畜牧人
標(biāo)題: 魚病手冊(cè)4 [打印本頁(yè)]
作者: mmdhhg 時(shí)間: 2011-7-4 16:44
標(biāo)題: 魚病手冊(cè)4第十章
魚病治療 10.1 藥物導(dǎo)論
相對(duì)于水箱里的少部分水,對(duì)于魚病的健康來(lái)說(shuō)是缺點(diǎn),對(duì)于魚病的治療來(lái)說(shuō),是它的優(yōu)點(diǎn)。首先,水質(zhì)可以精確的測(cè)量,所以能給出反應(yīng)所需劑量的正常范圍。其次,可用少量昂貴的藥品。
許多藥和化學(xué)試劑用于控制魚病是有毒的,必須遠(yuǎn)離小孩。治療用的化學(xué)試劑和顏料的效果,是根據(jù)它們對(duì)寄生蟲的毒性要大于對(duì)于宿主的毒性。毒性不同,藥的安全性也不同。但是,魚的極限耐藥性和寄生蟲的耐藥性常是相似的,所以說(shuō)明書的劑量必須嚴(yán)格遵守。另外,藥的效果和魚的耐藥性都依靠數(shù)量和水溫。耐藥性各不相同。低劑量一般應(yīng)盡量避免,因?yàn)槟菢記](méi)有寄生蟲被殺死。預(yù)防治療用常量或額定量,都是不合理的,甚至是危險(xiǎn)的。這些將會(huì)導(dǎo)致寄生蟲耐藥性的產(chǎn)生,不能控制它們,甚至高濃度也不能控制它們。
由于一些寄生蟲在最適溫度,能繁殖的更好,也可用調(diào)節(jié)溫度來(lái)支持藥物治療。離開了它們的最適溫度,寄生蟲對(duì)藥物更加敏感。溫度是上升還是下降依藥物而定。藥物的溫度說(shuō)明要嚴(yán)格采納。
總的來(lái)說(shuō),當(dāng)你用一種藥物治療某一魚病后,如沒(méi)有任何經(jīng)驗(yàn),不能預(yù)測(cè)它的耐受性。單獨(dú)地進(jìn)行藥物治療實(shí)驗(yàn),看一下對(duì)魚的影響。挑選最虛弱的一個(gè),如果忍耐這個(gè)治療,那么別的同種魚類也能治療。特別注意,鯰魚和脂鯉在同一缸里,它們對(duì)許多藥的副作用敏感。
有些治療應(yīng)用于整個(gè)水族箱,是為了殺死病原體,而不是魚自身。另一些治療是在單獨(dú)的容器里,否則這個(gè)過(guò)濾細(xì)菌群被殺死,因此導(dǎo)致在水中形成毒素。許多藥物有賦形劑能引起大量細(xì)菌的繁殖,消耗氧,且不能給予魚幫助。
每種藥的使用方法和時(shí)間都在說(shuō)明書上,但是,有可能體弱的魚或敏感的魚也不能忍受這個(gè)劑量。甚至抗生素治療也不能立即停止魚的死亡,特別是破壞內(nèi)部器官的細(xì)菌感染。由于內(nèi)部器官功能的損傷,即使治療成功,魚也會(huì)死亡。
一般說(shuō)來(lái),魚的治療需 1 到幾天的浸洗。你也容易理解,藥物起的作用,既能殺死魚體上的細(xì)菌,也能殺死水箱別的細(xì)菌和微生物,這些死亡易污染水質(zhì)。
鑒于濾網(wǎng)也包含細(xì)菌,所以,首先應(yīng)清洗濾網(wǎng),在治療前活性炭應(yīng)該去掉。治療后,換水幾次。再用活性炭去掉水中的藥物。藥物用過(guò)后,過(guò)濾器需要幾周才能重建活的細(xì)菌群。過(guò)濾物質(zhì)的處理是首要的,當(dāng)適合時(shí),分別用于治療。紫外線能分解許多溶于水的藥物,因此 UV 燈在治療時(shí)應(yīng)關(guān)掉。
在精確體積的水中進(jìn)行浸浴幾分鐘到幾小時(shí)。高劑量的藥浸浴是需要的。溫度和水中化學(xué)物質(zhì)必須適合正常的水族箱。在短時(shí)浸浴時(shí),觀察要仔細(xì)。如果發(fā)現(xiàn)它們翻身,立即拿開它們。不要讓浸洗在水族箱里進(jìn)行,那樣會(huì)讓水中所有植物和細(xì)菌都?xì)⑺溃也豢赡鼙M快的去掉藥。藥劑師或獸醫(yī)能幫助你獲得一定的藥物,但是在寵物店有方便的家庭水族愛(ài)好者提供的特別配藥。
水族養(yǎng)殖者應(yīng)該熟悉體重,測(cè)量用藥的溶解量和別的化學(xué)物質(zhì)。在公有制系統(tǒng),體重是以克或千克計(jì)量, 1kg=1000g 。對(duì)于液體計(jì)量,養(yǎng)魚者通過(guò)燒杯就知道體積,有刻度的圓柱體或有刻度試管。液體計(jì)量用升或毫升,或 cm3 , 1L=100m3 (或 1000cc )。
準(zhǔn)確的天平稱量范圍是從 0.5g 到 50g 是必要的。另外,藥劑師可能給你非常少的劑量用于治療。但是,在寵物店,通常的劑量恰好是魚的用量。有時(shí),買的大量昂貴的藥的開消證明幾個(gè)養(yǎng)殖者池塘的資源。
許多治療用的浸器液儲(chǔ)備是必要的,通過(guò)溶解一定量的藥在 1 升水中。 1ml 這種混合物包括 1/1000 總量。一般來(lái)說(shuō), 1g 藥溶解在 1 升水中,制成儲(chǔ)備液,每毫升包括 1mg 藥。
10.2 治療建議
下面的治療建議與前面描述的疾病是相配的。規(guī)定的數(shù)量是許多魚類的耐藥量,(鯰魚,脂鯉和鰻鱺的治療,在治療前應(yīng)先試驗(yàn)一下)。
這里介紹的一些用于人類的藥,它們可能產(chǎn)生比寵物店的藥更多的副作用。應(yīng)該用于疾病精確的診斷之后。它們僅用 3 天寵物店的藥不起作用時(shí)才用。寵物店的藥應(yīng)該列有成分和使用目的。沒(méi)有真正的特效藥,因此應(yīng)注意所謂的全治藥。
兩種分別安全的藥,如果用在一起可能是危險(xiǎn)的。不同疾病的成功治療,首先應(yīng)先治嚴(yán)重的病,需要的恢復(fù)期至少 3 天,治療和清洗水中所有的藥,通過(guò)換水,象前面描述的一樣,甚至重復(fù)同樣的治療。
亂用抗生素會(huì)導(dǎo)致抗體的產(chǎn)生;可怕的是這些抗體會(huì)轉(zhuǎn)移到人的細(xì)菌的病原體上。專家認(rèn)為藥物廣泛,但是抗生素應(yīng)該僅在緊急情況時(shí)才用在水族箱里。礤胺類藥和 nitrofurans 應(yīng)該先試用??股刂委煈?yīng)該在全玻璃缸中;抗生素的洗液不準(zhǔn)流入下水管系統(tǒng)。它們應(yīng)該放在治療箱里,加熱到 50-60 ℃ ;除了氯霉素其它藥物會(huì)在 2 天內(nèi)分解,通過(guò)加入堿液或堿性 Na2CO3 升高 PH 值超過(guò) 10 ,在兩小時(shí)內(nèi)破壞藥。
常建議在食物里混入藥,這個(gè)藥直接進(jìn)腸道,治療針對(duì)整個(gè)水族箱。放藥在食物里,必須是習(xí)慣了的食物,且魚還能采食。
下面的列出的藥沒(méi)注明的是用于魚內(nèi)服的。
下面的治療建議已經(jīng)經(jīng)過(guò)完全的測(cè)試,但是不能保證藥在不同的水中有反應(yīng)效果。一些物在水中分解而增加毒性,而另一些有殺菌作用,且能殺死重要的細(xì)菌,導(dǎo)致水箱中魚中毒而引起死亡。另一些藥能導(dǎo)致細(xì)菌的過(guò)渡增長(zhǎng),會(huì)引起水的污濁和魚缺氧癥狀的出現(xiàn)。這些問(wèn)題常可通過(guò)換水和定時(shí)過(guò)濾而避免。
避免在晚上給魚用藥,因?yàn)樵谟盟幒髴?yīng)該觀察幾個(gè)小時(shí),如果魚表現(xiàn)任何中毒癥狀,立即換水或把魚移到淡水中。如果氧下降,要安裝別的增氧機(jī)。
因?yàn)樯厦娴脑颍晕覀儾荒鼙WC我們的治療建議是成功和安全的。
10.3 方法 A — D
方法 A1 :氯霉素
用途:腹部水腫病,癤瘡病,細(xì)菌性鰭爛掉,弧菌病,細(xì)菌性鰓病
作用范圍: G+ ,球菌,桿狀細(xì)菌芽, G- 和球菌;放線菌類,屈撓桿菌,螺旋體,立克次氏體和大的病毒。此藥在低溫、干燥的環(huán)境下能儲(chǔ)存幾年,可用于浸洗使用。
劑量: 40mg/L 的作用 10-20h 。此藥在加入水箱之前,需溶解在乙醇里,在治療期間,用開動(dòng)過(guò)濾器,清洗吸收劑或廢棉藥或泡沫過(guò)濾物質(zhì)。常檢查魚和水環(huán)境。如果水變污濁,馬上把魚轉(zhuǎn)移,如果需要,把它們轉(zhuǎn)到新鮮的混合洗液中。
氯霉素可通過(guò)方法 B5 混在魚的食物中,由于可耐溫度得到 100 ℃,能在溫度為80℃水中使用。
服用劑量:500mg/100g食物,每天給藥2-3次。
方法A2:用氯霉素+吖啶類溶解于1升水中,再加40mg/L氯霉素。治療程為12h。
方法A3:硫酸新霉素
用途:多數(shù)細(xì)菌性疾病,鰭爛掉,皮膚腫脹和新的discus sisease。
