,只能對(duì)公豬進(jìn)行粗略的評(píng)價(jià),故大型養(yǎng)豬場(chǎng)一般不采用這種方法,只適應(yīng)個(gè)體戶或人工授精數(shù)量少的豬場(chǎng)。
  2-1-7畸形精子率:畸形精子指斷尾、斷頭、有原生質(zhì)、頭大的、雙頭的、雙尾的、折尾等精子,一般不能直線運(yùn)動(dòng),雖受精能力較差,但影響精子的密度。若通過攝像顯示儀觀察,則很容易區(qū)分。若用普通顯微鏡觀察,則需染色;若用位相差顯微鏡,則可直接觀察。公豬的畸形精子率一般不能超過20%,否則應(yīng)棄去。
  2-2.實(shí)驗(yàn)設(shè)備的消毒處理:精液稀釋的成敗,與所用儀器的清潔衛(wèi)生有很大關(guān)系。所有使用過的燒杯、玻璃棒及溫度計(jì),都要及時(shí)用蒸餾水洗滌,并進(jìn)行高溫消毒,是稀釋后的精液能保證適期保存、利用的重要條件。
  2-3.稀釋液
  2-3-1稀釋液的成分:
  一般精液稀釋液包括有一種或多種保護(hù)劑。盡管目前采用的公豬精液稀釋液有多種多樣,但就其化學(xué)組成上來看主要有以下一些成分。
  2-3-1-1.
  代謝或營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),以減少精子自身能量消耗,以便延長(zhǎng)精子壽命,一般為單糖,如葡萄糖。
  2-3-1-2.
  適宜的緩沖體系,以保持精液的PH值及滲透壓的基本穩(wěn)定。
  2-3-1-3.
  大分子物質(zhì),以保護(hù)精子免受降溫的不利影響,如牛血清白蛋白。
  2-3-1-4. 抗生素,以阻止細(xì)菌的生長(zhǎng)
  2-3-2稀釋液的配制:稀釋液的配制種類很多,正在試驗(yàn)尚未定型的更多,采用何種稀釋倍數(shù)應(yīng)根據(jù)其效果,保存方法和成分是否容易得到而定,配制時(shí)要注意下列事項(xiàng):
  2-3-2-1.
  配制稀釋液所用的一切用具,必須徹底洗滌干凈,消毒后用前并經(jīng)稀釋液沖洗才能使用。
  2-3-2-2.
  稀釋液必須保持新鮮,要現(xiàn)配現(xiàn)用。
  2-3-2-3.
  所用的蒸餾水要求新鮮,PH值呈中性。
  2-3-2-4.
  配置稀釋液所用的藥品成分要純凈,稱量要準(zhǔn)確,充分溶解。
  2-3-2-5.
  抗生素必須在稀釋液冷卻至室溫時(shí)按用量準(zhǔn)確加入。
  2-4精液的稀釋
  2-4-1、精液稀釋頭份的確定
  稀釋前,應(yīng)對(duì)自己所需稀釋的精液頭份進(jìn)行確定。稀釋頭份可按如下方法進(jìn)行計(jì)算:人工授精的正常劑量一般為30~50億個(gè)精子/1個(gè)劑量,體積為80~100ML,美國(guó)一般采用30億/80ML.頭份,我國(guó)一般采用40億左右/100ML.頭份,不過,這主要是根據(jù)實(shí)際情況而定。正常的公豬精液,假如密度為2億/ML,采精量為150ML,并計(jì)劃稀釋后密度為40億/100ML.頭份。則此公豬精液可稀釋150×2/40=7.5頭份,即需加(750150)ML=600ML稀釋液。不過,同一種稀釋液,精子密度越大,因所消耗能量多,保存時(shí)間也就越短。
  2-4-2、精液的稀釋
  2-4-2-1.采精后精液應(yīng)盡早稀釋,原精液放置的時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)影響其活力,一般最好在30分鐘以內(nèi)完成稀釋。
  2-4-2-2.先進(jìn)行一倍稀釋(稀釋液溫度等同鮮精溫度)稀釋時(shí)將稀釋液緩慢注入,輕柔轉(zhuǎn)動(dòng)混和均勻。放置30分鐘,按其質(zhì)量根據(jù)配種需求,再進(jìn)一步稀釋分裝,(每頭份100ml)
