畜牧人

恒溫干燥箱、組織搗碎機、高壓蒸氣滅菌器、天平、燒杯、漏斗、鐵架臺、手術刀、手術剪、鑷子、止血鉗、廣口瓶

二、    原料與物品

甲醛、甘油、紗布、注射用生理鹽水（無熱源物質，以免注射時發(fā)生過敏反應，減少變態(tài)反應）、膠手套、自家病豬的內(nèi)臟組織

三、
制作步驟

1              滅菌
將所需儀器、原料和物品進行高壓滅菌。

2              取樣
采取自家病豬的內(nèi)臟器官和組織。一般原則：優(yōu)先采取含毒量最高的組織或器官，肝—脾—腎—肺—淋巴結（整個采樣過程要求無菌操作）。

3              去菌
用注射用生理鹽水洗去樣品表面的細菌。

4              剪碎
用手術刀、手術剪將樣品剪碎，去除其中的結締組織、血管等難以搗碎部分。

5              稱重
用天平稱量所剪碎的樣品，并記錄好其重量。

6              搗碎
用組織搗碎機將稱量好的樣品搗碎，呈肉湯樣，要求越碎越好。

7              凍融
將搗碎好的樣品置于冰箱內(nèi)反復凍融三次，凍融過程中前4小時內(nèi)，每隔20分鐘搖勻一次，盡量使病毒釋放出來。

8              過濾
凍融后完全溶解之后，用紗布過濾兩次，先用四層紗布過濾一次，再用八層紗布過濾一次即可

9
稀釋
用注射生理鹽水溶液以1：5的比例將樣品稀釋。

10          滅活
在稀釋好的樣品中添加0.4%甲醛（滅活劑）和5~10%甘油（保護劑），再將其置于37℃的恒溫干燥箱內(nèi)滅活24~48小時，盡量使病毒全部被滅活，但又必須最大限度地保持其抗原性。

11          安全檢測  用小白鼠進行免疫接種，觀察其反應和行為，同時剖解觀察其病理變化。

12          無菌檢驗  用肉湯或瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)，觀察其是否有細菌生長。

13
分裝

14       免疫接種

15          效力檢驗

四、  疫苗的使用說明

1
保存
2~8℃冷藏

2
保質期6個月

3
用法用量
使用前必須先充分搖勻，以2ML/頭進行肌肉注射，于發(fā)病期前10~15天接種，也可用于緊急接種，一般免疫接種后10天左右產(chǎn)生免疫抗體。