作用范圍: G- 和球菌,可用于長(zhǎng)時(shí)的浸洗生棉花或泡沫器過(guò)濾材料。
劑量: 2g/100L 水中,作用 3d 。有些敏感魚會(huì)中毒。
服用劑量: 250mg/100g 食物,通過(guò)方法 B5 使用。每天 3 次,用 3d 后間隔 24h ?;旌鲜褂玫淖畲鬁囟仁?/font>40 ℃。此方法不用于內(nèi)部器官的感染,僅用于腸道的感染。
和呋喃妥因混合,用上面的劑量可用于治盤麗的新病。先決條件是寄生蟲的二次感染必須先控制。在治療前,把魚轉(zhuǎn)到干凈新鮮的水中。魚仍然要浸洗3-5d,然后把它們轉(zhuǎn)到新鮮的水中。接下來(lái)的治療是用呋喃妥因進(jìn)行6-10d治療,但通常不需要這么長(zhǎng)。
方法A4:Combisonum eye Ointment containing neomycin
Combisonum 是當(dāng)魚自身感染后選擇的藥。它能抵抗細(xì)菌感染和加速治愈。用濕毛巾包著魚,讓這個(gè)魚每天離開檢疫箱。用吸墨紙擦干傷口,并去掉一些死了的組織。然后用Combisonum,當(dāng)傷口邊緣開始愈合時(shí),每隔2-3d治療一次。作為預(yù)防,殺真菌的軟膏每隔3d用一次或mycostatie agent加在水中。
方法A5:四環(huán)素
用途:腹部水腫病,弧菌病
作用范圍:G+球菌和細(xì)菌,G-球菌,細(xì)菌,放線菌類,螺旋體,和大的病毒病。
此藥能作為長(zhǎng)久的浸洗,在劑量為A的水箱中,也可用于清洗生棉藥和過(guò)濾泡沫材料。水變顏色,幾種植物將會(huì)破壞,因此應(yīng)單獨(dú)的水箱使用。
A 劑量:1g/100L升中每4d
B 劑量:100mg/L水中,每24h
以方法B5的描述用于口服,750mg四環(huán)素混在100g食物中,然后,每天兩次,間隔6小時(shí),用7d,引起興奮的溫度是40℃。
方法A6:金霉素,土霉素
用途、用法、效果和劑量與四環(huán)素相似。因?yàn)閯e的成分存在,土霉素僅用于飼料中。
Doxycycline100 同樣是土霉素,常叫Vibvamycin。
劑量:一個(gè)膠囊的劑量加到20L水中,用2-4天。
方法B1:熱治療
升溫治療也有很長(zhǎng)的歷史了。慢慢升溫,幅度不要超過(guò)1℃/h。升溫療法是為了創(chuàng)造一個(gè)環(huán)境,使病原不能生活或不能繁殖。并不是所有物種都能耐高溫?;瘜W(xué)治療有時(shí)更適合魚。熱治療可用于下面的病原體。
口絲蟲屬:33℃用4d
小瓜蟲屬:33℃作用10d
卵旋蟲屬:33℃-34℃作用24-36h
絕對(duì)要水質(zhì)新鮮清潔且增氧是必要的。
如果看上去有不良表現(xiàn),這不是由于污染的水或化學(xué)因素,2-3d增加溫度3℃,有直接的作用。因?yàn)榭贵w的形成,抵抗的感染力增加了。因?yàn)楸P麗魚的溫度能增加到35℃。但是,溫度的增加,能加強(qiáng)魚新陳代謝的負(fù)擔(dān),因此增加壓力和抵抗。
方法B2:轉(zhuǎn)移方法
用這種方法,小瓜蟲生命循環(huán)中斷,因此能防止此病的傳播。此種方法費(fèi)時(shí)費(fèi)力,需要5個(gè)水箱。每隔12小時(shí),把魚轉(zhuǎn)到新的水箱里。包囊脫落減少游走纖毛幼蟲,當(dāng)魚被轉(zhuǎn)移到下一個(gè)水箱時(shí),當(dāng)這個(gè)魚第六天回到第一個(gè)水箱時(shí),這些游走芽胞的細(xì)胞時(shí)已經(jīng)死亡。所有的水缸溫度應(yīng)在25℃,如果治療持續(xù)23天,你一定會(huì)看到魚沒(méi)有小瓜蟲了。但是,每天的轉(zhuǎn)移,對(duì)魚的應(yīng)激較大。
方法B3:Screening method
此種方法適合所有不能發(fā)育為游走細(xì)胞的寄生蟲或幼蟲。過(guò)去主要是用于哺育魚群。在飼養(yǎng)箱里,一屏或一格子安裝2-5cm高在底部。網(wǎng)眼對(duì)于魚來(lái)說(shuō)太小,但是能讓寄生蟲的蟲卵通過(guò)并流入糞便里,因而使它們與魚體分開。這些幼蟲從而死亡。但是,排出的mulm被收集在屏封以下。
方法B4:維生素
你很容易提供你自己的終生食物,包括所有的重要維生素和微量元素。刮一些牛心在盤子里,加一些深凍的菠菜碎片。鋪成了一5mm厚,然后灑足夠的維生素粉末在上面,直到表面是白的為止。
用液體維生素是沒(méi)有效果的,因?yàn)樗荒芘c食物相粘連。鋪同樣數(shù)量的酵母粉在食物上面,直到牛心和菠菜融化(大約需15分鐘)。然后,混合在一起,揉好,飼喂正常的魚。好的胡蘿卜能代替菠菜。
當(dāng)用Osspulvit——N,Neooalcit tablets和Calcipot D3維生素缺乏,從這些產(chǎn)品能提供VMP tablebs,通過(guò)搗碎這些藥片,就象上面描述的一樣。
方法B5:調(diào)制藥物飼料
準(zhǔn)備2/3牛心或瘦牛肉的飼料和1/3菠菜,所有的成分必須剁碎的足夠小,以致于小魚能消化。混和后,分成50g一份在小塑料袋里或包里,冷凍,以后需要時(shí)用。
現(xiàn)在,對(duì)于小的錫罐,加50ml冷水和1g能產(chǎn)生動(dòng)力的瓊脂。拿一部染色,以使食物更適口,再加一些maggi,不要超過(guò)一杯湯的需要。加熱時(shí),用一個(gè)小叉子混合直到瓊脂溶解。大約80℃,攪拌50g牛肉磨成小塊,不要讓溫度下降。當(dāng)所有的牛肉磨細(xì)后,從水里去掉錫罐,讓它慢慢冷卻。依靠熱的穩(wěn)定性,藥攪拌加熱,在大約40-50℃時(shí)在凝固以前加入。許多抗生素不耐熱,因此藥物混合物,必須迅速冷卻,在活性成分揮發(fā)之前。不要讓它凝固,或瓊脂呈流體。做完后的藥物呈固體,有彈性,魚習(xí)慣吃的飼料,在2-5℃的冰箱中能保藏3d。
作為飼料,在達(dá)到28℃時(shí),切成魚嘴大小的小塊,仍然保持固體。至少12h以后,所有沒(méi)有吃的食物必須從缸里拿走,否則會(huì)發(fā)霉。任何抗生素混合在飼料里,不久就會(huì)失去它的藥效,因此不要給太多的藥物飼料,以防它超過(guò)1h還在吃。
方法C1:吖啶黃素(吖啶黃)
用途:體皮污染或有云狀物,嘴爛掉,鰭爛掉,傷口消毒
適用范圍:口絲蟲屬,斜管蟲屬,車輪蟲,小車輪蟲,屈撓桿菌,鰭和皮膚的污染。
所有的名字指的是同一種藥。顏色濃,Acriflavin能用于水族箱的完全消毒,但是,能破壞植物。在加藥之前,過(guò)濾物質(zhì)應(yīng)該被清洗。治療后,過(guò)濾器加活性炭除去殘藥。
貯液:1g/1L水
劑量A:1ml貯液加在每升水中預(yù)防感染
劑量B:3ml貯液加在每升水中用4d,預(yù)防早期感染
劑量C:5ml貯液加在每升水中用2-4d,防止柱狀菌,口絲蟲屬,車輪蟲和小車輪蟲。
劑量D:10ml貯液加在每升水中用10天或20天,注意:許多魚不能忍受此劑量。
方法C2:酒精
水蛭附在魚體上,可用棉花占酒精涂在水蛭上。此種治療,魚需離開水面。
方法C1:堿性亮綠(Basic brilliant green)
這種染料在各種寵物店為魚準(zhǔn)備的通用的藥。它們比純的煌綠方便。
用途:皮膚污濁,爛鰭,爛鰓,皮膚真菌,和原生動(dòng)物。
作用范圍:G+,皮膚真菌;和原生動(dòng)物病。
在單獨(dú)的一個(gè)水箱治療。用水清洗過(guò)濾的生棉花和泡沫材料,這個(gè)治療對(duì)許多魚是有毒的。
儲(chǔ)備液:1g/L,放在棕色瓶中。
劑量A:2ml儲(chǔ)備液加到12.5L水中,作用24h,然后全部換水,或者把魚稱到另一個(gè)水箱中,在第三天重復(fù)治療。作用于細(xì)菌皮膚感染。
劑量B:2ml儲(chǔ)備液加到15L水中,把魚在此液中浸洗4h一次,作用3d。治療的洗液必須是新鮮的水,此法用于治療寄生蟲和真菌。
方法C4:硫酸奎寧,鹽酸奎寧
用途:淡水卵旋蟲
劑量:1g奎寧加入到100L水中,作為3d連續(xù)浸洗的洗液。
奎寧的毒性對(duì)魚敏感,低等動(dòng)物不能忍受此藥。鹽酸奎寧是好于硫酸奎寧。雖然奎寧溶于水后一段時(shí)間會(huì)分解,但是治療后,奎寧易被活性C吸收。在治療前清洗過(guò)濾物質(zhì)。先讓魚在一個(gè)小的水缸里治療,然后再在水族箱自己治療。此種方法當(dāng)再灌入水后,一般沒(méi)有魚死亡。以后,換了所有的水。如果水箱中的水變得污濁,把魚移到單獨(dú)的水箱里治療。
方法C5:Concurat L10%
這是一種廣譜驅(qū)蟲劑,牛、羊、豬和禽常用。因?yàn)橛刑鹞?,必須遠(yuǎn)離小孩。