  2-4-2-3.稀釋時(shí)使稀釋液沿精液瓶壁緩緩加入,防止將精液迅速倒入稀釋液內(nèi),造成局部稀釋打擊。
  2-4-2-4稀釋液的溫度與精液的溫度必須調(diào)整一致,溫差不超過1℃。
  2-4-2-5稀釋后將精液瓶輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)使精液與稀釋液混合均勻,切忌劇烈震蕩。
  2-4-2-6精液稀釋后即進(jìn)行鏡檢,如果活率下降,說明稀釋或操作不當(dāng)。
  2-5、稀釋后精液的分裝
  精液的分裝,有瓶裝和袋裝兩種,裝精液用的瓶子和袋子均為對(duì)精子無毒害作用的塑料制品。瓶裝的精液分裝時(shí)簡(jiǎn)單方便,易于操作,但輸精時(shí)需人為擠、壓或瓶底開口,因瓶子有一定的固體形態(tài);袋裝的精液分裝一般需要專門的精液分裝機(jī),用機(jī)械分裝、封口,但輸精時(shí)因其較軟,一般不需人為擠壓。瓶子一般上面均有刻度,最高一刻度為100ML,袋子一般為80ML。
  分裝后的精液,要逐個(gè)粘貼標(biāo)簽,一般一個(gè)品種一個(gè)顏色,便于區(qū)分。注意要在上面標(biāo)明公豬耳號(hào)、采精處理時(shí)間、稀釋后密度、經(jīng)手人等,并將以上各項(xiàng)登記到記錄本上,以備查驗(yàn)。
  2-6、稀釋后精液的保存
  2-5-1分裝后的精液,不能立即放入17℃左右的恒溫冰箱內(nèi),應(yīng)先留在冰箱外1小時(shí)左右,讓其溫度下降,以免因溫度下降過快而刺激精子,造成死精子等增多。
  2-5-2放入冰箱時(shí),不同品種的公豬精液應(yīng)分開放置,否則匆忙中容易拿錯(cuò)精液。不論是瓶裝的或是袋裝的,均應(yīng)平放,并可疊放。
  2-5-3從放入冰箱開始,每隔12小時(shí),要搖勻一次精液,因精子放置時(shí)間一長(zhǎng),會(huì)大部分沉淀。對(duì)于一般豬場(chǎng)來說,可在早上上班,下午下班時(shí)各搖勻一次。為了便于監(jiān)督,每次搖動(dòng)的人都應(yīng)有搖動(dòng)時(shí)間和人員的記錄。
  2-5-4保存過程中,一定要時(shí)時(shí)注意冰箱內(nèi)溫度計(jì)的變化,以免因意想不到的原因而造成電壓不穩(wěn)而導(dǎo)致溫度升高或降低。
  2-6、精液的運(yùn)輸
  2-6-1對(duì)于遠(yuǎn)距離購精液的豬場(chǎng),運(yùn)輸?shù)倪^程是一個(gè)關(guān)鍵的環(huán)節(jié)。
  2-6-2保溫或防暑條件做得好的,運(yùn)到幾千公里之外,精子活力等還較強(qiáng),使用效果還是很好,母豬受胎率和產(chǎn)仔數(shù)也仍很高;做得不好的,就是同一場(chǎng)內(nèi)不同時(shí)間、地點(diǎn)使用,死精率也是很高,使用效果很差。高溫的夏天,一定要在雙層泡沫保溫箱中放入水袋(17℃恒溫),再放精液進(jìn)行運(yùn)輸,以防止天氣過熱,死精太多,嚴(yán)寒的季節(jié),要用保溫用的恒溫乳膠或棉花等在保溫箱內(nèi)保溫。
作者: 松林秋泉    時(shí)間: 2010-7-9 22:01
很好很詳細(xì)
作者: 無知青年    時(shí)間: 2010-7-9 22:10
程序都是那個(gè)程序 就看做的好壞 是否認(rèn)真!
作者: lengyifu    時(shí)間: 2010-7-26 10:30
細(xì)節(jié)決定成敗
作者: aikaxumu    時(shí)間: 2010-8-14 16:05
規(guī)章制度再好,就看執(zhí)行到位情況了




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