用途:腸道線蟲
劑量 A : 2g/L ,先浸洗魚體,血紅色蟲,直到幼蟲死亡,然后立即飼喂魚。
劑量 B :混合 1gConcurat 在 100g 食物里,通過(guò)方法 B5 在 50 ℃下混合。5d給一次。
方法C6:二甲基亞礬
DMSO 是一個(gè)用于鰓,皮膚和腸道蠕蟲的溶劑,由于它的活性成分在水中是不溶解的,因此第一次要溶解在有機(jī)溶劑里。DMSO是近來(lái)開始用的,有非常強(qiáng)的毒性,不要與人的皮膚相接觸,不要讓孩子抓它。當(dāng)沒(méi)有別的化學(xué)物質(zhì)或藥在水里時(shí),魚對(duì)此藥的耐受力是非常強(qiáng)的。甚至水中的預(yù)備物質(zhì)也能變成有毒,在目前的DMSO下,水箱和飼養(yǎng)設(shè)施必須絕對(duì)的要清洗。在DMSO下,高濃度的亞硝酸或氨能使魚昏睡。
預(yù)先沖洗過(guò)濾材料,換掉大部分水,有很好的效果。DMSO也能引起水箱不好聞的氣味達(dá)一周。由于此治療也能殺死蟲卵,所以沒(méi)有必要重復(fù)治療。因?yàn)樗猩厦娴奈kU(xiǎn)都與DMSO有關(guān),所以水族養(yǎng)殖者不應(yīng)重復(fù)使用。
自從1988年丙酮溶解在氟茉達(dá)唑里有很好的耐藥性,使用非常成功。所有鰓和腸道蠕蟲和它們的卵都被破壞了。僅在100倍正常劑量時(shí),才對(duì)魚有毒。不會(huì)留下任何不正常的氣味在水缸周圍。飼喂flubenol5%,再加B5能破壞腸道蠕蟲,但是當(dāng)魚吃了底部的蟲卵后,會(huì)再感染。
劑量A:200mgflubenol5%在100L水中,然后加5ml丙酮或DMSO,搖動(dòng)幾分鐘后,分布在易感水的表面。5-8天后,通過(guò)換水去掉藥,水變得輕微渾濁。在治療后,注意增氧,細(xì)菌過(guò)渡繁殖,引起污染和缺氧癥狀。換水是必要的。
劑量B:加100mgflubenol5%到100g飼料中混合B5,每?jī)商旖o5次。在這些天,僅一次用于正常食物中。
顯微鏡檢測(cè)治療在10d內(nèi)不會(huì)發(fā)現(xiàn)任何結(jié)果,但是這段時(shí)間蠕蟲開始死亡。那是可以預(yù)計(jì)的,因?yàn)閒lubenol5%阻斷了從腸道來(lái)的營(yíng)養(yǎng)。鰓片蠕蟲需8d,Oxyurida大約10d,Capillaria需15d。但是,雌蟲破壞了蟲卵壁,在治療的第二天。它們看上去呈畸形和破裂驅(qū)除時(shí)。在第三天時(shí),因此沒(méi)糞便在蟲卵里看見,或在鰓部,
方法C7:福爾馬林
福爾馬林是高毒和致癌的。
用途:皮膚和鰓的外寄生蟲感染。如果魚有大面積的傷口不要用此藥。
作用范圍:鰓、皮膚蠕蟲,斜管蟲屬,車輪蟲
劑量:短地浸洗用2-4ml/10L水中作用30分鐘。
對(duì)魚觀察仔細(xì),如果魚失去平衡后,要停止治療。許多魚對(duì)福爾馬林敏感。此藥作用于卵需3d內(nèi)重復(fù)。治療后,把魚放到?jīng)]有寄生蟲的水箱里。對(duì)于Brollklynella hostilis,Blasiola建議用2.6ml福爾馬林在單獨(dú)的缸里使用。
方法C8:Gabbrocol
用途:白色和灰色糞便
作用范圍:遙道鞭毛蟲和纖毛蟲
Gabbrocol 能抵抗鞭毛蟲和纖毛蟲,可通過(guò)B5用來(lái)浸洗和飼喂。
因?yàn)檫\(yùn)載有效成分的賦形劑是葡萄糖,Gabbrocol洗液有點(diǎn)問(wèn)題。治療需在空的水箱里,增氧要足,要清洗生棉花或泡沫材料。因?yàn)榧?xì)菌的繁殖,所以葡萄糖會(huì)引起水渾濁。在18h后,O2缺乏常出現(xiàn),引起魚呼吸困難,然后窒息。鑒于健康的魚不會(huì)出現(xiàn),一般說(shuō)來(lái)仍然在洗液里超過(guò)18h。
當(dāng)洗液變渾濁時(shí),把魚轉(zhuǎn)移到清潔的水中。這個(gè)時(shí)間足夠治療。如果你想用別的治療,那么在12h后,把魚轉(zhuǎn)到另一個(gè)水族箱中,并加點(diǎn)Gabbrocol。細(xì)菌的增殖和水渾,通過(guò)用蒸餾水或開水。治療箱必須完全用勢(shì)水清洗。
劑量:溶解5gGabbrocol在30L水中,讓魚浸洗18h。在有些病例,在另一缸加洗液再浸洗。
飼料劑量:調(diào)制2gGabbrocol到100g飼料中,在40℃,飼喂3d。在嚴(yán)重的病例,飼喂這個(gè)飼料,直到白色糞便消失,再繼續(xù)治療3d。
方法C9:Griseofulvin,F(xiàn)ulvicin tablets
用途:嘴部真菌,皮膚具菌,鰓腐爛和別的mycoses。
作用范圍:幾乎所有的魚病真菌。由于常幾個(gè)魚感染,可準(zhǔn)備一個(gè)長(zhǎng)浴缸。
劑量:10mg/L或500mg藥片到50L水中。
把藥片搗碎為粉末,溶解在熱水中。3d后菌絲消失,可停止治療。如果水箱已經(jīng)有真菌,這個(gè)治療可能會(huì)損害植物。治療后,換一半的水,通過(guò)活性C,去掉余下的藥。
方法C10:碘化鉀和碘
用途:甲狀腺腫大
良性甲狀腺腫瘤能用這些藥治療。僅2-4周后,就會(huì)恢復(fù)。在這段時(shí)間腫脹或腫瘤慢慢會(huì)消退。在水缸里進(jìn)行治療,不要用活性C過(guò)濾。
儲(chǔ)備液:0.5g碘和5gKI溶解在100ml水中。
劑量:用試管,加1滴儲(chǔ)備液在5L水中。更精確的是1ml儲(chǔ)備液加到50L水中。正常的劑量是每換一次水重加一次儲(chǔ)備液。
方法C11:高錳酸鉀
用途:非常嚴(yán)重的下列寄生蟲感染
范圍:車輪蟲,鲺屬,鰓寄生蟲,水霉
治療可用在單獨(dú)的一個(gè)水缸里短時(shí)浸洗30-45秒。這個(gè)引起魚中毒的劑量接近殺死寄生蟲的劑量,所以此種方法治療僅適用于緊急情況。治療可用方法C18對(duì)魚是容易治療的。藥效在臟水中比在干凈的水中低。
劑量:短時(shí)浸洗100mg/10L水,在浸洗魚時(shí),要觀察魚的狀況。鰓片蠕蟲治療,重復(fù)3d。在沒(méi)消毒前,不要把魚放回同一水缸中。
注意:因?yàn)镵mnO4在水不穩(wěn)定,用小劑量浸洗幾小時(shí)或幾天是不合理的。
方法C12:NaCl
NaCl 是古老的治療魚病的藥
用途:早期皮膚、鰭陰暗和不嚴(yán)重的寄生蟲感染
范圍:口絲蟲屬,斜管蟲,車輪蟲,真菌。
對(duì)于輕的病例,鹽可用于長(zhǎng)時(shí)和短時(shí)的浸泡。
劑量A:(短時(shí)浸洗)15-20g/L水中。浸洗10-45分鐘
劑量B:(長(zhǎng)時(shí)浸洗)19g/12.5L水中,為軟水魚;3g/10L水中,為硬水魚。
中間的不得不估計(jì)。5天過(guò)后,通過(guò)換水而減少量。鹽濃度達(dá)到2g/10L,水中植物會(huì)破壞。我們可以準(zhǔn)備我們自己的生理鹽水,通過(guò)溶解6.4g/L水中。
方法C13:CuSO4,CuSO4•5H2O
用途:卵甲藻,藻類,真菌和以下引起的混和感染
作用范圍:口絲蟲,水霉屬,鰓霉,卵甲藻,藻,三代蟲屬
儲(chǔ)備液:1gCuSO4和0.25檸檬酸加到1L蒸餾水中。
劑量:12.5ml/10L水中,作用10天,在3d,5d和7d時(shí),劑量減半。
測(cè)試反應(yīng)中的Cu的濃度,現(xiàn)在用于診斷水中化學(xué)物質(zhì)是有價(jià)值的。在治療期間,水中的Cu不應(yīng)該低于0.12mg/L,也不要超過(guò)0.18mg/L。每隔一天測(cè)試,并加入失去的Cu。低等動(dòng)物不能忍受此種治療。直到Cu的濃度降到0.3mg/L,它們才被去掉?;騽e的魚轉(zhuǎn)到寬的玻璃缸中,并在這里治療。清洗過(guò)濾棉和泡沫材料。感染了真菌和藻類的魚的治療,可用1g CuSO4加到10L水中,作用10-20分鐘,植物可能會(huì)破壞。在治療前淡水的硬度必須在10ºDH。
方法C14:隱核蟲的混合治療
儲(chǔ)備液:1gCuSO4+2g甲基蘭+0.25g檸檬酸加在1L蒸餾水中。
在單獨(dú)的一個(gè)容器中治療,低等動(dòng)物不能忍受這個(gè)治療。
劑量:12.5ml儲(chǔ)備液加到10L水中,劑量在第4d和第8d時(shí)減半。最好控制Cu的濃度在0.15-0.2mg/L之間。在治療期間,清洗過(guò)濾棉或泡沫材料。
方法C15:混合治療隱核蟲
治療包括兩條。第一,魚短時(shí)浸洗可用4mgCuSO4+2.2ml福爾馬林到10L海水中。然后把它們轉(zhuǎn)到長(zhǎng)時(shí)浸洗用20mgCu加到100L海水中,治療必須持續(xù)10d。短時(shí)浸洗必須在每隔48小時(shí)重復(fù)。
方法C16:草酸鹽孔雀石綠
用途:皮膚寄生蟲,皮膚污染,皮膚真菌
范圍:小瓜蟲,車輪蟲,斜管蟲,水霉
保存在低溫,遠(yuǎn)離陽(yáng)光的條件下,這個(gè)洗液是穩(wěn)定的。不要把孔雀石綠和食物一起放在冰箱里因?yàn)榭兹甘G具有高毒和致癌性。寵物店里的孔雀石綠準(zhǔn)備液,僅當(dāng)這些不反應(yīng)時(shí),應(yīng)該用純物質(zhì),即使是用過(guò)的。
劑量A:6ml儲(chǔ)備液加到100L水中,在第3d,6d,9d天時(shí),經(jīng)一半的劑量,12d后,換1/3的水。任何換水必須重新加劑量。
在治療期間,注意通氧,孔雀石綠是一種強(qiáng)烈的染料,染色被去掉非常困難。一般說(shuō)來(lái),即使敏感魚也能忍受它的劑量。在水里有大量微生物,或有活生物濾器,這個(gè)劑量不得不增加。但是,不要超過(guò)15ml加到100L水中的劑量。敏感魚類不能忍受劑量A,在一般情況下。在這些水箱里,用4ml儲(chǔ)備液加到100L水里,然后在第4d,8d,12d時(shí)加2ml。
劑量B:通過(guò)G.blasiola,13-15mg/100L海水對(duì)Brooklynella spp.是有效的。治療可用單獨(dú)的一個(gè)水箱,并清潔過(guò)濾裝置,并有良好的充氧3-4d。有可能上面的劑量在準(zhǔn)備的海水魚可能不能忍受。
方法C17:甲基蘭
用途:皮膚污染和真菌感染,預(yù)防真菌的感染和post-travel stress,血液疾病。
范圍:口絲蟲,斜管蟲,車輪蟲,水霉,隱鞭蟲屬,錐體蟲屬
甲基蘭長(zhǎng)時(shí)浸洗做為預(yù)防和治療疾病效果都較好。處理水族箱,雖然不需要活性碳,但是,需清洗過(guò)濾棉或泡沫材料。
儲(chǔ)備液:1g甲基蘭加到1L水中。
劑量 A : 1g 儲(chǔ)備液加到1L水中。這個(gè)劑量可用來(lái)凈化處理水族箱。5d過(guò)后,用活性C去掉剩余的殘?jiān)?/font>
劑量B:3ml儲(chǔ)備液加到1L水中(加強(qiáng)劑量),在單獨(dú)的一個(gè)水缸里,以此濃度作用5d。
劑量C:200ml儲(chǔ)備液加到10L水中作用30分鐘治療外寄生蟲。
注意:敏感魚類不會(huì)耐此藥。
劑量D:作為感染后預(yù)防感染,可用50ml儲(chǔ)備液加到100L水中。
劑量E:作為預(yù)防真菌感染魚卵,可用30ml儲(chǔ)備液加到100L水中放在哺育箱中。
方法C18:Metriforate,Masoten,Neguvon 100%,trichlorphon
用途:皮膚和鰓外寄生蟲感染
作用范圍:車輪蟲,鲺屬,鳋屬,錨頭蚤,指環(huán)蟲,三代蟲屬
Masoten 對(duì)甲殼類寄生蟲和皮膚、鰓寄生蟲具有強(qiáng)毒。長(zhǎng)時(shí)浸洗比短時(shí)浸洗富有成效。在高濃度28℃以上對(duì)許多魚類是有毒的。大的魚類比小的于類對(duì)此藥有耐受力。脂鯉和鯰魚對(duì)此藥特別敏感。此藥重復(fù)使用會(huì)使魚喪失生殖能力。用過(guò)此藥后的魚的后代感染此病,治療需用更大的劑量。
治療可在水族箱里進(jìn)行。僅是非常干的粉末才能用;如果成團(tuán)了,是不能用的。Masoten儲(chǔ)存應(yīng)用螺旋的密封蓋密閉,超過(guò)幾個(gè)月后會(huì)失效,并變得更有毒性。測(cè)試表明失效是由于吸收了空氣的濕氣。更多水分的吸收,對(duì)鰓寄生蟲的作用越小,而對(duì)魚的毒性越大。新買的Masoten的耐受性比儲(chǔ)存的Masoten好。這個(gè)程序被耽擱,通過(guò)立即包裝,買Masoten放進(jìn)密閉的玻璃瓶里,然后儲(chǔ)存它們,如一些干燥劑,大的玻璃容器里,例如壇子,或玻璃瓶,在塑料袋里密閉。藍(lán)色矽土膠是一個(gè)理想的干燥劑,這個(gè)藍(lán)色的小顆粒失去了它們的顏色,當(dāng)吸收了大量的水分后。這個(gè)膠能增加,通過(guò)展開錫罐在105℃-110℃加熱15分鐘左右。當(dāng)這個(gè)水分驅(qū)散后,又變成藍(lán)色。這個(gè)罐頭能保持幾年。
這里的質(zhì)量是指新近買的Masoten,作為Neguvon,增加數(shù)量通過(guò)a factor of 0.8。
儲(chǔ)備液:1gMasoten加到1L水中,這種洗液必須立即用,因?yàn)樗环€(wěn)定。殘?jiān)谕ㄟ^(guò)加NaOH作用2h,使PH達(dá)到12以上后,才能排到下水道中。
劑量A:100ml儲(chǔ)備液加到100L水缸水中。如果溫度在25℃,PH值在6-7之間,幾乎所有的魚都能耐受此藥。治療持續(xù)3d,以后至少更換50%的水。殘藥可用活性C過(guò)濾。
劑量B:1gMasoten加到10L水中,在25℃下,PH為6-7,浸洗1h,劑量A可控制鰓和皮膚寄生蟲。產(chǎn)卵的指環(huán)蟲治療不容易,因?yàn)橄x卵能耐Masoten的高濃度,具有治療建議的描述在下:整個(gè)魚群感染鰓寄生蟲,方法特別是適應(yīng)飼養(yǎng)的箱里,底部環(huán)境會(huì)變質(zhì)。
劑量C:在水族缸里,這個(gè)魚可通過(guò)劑量A作用3d治療。然后把它們轉(zhuǎn)到?jīng)]有寄生蟲的缸里。起先的缸子洗干凈,用福爾馬林消毒或高溫消毒。然后讓缸子曬干。在第8天時(shí)開始治療,開始在第二個(gè)缸里用劑量A,作用3d。同時(shí),第一個(gè)缸子重新裝滿水,過(guò)濾系統(tǒng)重新開始。接下來(lái)這個(gè)魚在第二個(gè)缸里浸洗,在第11d時(shí),返回到它們自己的缸里。此過(guò)濾需要至少3-6周。整個(gè)治療過(guò)程溫度不能超過(guò)25℃。僅在這個(gè)溫度,才能保證在第一次孵化的幼蟲不會(huì)在第二階段治療時(shí)發(fā)育為性成熟的寄生蟲。
此種方法不能保證全部治愈,因?yàn)橐恍┲腑h(huán)蟲蟲卵能在水箱底部存活幾周,甚至幾個(gè)月。在此病,方法C6是有效且容易,能保證在經(jīng)過(guò)一次治療后,不會(huì)出現(xiàn)鰓部寄生蟲。
一般說(shuō)來(lái),Masoten在沒(méi)有仔細(xì)考慮前,不應(yīng)該用此藥;此藥對(duì)各種魚類都有毒性,對(duì)水質(zhì)也有破壞,長(zhǎng)時(shí)間治療會(huì)增加毒性。高劑量,通常在第一個(gè)24h內(nèi)有很好的耐受性。把魚放進(jìn)用過(guò)的儲(chǔ)備液或幾小時(shí)前的儲(chǔ)備液是沒(méi)有用的。Masoten必須每次要用淡水清洗。殘余的儲(chǔ)備液必須立即用NaOH中和而去掉。
方法C19:甲哨達(dá)唑(250mg)
用途:腸道和組織鞭毛蟲感染
范圍:六鞭毛蟲,Spironucleus spp. Trichomonas.SPP. Protoopalina spp.此藥不會(huì)幫助對(duì)抗蠕蟲。Flagyl是用來(lái)作為已安裝好的水族箱長(zhǎng)時(shí)浸洗。首先藥片壓碎溶解在溫?zé)岬乃铮缓?,把它們分散在水族箱里的水面。此溫度升?0-33℃時(shí)能增加療效。
劑量:250mg加到50L水中。3d后,換1/3的水,且緩慢降低溫度。可用活性C去掉水里的殘藥。對(duì)此藥敏感的植物當(dāng)時(shí)可能有影響。
飼喂劑量:壓碎250mg藥片成粉末,在50℃,混在食物里,早晨和晚上飼喂6d。
方法C20:MS-222(Tricaine),amino-benzoic acid ethyl ester methanswlfonate。
MS-222 是魚最好的麻醉藥品。也能作用于許多低等動(dòng)物,常用作鏡檢時(shí),微生物的固定劑。此藥可用來(lái)當(dāng)魚虛弱時(shí),增加水的硬度。
劑量A:10mg/L用于游動(dòng)時(shí)平衡魚
劑量B:用于麻醉魚:從50-130mg/L水中,依魚的大小。作用魚15分鐘后,把魚轉(zhuǎn)到淡水中15分鐘,讓它恢復(fù)。
劑量C:1g/1L水中,作用10分鐘,殺死魚。
方法C21:硝基呋喃托英
用途:爛鰭,大多數(shù)細(xì)菌感染;預(yù)防腸道腫脹。細(xì)菌性感染,弧菌病。
范圍:一些G+,假單胞菌,氣單胞菌,弧菌
如果有細(xì)菌感染的魚,把它取出水箱,放進(jìn)檢疫箱,然后用硝基呋喃托英預(yù)防治療。此病能作用于水族箱,如果過(guò)濾材料是第一次清洗,且吸出底部的mulm?;钚訡必須過(guò)濾去掉。
劑量:加硝基呋喃托英的一個(gè)膠囊到30-40L水中。這個(gè)膠囊的一半能容易成為有效成分,溶解在一杯溫水里,把沒(méi)有溶解的剩余部分倒入水族箱里治療。浸洗15d。以后,換大部分水和用過(guò)多的C濾過(guò)水。
食物劑量:加300mg粉碎的硝基呋喃托英到200g食物里,通過(guò)方法B5,早上和晚上飼喂9天。
方法C22:Furazolidone
此藥便宜,但是僅能用在飼料中。它有價(jià)值的活性成分僅在500g的包裝里,因此,相對(duì)較昂貴。純的furazolidone能單獨(dú)給藥,不加別的物質(zhì),作為短時(shí)浸洗。
用途:假單胞菌,氣單胞菌,弧菌,Triohomonas SPP.和許多coccidia。
飼料劑量:在50-55℃,加300mgfurazolidone到100g食物中,通過(guò)B5制成,早晚喂兩次,連用6d。
浸洗劑量:500mg純的Furazolidone加到100L水中,在單獨(dú)的檢疫箱。不要用過(guò)多的C過(guò)濾。換40%到50%的水,在3d后。剩余的藥可用活性C去掉。
方法C23:制霉菌素軟膏
此軟膏的主要成分是液態(tài)聚乙烯和液態(tài)parafm,顆粒能很好地連在皮膚和粘膜上。
用途:皮膚真菌感染,傷口預(yù)防感染。
范圍:真菌
把魚脫離水面,仔細(xì)看污濁部分或用過(guò)濾紙浸干感染部位,然后用制霉素軟膏。
持續(xù)治療:每治療1-2次,直到菌絲消失,皮膚傷口愈合,或新的皮膚形成。
方法C24:piperazine citrate
用途:腸道寄生蟲
作用范圍:棘頭蟲,絳蟲,吸蟲
此藥必須加在食物里,那樣才能直接作用于腸道。鑒于它的熱穩(wěn)定性,在80℃時(shí),用方法B5混入食物里。
劑量:600mg藥加到100g食物里。早晚一次用8d。
方法C25:磺胺,磺胺噻唑
用途:內(nèi)部器官細(xì)菌感染
范圍:Actinomycetes,球蟲和許多G+和少量G-,假單胞菌,屈撓桿菌,corynebacteria。
由于此藥能從腸道很好地到達(dá)血液,因此混合在食物里有很好的效果。此藥可作為上面所提到細(xì)菌的特別選擇。
劑量:把300mg磺胺噻唑加到100g食物里,用方法B5準(zhǔn)備。溫度應(yīng)在60℃。早晚飼喂一次用3d。
此藥有很低的溶解度,所以用于長(zhǎng)時(shí)浸洗比較困難,應(yīng)用在一個(gè)單獨(dú)的水缸里,首先溶解稱重后的藥在溫水里,密閉,加熱幾分鐘。注意:由于密閉的空氣劇烈的膨脹,有可能爆炸。在第一次震動(dòng)后,留出出口讓空氣跑掉。搖勻后,把藥品分布在檢疫箱的水表面,此缸無(wú)過(guò)濾器。否則,懸浮于表面的磺胺類藥物過(guò)濾掉。為了預(yù)防,水不得不保存新鮮的循環(huán)水。用強(qiáng)力的水源。
方法C26:Trimethoprim
用途:內(nèi)部器官和血液的細(xì)菌和球菌感染
范圍:Staphylococci,hemolytic streptococci,pneumococci Escherichia coli,enterococci,proteus,Hemaphihls influenzae,Salmonella,Shigella。
混合trimethoprim和磺胺類藥能增加它們的療效。有此兩藥最佳組合的制成品。由于病原體對(duì)此藥產(chǎn)生抗體比較快,此藥應(yīng)該每6周用一次。此藥的商業(yè)名字有:Drylin,Eusaprim,Borgal Sohotion(75%) Cotrimstada-forte. Drylin和Eusaprim是老藥,低濃度就有效。現(xiàn)在歐洲最常用的是Borgal和Cotrimstada-forte。
劑量:1片Cotrimstada-forte加到80L水族箱中,作用3-5d。過(guò)渡不能包含有C;過(guò)濾絲線必須在服用藥前完全清洗。
15ml Borgal 儲(chǔ)備液加到100L水中。
作為注射,用2mlBorgal solution(7.5%)/200g體重。如果48h后需要的話,可再注射一次。注射在腹腔內(nèi)。
僅獸醫(yī)和專家才能對(duì)魚免疫或接種疫苗。
方法C27:維生素制劑
商業(yè)生產(chǎn)的維生素制劑有溶解的粉末或阻止它們揮發(fā)的油,幫助它們粘在食物里,直到魚消化它們。這些很重要,它們包括治療頭孔病的Ca,P,一旦病因去掉。許多別的物質(zhì)和微量元素對(duì)于魚的健康和皮膚顏色有明顯影響。此制劑溶解在水里,沒(méi)有什么效果,因?yàn)樗鼈冄杆俜纸獾剿锪恕?/font>
混合500mg維生素粉末到100g食物里,飼喂健康的魚一周不應(yīng)該超過(guò)兩次。但是,喂病魚應(yīng)該一周4-5次。一旦病魚恢復(fù),劑量應(yīng)減少到正常劑量。
大量的飼喂維生素,也會(huì)引起魚的疾病
當(dāng)通過(guò)方法B4和B5把Osspulvit-N或Calcipot飼喂魚時(shí),任何不夠的維生素礦物質(zhì)都應(yīng)通過(guò)別的制劑補(bǔ)上。用Pulverized VMP藥片是可能的。
方法C28:Volon-A adhesive ointment
此軟膏非常易粘在皮膚和粘膜上。因此必須預(yù)先干燥。用于皮膚和傷口的感染,涂在傷口部位。它的活性成分是抗炎,這就意味著敏感皮膚也能涂上它。如果有必要,抗生素粉末,磺胺類藥物或抗真菌藥一起混合成軟膏。
劑量:活性成分體積占5%,軟膏占95%。
方法C29:H2O2(3%)
除了消毒,H2O2也能用于迅速增加水中的O2。它通過(guò)分解純氧到水里。
加25ml3%的H2O2到100L水族箱水里。這個(gè)劑量決不能用第二次,過(guò)多的O2會(huì)導(dǎo)致魚的鰓和皮膚惡化,從而導(dǎo)致魚的死亡。如果魚在接下來(lái)的劑量,幾分鐘內(nèi)呼吸困難,然后考慮缺O(jiān)2有另一個(gè)原因。(例如,鰓部寄生蟲)。
方法D1:KMnO4
KMnO4 常用于小缸消毒和不能煮沸的器皿的消毒。水缸加滿水,把所有的工具發(fā)進(jìn)缸里消毒。然后加入KMnO4,濃度直到通過(guò)水缸不能看到任何東西為止。讓外面的過(guò)濾器過(guò)濾,沒(méi)有任何過(guò)濾工具因此紫色洗液清洗了所有的工具。3d后,清洗所有的工具,直到顏色褪掉。
方法D2:食用鹽
鹽能用于消毒。溶解350g鹽到1L水里。用這種方法消毒比較昂貴,且不方便,但是,此種方法對(duì)于網(wǎng)和別的小器缸是理想的消毒藥。
在此濃度準(zhǔn)備一個(gè)桶,讓網(wǎng)浸在里面。浸洗24h。因?yàn)辂}液不會(huì)變質(zhì)或變少,所以一桶鹽水能長(zhǎng)時(shí)間用。當(dāng)水蒸發(fā)時(shí),加點(diǎn)自來(lái)水。如果你覺(jué)得水的顏色太濃易與別的水混合,你可以加點(diǎn)甲基蘭在里面。
空的水缸可以涂上鹽漿和鹽液。讓鹽漿在水缸里干燥,然后在接下來(lái)的幾天里讓它重復(fù)幾次。
方法D3:H2O2(30%)
注意:30%的H2O2是高腐蝕性物質(zhì)。不要讓它粘在皮膚和衣服上。
通過(guò)光,H2O2能分解為O2和H2O,因此儲(chǔ)存H2O2應(yīng)用棕色瓶和琥珀色瓶子。30%的H2O250ml加到100L水中,用于消毒水缸。環(huán)境和器皿消毒也可用此洗液。礫石最好的消毒方法是通過(guò)在150℃烘烤兩小時(shí),否則,H2O2迅速揮發(fā)掉。讓過(guò)濾系統(tǒng)運(yùn)作,但是沒(méi)有任何東西(看D1)。讓洗液浸在缸里3d,在這段時(shí)間,把燈泡打開。然后排空水缸,用自來(lái)水清洗。此法要求清洗仔細(xì),不要留下任何殘余物質(zhì)。
方法D4:明礬
水缸植物消毒常用明礬。在寵物店,水中植物不是在單獨(dú)的一個(gè)植物水缸里,而是和魚在一起,因此有可能把病原體帶進(jìn)你的家里。因此這些植物不能在檢疫箱生活得好,所以你不得把在它們移進(jìn)你的水缸里時(shí)消毒。溶解一些明礬在1L水里,浸洗植物5分鐘。然后用新鮮水清洗它們,再把它們移到水缸里。
方法D5:異丙醇
許多養(yǎng)殖者可能感到需要消毒它們的手,另外清洗它們解剖了的魚。一般說(shuō)來(lái),是沒(méi)必要的,因?yàn)轸~病一般不傳染給人。但是,結(jié)核病是個(gè)例外。
商業(yè)用的是100%的異丙醇稀釋為70%的。對(duì)于稀釋,量70ml100%的異內(nèi)醇在量筒里,然后,加水到刻度為100ml。然后,在用肥皂和水清洗手后,用這個(gè)酒精打濕你的手,讓它們?cè)诳諝庵懈稍?。?0%的洗溶液也能用于浸洗小器皿和試管消毒。
如果你把此液裝在噴霧器里,你能用此液消毒空缸和別的大物體。噴所有的表面,特別是角落,完全而均勻,然后,讓它們干。在幾小時(shí)內(nèi),重復(fù)噴幾次。然后,酒精揮發(fā)沒(méi)有留下任何殘留的物質(zhì),因此,在酒精干了以后,水缸又能充滿水用了。
方法D6:福爾馬林
加30ml濃度為35-40%的福爾馬林到10L的桶里。然后充滿水。為了避免混合,加一些甲基蘭。網(wǎng)和別的小物件能浸泡在此液里。兩小時(shí)的消毒是絕對(duì)需要的。此法可能在密閉的地方有點(diǎn)冒險(xiǎn),因?yàn)楦栺R林在空氣里能刺激呼吸。福爾馬林也能刺激皮膚。另外,記住,福爾馬林是致癌的。
第十一章
魚病的顯微鏡診斷 11.1 顯微鏡
對(duì)于魚病診斷來(lái)說(shuō),最重要的就是顯微鏡。它可以單獨(dú)用于檢查涂片,寄生蟲,和器官標(biāo)本。小孩玩耍用的顯微鏡是不貴的,但是,對(duì)于魚病來(lái)說(shuō)是沒(méi)有用的。因?yàn)樗鼈儧](méi)有標(biāo)準(zhǔn)部分,且光學(xué)系統(tǒng)也不夠。孩子和年輕學(xué)生很快就推動(dòng)它們興趣,或者,如果讓上面的不發(fā)生,它們最終應(yīng)擁有一流的顯微鏡。一個(gè)好的顯微鏡可能會(huì)嚇著你,但是,決定買一個(gè)像它那樣的儀器,用正確的管理,不會(huì)使你筋疲力盡,因此這個(gè)投資是不高的。一個(gè)好的顯微鏡是生命的探索工具。
所有好的顯微鏡的供應(yīng)商提供了基本的裝備,隨著時(shí)間的過(guò)去,擴(kuò)大和提高了顯微鏡的功能。此章沒(méi)有篇幅來(lái)介紹顯微鏡技術(shù)。初學(xué)者可以仔細(xì)閱讀說(shuō)明書和別的剛買來(lái)的顯微鏡的文字說(shuō)明。為初學(xué)者的文字技術(shù)和為高級(jí)顯微鏡的大量知識(shí)。
當(dāng)買一個(gè)顯微鏡時(shí),確保所有的部件是標(biāo)準(zhǔn)的。如果鏡筒是 160mm ,許多制造商的產(chǎn)品是結(jié)合在一起的。好的鏡頭具有長(zhǎng)的配套的觀察鏡。
在開始,物鏡有 10 倍, 20 倍和 40 倍就足夠了。對(duì)于相匹配的有 3 個(gè)目鏡或接目鏡,有 5 倍, 10 倍和 15 倍。這些鏡頭最大的放大倍數(shù)是 40 × 15=60 倍,對(duì)于研究魚的寄生蟲足夠了。當(dāng)你想更大的顯微鏡時(shí),你能用放大倍數(shù)為 100 倍。
顯微鏡的位置有兩種不同的制造方式。一種是,用鏡筒的上升或下降來(lái)調(diào)焦;另一種是,載物臺(tái)上升或下降。這個(gè)鏡筒和支架混合在一起是堅(jiān)固的。
除了正常的亮視野照明外,別的照明方法也是可利用的。最好的是暗視野和對(duì)比方法。僅當(dāng)一個(gè)有經(jīng)驗(yàn)的,從有儀器知識(shí)的從事者在家里能對(duì)比安裝,為 400 倍安裝的暗視野也是容易安裝的。那樣做,從黑的箱子里取出各種放大倍數(shù)。鏡頭中內(nèi)的鏡徑放大倍率大的比放大倍率小的鏡徑大。這個(gè)孔徑是由一個(gè)中央連續(xù)的玻璃盤或清晰薄片,用來(lái)濾光。這個(gè)圓形的視野有各種大小是制造好的,依靠電容器徑孔開著。你調(diào)試各種鏡孔為每個(gè)鏡頭,直到產(chǎn)生一個(gè)黑區(qū)域呈現(xiàn)明亮的物體。甚至較小的細(xì)菌也能在 400 倍下看得非常清楚。當(dāng)這些圓形的光線從聚光器形成一個(gè)凹形的球體,這個(gè)結(jié)果印象是深刻的,在位于物體的區(qū)域的反射,通過(guò)到上面。上面散射,以致這個(gè)直接的光是直接通過(guò)物體。視野變暗,當(dāng)這個(gè)物體的光突然進(jìn)入鏡頭,因此看上去明亮了。所以本書的暗視野照片是用自己制的孔位照的。
11.2 測(cè)試顯微鏡的水平
好的鏡頭常用來(lái)描述,素描和照片。這些沒(méi)有考慮顯微鏡的放大,當(dāng)標(biāo)本的大小用微米,因此,排除了一些圖片中的錯(cuò)誤和且在放大以能逼真。觀察者能計(jì)算這個(gè)它自己的放大倍數(shù),通過(guò)測(cè)量這個(gè)像的大小,來(lái)區(qū)分出物體固定的大小。測(cè)試物體的大小,一是用一個(gè)目鏡的測(cè)微計(jì)或目鏡的校準(zhǔn)刻度用 10mm 刻度分成 100 份。配這個(gè)鏡頭和這個(gè)刻度,標(biāo)本的測(cè)微計(jì)是需要的,但僅一次,因此,可從別的朋友借。這個(gè)標(biāo)本測(cè)微計(jì)是 1mm 一個(gè)刻度是刻好的。為每個(gè)鏡頭,給予目鏡測(cè)微計(jì)的一個(gè)部分是必須計(jì)算的。放這個(gè)測(cè)微計(jì)在臺(tái)上,看兩個(gè)刻度對(duì)齊。然后尋找一點(diǎn),兩條線完全重合的。更進(jìn)一步刻度末對(duì)齊,這是更精確的結(jié)果。例如,如果測(cè)微計(jì)的 93 和目鏡測(cè)微計(jì)的 59 重合,那么計(jì)算是 0.93mm ∶ 59 份 =0.01576mm=15.76 微米 / 每分。
從現(xiàn)在開始,反目鏡是需要的,你現(xiàn)在知道 1 份是 15.76 微米。因此例如,一個(gè)寄生蟲長(zhǎng) 86 份,就是 1355 微米或 1.35mm 。
作為讀者,不需要目鏡的測(cè)微計(jì),這兒有一般常用鏡頭每份的大約長(zhǎng)度,用 10 倍測(cè)微計(jì)刻 10mm 分成 100 份:
Lens
Micron
2.5 ×
83.2
4 ×
23.8
5 ×
20
6.3 ×
15.8
10×
9.8
16×
6.3
20×
5.1
25×
3.8
40×
2.44
63×
1.68
100 ×
1
這些數(shù)據(jù)有輕微改變,通過(guò)制造商的鏡頭,這個(gè)鏡筒放大是1倍為這個(gè)操作。
11.3 玻璃器皿
除了顯微鏡和3.1章提到的儀器外,還有一些是需要的。
1 .載玻片和蓋玻片,是首先要提及的。載玻片是76×26mm玻璃條。蓋玻片是0.17mm厚,通常18×22mm平方,功圓形的。
2 .玻璃吸管
3 .有刻度的小吸管
4 . 100ml 有刻度的量筒
5 . 2-3 個(gè)觀察皿
6 . 5 個(gè)汪玻璃皿
11.4 新鮮標(biāo)本
最昂貴的儀器如果你不正確用它是沒(méi)有價(jià)值的。操作顯微鏡或自己熟練應(yīng)用它,必須首先準(zhǔn)備簡(jiǎn)單標(biāo)本。那樣做,放一滴水在顯微鏡載玻片上,再加一些藻類放在上面。然后蓋上蓋玻片,要求中間不留任何空氣泡。拿這個(gè)蓋玻片在拇指和食指或用鑷子從 45 ° 角,壓在標(biāo)本上,然后慢慢地放下去,直到完全接觸水滴。這個(gè)水沿著蓋片邊緣聯(lián)在一起?,F(xiàn)在慢慢均勻地降低這個(gè)邊緣,以致讓水滴強(qiáng)迫空氣排出。在制得好的蓋片上,兩層的空間不會(huì)超過(guò)蓋片的厚度。
如果一個(gè)厚的標(biāo)本制片,蓋片下面的空間必須充滿水。制片太厚的話,在高倍鏡時(shí),不會(huì)讓光通過(guò)得太多,僅能最上面的能聚焦。那是因?yàn)楫?dāng)放大倍數(shù)增加時(shí),聚焦的厚度變淺。視野的厚度或 sharpness plane 能表示或多或少的薄層,平行通過(guò)蓋片和標(biāo)本,正好觀察者能在這個(gè)平面看到。首先,練習(xí)用水滴浸整個(gè)標(biāo)本。
藻絲能制成好的標(biāo)本,因?yàn)槟隳馨阉鼈冎瞥煞浅1〉那衅?。通過(guò)濾紙,或吸墨紙?jiān)谏w玻片邊緣吸水。小心,不要讓非常小的標(biāo)本通過(guò)排出的水而被吸了出來(lái)。當(dāng)做別的制片和涂片時(shí)也用同樣的程序。
現(xiàn)在這個(gè)玻片能放在顯微鏡載物臺(tái)上。制造商的說(shuō)明書里有如何獲得最佳光線的說(shuō)明。注意,不要讓任何相關(guān)的如手或玻片接觸鏡頭,因?yàn)槟菢隅R頭可能變花或含有油脂。那樣,粗焦距不能聚焦載玻片,而總是離開它。當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡時(shí),眼睛通過(guò)水平線看載物臺(tái),讓目物幾乎接觸到載玻片。然后通過(guò)目鏡看,轉(zhuǎn)動(dòng)粗焦距旋紐,直到物體清晰出現(xiàn)為止?,F(xiàn)在調(diào)動(dòng)微調(diào),以使最佳呈像。
當(dāng)檢查死魚時(shí),預(yù)先準(zhǔn)備幾個(gè)載玻片,取下的標(biāo)本滴幾滴水。蓋片要清洗,干燥,沒(méi)有油或脂類污點(diǎn)。
拿載玻片和蓋片時(shí),只拿它的邊緣,不要拿中間,避免指頭上的油。許多玻片和蓋片在包裝之間也已清洗過(guò)。但是,對(duì)于制片來(lái)說(shuō),還是不干凈,在使用之前,把蓋片和載片用酒精浸泡,然后鑷子取出玻片,用吸水的布擦干玻片。如果這樣太不方便,可用另一個(gè)表面皿充滿氯仿,然后從酒精中撈出玻片浸在氯仿里,用鑷子取它們?cè)诳諝饫飵酌?,不僅玻片而且蓋片沒(méi)有油且干凈,將迅速干燥。
玻片和蓋片僅當(dāng)它們不是太臟時(shí)才能清洗再用。做標(biāo)本的固定和染色,初學(xué)者會(huì)用很多的時(shí)間來(lái)盡量清洗蓋片,在清洗時(shí),可能會(huì)打碎許多玻片。
無(wú)論是誰(shuí)想研究魚病工作,一定不要滿意僅僅不時(shí)地檢查魚病。一系例的微生物和水生生物的研究通常需要能區(qū)別無(wú)害的寄生蟲生物和辨別出病因。這個(gè)學(xué)習(xí)注定不會(huì)枯燥的,無(wú)論是誰(shuí),通過(guò)好的顯微鏡一旦觀察到一滴水里的微生物,那它一定會(huì)喜歡上顯微鏡。一旦在底部物質(zhì)里和過(guò)濾物質(zhì)里辨認(rèn)出無(wú)害的原生動(dòng)物,蠕蟲和節(jié)肢動(dòng)物藏在哪里是真正的財(cái)富的發(fā)現(xiàn)。這些微生物的區(qū)別,你可查各種向?qū)Ш蛨D書館里有用的書店里的書。
11.5 取材和壓片
準(zhǔn)備鏡檢的器官,剪成針頭大小的碎塊,能在薄的載片上清晰地聚焦。滴一些生理鹽水,用解剖針剝成最小的顆粒或你能做的最小碎片。如果標(biāo)本仍然太厚,那鈍的物體能使蓋片高于最大的碎片?,F(xiàn)在,把片子放在載物臺(tái)上,先用最低倍的鏡看標(biāo)本。第 3 章描述了當(dāng)標(biāo)本應(yīng)該撕成碎片且應(yīng)都?jí)浩w片下。
壓片需要一些力氣。器官組織放在兩片玻片之間,沒(méi)有任何水,直到組織擴(kuò)張得極薄。然后加一些水到這個(gè)薄的標(biāo)本上,放一個(gè)蓋片在上面。
11.6 病原分離
如果一個(gè)或更多的寄生蟲在一個(gè)新鮮的標(biāo)本上發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)到一個(gè)新的載片上。這點(diǎn)有幾個(gè)原因,觀察者想看到更好看寄生蟲,或能單獨(dú)清晰地照相。如果制成保存的載片,這個(gè)寄生蟲必須取離新制的載片,作進(jìn)一步的處理。這樣做,放這個(gè)玻片在一個(gè)玻璃盤子里上,能從下面透光。作為光源,你可以用燈泡和用鏡子反射光通過(guò)玻璃和平躺的標(biāo)本。此光可通過(guò)在鏡子前面用復(fù)寫紙作為散射而減弱光?,F(xiàn)在可以用 strong hand lens 或放大鏡看標(biāo)本的寄生蟲。放大鏡立著是熟悉的方法,兩手都空著。用鑷子仔細(xì)升高蓋玻片。如果標(biāo)本粘著,用解剖針把它弄松。但是,這比較簡(jiǎn)單,把標(biāo)本從滑片轉(zhuǎn)進(jìn)小圓盤里,充滿 3ml 生鹽水(看 10 章,方法 C12 )。
現(xiàn)在用兩個(gè)解剖針從周圍組織取寄生蟲。撕碎腸道碎片,或切成縱長(zhǎng)的。許多寄生蟲能在這個(gè)溶液里生活幾小時(shí),做完這個(gè)程序沒(méi)什么困難。用一個(gè)好的吸管,吸一個(gè)單獨(dú)的寄生蟲并把它們轉(zhuǎn)到干凈的玻片上,并加上生理鹽水。覆蓋蓋片后,在 100 倍和 300 倍下檢查。大的寄生蟲容易被蓋片壓碎,因此可用一個(gè)隔離物以防壓得太緊,如附一些小的粘土或蠟球到蓋玻片的角落,為了形成基肢,當(dāng)在載玻片上滑動(dòng)時(shí),能向里和向外,然后用解剖針輕輕地夾緊標(biāo)本。如果需要水,滴點(diǎn)水在邊緣。現(xiàn)這個(gè)生物標(biāo)本就能觀察了。極小的寄生蟲如鞭毛蟲在血里和腸道里是不能用放大鏡或 handlens 看見的。因?yàn)檫@些,能在低倍鏡下看到包含有許多鞭毛蟲的點(diǎn)。然后用吸管吸一些液體。移它們到玻片上,滴一滴生理鹽水。這個(gè)新的載片將非常薄,因此可以在高倍鏡下觀察。
為了能觀察它的病原發(fā)育,有時(shí)我們需要保存新制載片幾天。保持到濕潤(rùn)的空間里,避免水分蒸發(fā)。在一個(gè)緊口玻璃瓶里或盤里,裝 2cm 高的水,放這個(gè)載片的底部,升高水面。在鏡檢之前僅載片的下側(cè)擦去。
11.7 標(biāo)本的總制作
在許多病例,有必要保存寄生蟲很長(zhǎng)一段時(shí)間,也許新制的載片可以與此對(duì)比,或辨別。這就需要保存這些微生物很長(zhǎng)時(shí)間。一種是在溶劑里保存它們或制成長(zhǎng)期保存的切片。在操作時(shí)它們也需染色。
制切片,幾個(gè)步驟是必須的。第一步是固定。把標(biāo)本放進(jìn)固定液里,殺死細(xì)胞,但要留下象活組織的環(huán)境。它們不會(huì)分解,且保持微生物原來(lái)的形態(tài)。固定是為了標(biāo)本更一步的準(zhǔn)備。讓蛋白質(zhì)凝結(jié),以使細(xì)胞膜變得透明,染色能進(jìn)入細(xì)胞里。
好的固定需要固定液迅速滲透進(jìn)去。因?yàn)檫@個(gè)原因,標(biāo)本在任何位置不能超過(guò) 1cm 厚。流體的質(zhì)量要超過(guò)標(biāo)本 50-100 倍。這個(gè)固定劑不得不作用一定的數(shù)量,作用一次,且僅能用一次。有時(shí),這個(gè)固定液必須從標(biāo)本上洗去,在固定后,通過(guò)把標(biāo)本放在蒸餾水中或酒精中一段時(shí)間。在接下來(lái)的指導(dǎo)為準(zhǔn)備切片,浸洗的步驟和時(shí)間是給出了的。用這些指導(dǎo),初學(xué)者能準(zhǔn)備方便的切片,給它們最好的專家診斷。
由于固定必須快,大的標(biāo)本總是浸在準(zhǔn)備的固定液里。它們?nèi)缓笥描囎尤〕龌蛴梦芪M(jìn)吸管里。沖洗掉固定液。線蟲易用解剖針抓住和轉(zhuǎn)移。
被固定的標(biāo)本含有大量的水,因?yàn)樗鼈儾缓吐袢氲奈镔|(zhì)混合,必須去掉。各種濃度的酒精需要讓標(biāo)本脫水。用過(guò)固定劑后的標(biāo)本,放在 20-40% 的酒精里,逐步增加濃度,每次增加 10-15% 直到標(biāo)本放到純的酒精里。你可根據(jù)下面的說(shuō)明,自己準(zhǔn)備不同的濃度;保持溶液瓶口封閉,因?yàn)榫凭湛諝馑?,而分解?/font>
當(dāng)一個(gè)濃度的酒精固定的混合物時(shí),能把標(biāo)本直接轉(zhuǎn)到同一濃度的酒精里。所有的步驟應(yīng)該在體積為標(biāo)本體積的 50-100 液體里。個(gè)別步驟可在觀察瓶里或淺盤里,蓋一層玻璃盤。
標(biāo)本是逐步的轉(zhuǎn)移或別的固定的吸管和然后移到下一個(gè)濃度,必須做完全。禁止吸管吸取任何標(biāo)本,可用放大鏡在吸管尖部看。
標(biāo)本通過(guò)此種方式,通過(guò)一系的酒精濃度,直到酒精濃度為 70% ,可浸 1 ~ 2 天。當(dāng)然,必須是密閉的。標(biāo)本不能染色,繼續(xù)直到到達(dá)濃度為 100% 的酒精。濃度超過(guò) 60% ,異丙醇酒精是最好的,因?yàn)樗幏坑羞@種濃度。稀釋為需要濃度,純的乙醇是無(wú)水的,但僅專業(yè)地應(yīng)用或用于開藥;即使你從批發(fā)商買,也是太貴了。
從這個(gè)純的異丙醇里,把標(biāo)本轉(zhuǎn)移到混合二甲苯里,必須換一次。浸洗后,準(zhǔn)備三個(gè)干凈的載片,中間滴上幾滴樹脂。現(xiàn)在魚的標(biāo)本取離混合二甲苯,移到三個(gè)滴有樹脂的載片上,用解剖針排列它們,然后用一個(gè)干凈的蓋片封閉它們,注意,避免氣泡。讓這個(gè)切片烘干,安靜,無(wú)塵作用幾小時(shí)到幾天。
厚的載片,里面的樹脂可能起皺,可能弄破。那樣的話,加更多的中間材料在蓋片邊緣,在以后的幾天加幾次。然后,如果皺紋停止,在載片和蓋片邊緣用浸有二甲苯的布擦去過(guò)量的樹脂。
現(xiàn)在這個(gè)載片用兩個(gè)不干膠標(biāo)簽貼在切片左邊和右邊。必須給出的下面的信息:
一端:固定劑,染色,染色物質(zhì),拉丁名
另一端:來(lái)源(如是寄生蟲,給出寄生部位),制作日期。
這個(gè)干的玻片現(xiàn)在能編號(hào)和水平儲(chǔ)存在載片盒里。這個(gè)描述解剖的卡片給出相應(yīng)的編號(hào)然后列檔。因此這個(gè)載片和卡片是相交索引,總是有用的。
有許多染色理論。最簡(jiǎn)單的理論就是讓標(biāo)本容易在顯微鏡下看到。兩次染色顯示內(nèi)部器官一種顏色,周圍組織為另一種顏色。染色程序依靠固定劑的使用和染色。如果固定劑含有酒精,然后,標(biāo)本能直接進(jìn)入染色會(huì)溶解在酒精里。
但是,如果,染色溶解在水里,那么標(biāo)本不得不返回,通過(guò)一系列酒精濃度,直到用純蒸餾水的沖洗。染色后,標(biāo)本必須通過(guò)酒精系列,在通過(guò)二甲苯之前,然后包埋,用蓋玻片密封。
如果這個(gè)標(biāo)本仍然太長(zhǎng)在染色液里,過(guò)渡染色的點(diǎn)會(huì)變得透明,然后,過(guò)量的染色通過(guò)溶液溶解,這個(gè)程序叫分化。然后,這個(gè)標(biāo)本能 connterstained 或在一系列酒精里失水,浸泡在二甲苯里,然后包埋在塑料里。
這次給以后留下標(biāo)用于染色有多久和一系列的酒精的一般價(jià)值,可以通過(guò)你的經(jīng)驗(yàn)和標(biāo)本的大小確定。
如果切片保存超過(guò)幾周,那么蓋片和載片必須密封。搪瓷或蟲膠可用于密閉。用小刷子,刷這個(gè)蓋片的邊緣,重復(fù)這種方法,看上去蓋片好象嵌在載片上,沒(méi)有留下裂口。這個(gè)切片然后可以長(zhǎng)久保存。
微生物的制片對(duì)于顯微鏡學(xué)家來(lái)說(shuō)是一個(gè)令人有趣的活動(dòng),隨著時(shí)間的延長(zhǎng),收集的有價(jià)值的切片可以和新制作的切片相比較。你將練習(xí)此技術(shù),用容易的標(biāo)本,因此當(dāng)有稀有寄生蟲出現(xiàn)時(shí),你不會(huì)姑息它。
11.8 標(biāo)本細(xì)節(jié)準(zhǔn)備( E1-E10 )
無(wú)論是誰(shuí)想收集魚和別的生物的寄生蟲必須有基本的化學(xué)劑和染色材料。這些必須品包括:
1L 家用酒精
100ml甘油酸
1L 蒸餾水
100ml100%的醋酸
1L100 異丙醇
100ml25%HCl
250 ml35-40% 福爾馬林
100 ml甲基蘭
250 ml 二甲苯
100 ml alcoholic borax carmine
250 ml 乳酸
5-10g甲基綠
各種包埋物質(zhì)
紫膠或搪瓷用于封閉蓋片邊緣
細(xì)菌染色劑:如碳酸品紅;碳酸龍膽紫 1 ∶ 2 ∶300和品紅液。100ml量筒,1ml量筒。
首先,準(zhǔn)備酒精。開始用94%的乙醇,制30%酒精,加30ml 原酒精到量筒里,棄蒸餾水到 94 ml 。制60%酒精,加60ml原酒精和34ml蒸餾水,制成94ml液體。用此程序,我們準(zhǔn)備30%,40%,50%和60%的酒精濃度,用原酒精。保存這些酒精,每個(gè)貼上標(biāo)簽。
高濃度的酒精制備用100%乙醇。加70ml乙醇,充滿小到100ml。用這個(gè)程序,我們制成70%,80%,90%,95%和100%的濃度酒精。
下一步,是準(zhǔn)備固定液(E1),以使寄生蟲能保存幾年,加100ml原酒精(94%乙醇),加30ml福爾馬林,5ml醋酸,和200ml蒸餾水,然后充分混合,再密閉保存。
節(jié)肢動(dòng)物,如甲殼類動(dòng)物,小蟲,昆蟲和昆蟲蚴蟲固定可用90%酒精和10%乳酸(E2),它們能貯存幾周。標(biāo)本被送進(jìn)有這些液體的旋口瓶,隔絕空氣,讓專家作診斷。
11.8.1Permanent Mounrs in Polyvinyllactophenol(PVL)(E3)
這個(gè)標(biāo)本固定必須首先移到純的醋酸里,然后在放入PVL里,接下來(lái)讓標(biāo)本通過(guò)4個(gè)濃度的醋酸和酒精混合物
第一步+25%醋酸+75%酒精
第二步+50%醋酸+50%酒精
第三步=80%醋酸+20%酒精
第四步=100%醋酸
因?yàn)榇姿崮苊摌?biāo)本的色,這個(gè)標(biāo)本直到半透明時(shí),然后轉(zhuǎn)到PVL,節(jié)肢動(dòng)物仍然需要第一和第二步幾個(gè)小時(shí)。但是,第三和第四,不應(yīng)該超過(guò)3h。要不時(shí)地用放大鏡檢查脫色程序,通過(guò)加標(biāo)本在PVL里打斷。這個(gè)標(biāo)本不要太透明,因?yàn)?,它們減弱光,即使過(guò)多的時(shí),甚至在完成的長(zhǎng)久切片里。圖NO.104就是用此種方法制成的。
另一種可能,從固定劑里把微生物轉(zhuǎn)到醋酸里更適合非柔軟的標(biāo)本。用一些醋酸裝滿一個(gè)量筒,再加一些標(biāo)本固定液。這個(gè)固定液不應(yīng)該超過(guò)醋酸的1/4。這個(gè)微生物會(huì)慢慢地沉入醋酸里,能把它直接轉(zhuǎn)到PVL里。
準(zhǔn)備一大滴PVL在干凈的載玻片上。用解剖針把微生物從醋酸里轉(zhuǎn)到PVL上。蓋上蓋片,當(dāng)制作大的標(biāo)本時(shí),用隔離物以防蓋片壓碎標(biāo)本。水平放置載片,如果需要,每天多加一些PVL在蓋片邊緣。到第三天,直到最后加的PVL干了以后,用小夾刀,刮去嵌入的物質(zhì),密封蓋片。如果你變得太久,可能會(huì)出現(xiàn)皺紋。水蚤和小昆蟲能制成很好的切片。
11.8.2 用加拿大香脂或Entellom制切片(E4)
此方法適合于絳蟲和節(jié)肢動(dòng)物。絳蟲有時(shí)易破和起皺折,因此用此種方法,必須非常小心的處理。
用方法E1,把寄生蟲從魚體移去固定,至少24h,雖然它們能保存幾個(gè)月。如果標(biāo)本要染色,需要酒精+HCl,簡(jiǎn)單制備如下:70%酒精(純的乙醇或異丙醇,不是甲醇),加2mlHCl。
制作程序如下:
1 .用方法E1至少固定24h
2 .移到 40% 酒精中浸泡 2h
3 .移到 50% 酒精中浸泡 10 分鐘
4 .移到硼砂洋紅色浸 2-5d ,通過(guò)厚的部分
5 .移到 50% 酒精中,浸泡 30 分鐘
6 .移到 60% 酒精中,浸泡 10 分鐘
7 .通過(guò)厚的部分,用酒精和 HCl 脫色 1-10h
8 .移到 70% 酒精中作用 20 分鐘
9 .移到 80% 酒精中作用 10 分鐘
10 .移到 90% 酒精中作用 10 分鐘
11 .移到 95% 酒精中作用 15 分鐘
12 .移到 100% 酒精中作用 15 分鐘和機(jī)會(huì)一次。
如果當(dāng)標(biāo)本在 100% 酒精轉(zhuǎn)到混合二甲苯時(shí)出現(xiàn)皺紋,接著做下面的步驟:
13 .轉(zhuǎn)到 75% 酒精 +25% 混合二甲苯,浸泡 15 分鐘
14 .轉(zhuǎn)到 50% 酒精 +50% 混合二甲苯,浸泡 15 分鐘
15 .轉(zhuǎn)到 25% 酒精 +75% 混合二甲苯,浸泡 15 分鐘
16 .轉(zhuǎn)到 100% 混合二甲苯中浸泡 25 分鐘
17 .在樹脂里封埋。
厚的蠕蟲和大的節(jié)肢動(dòng)物在二甲苯里浸的時(shí)間要長(zhǎng),厚達(dá) 2h 。如果標(biāo)本里轉(zhuǎn)移到光下時(shí)突然變黑或白色反射光,包含在樹脂里時(shí),應(yīng)必須更仔細(xì),準(zhǔn)備混合物 10% 樹脂和 90% 混合二甲苯在小盤子里。放標(biāo)本在盤子里面,直到二甲苯蒸發(fā),留下的是糖漿介質(zhì)?,F(xiàn)在可以封埋了。另一種方法是,刺穿這個(gè)標(biāo)本,浸在二甲苯里, 3 到 4 次;用一個(gè)好的針?,F(xiàn)在樹脂能浸透到標(biāo)本里,且標(biāo)本仍然清晰,如果這些建議沒(méi)有產(chǎn)生清澈的或透明的標(biāo)本,然后用方法 E3 或 E5 ,實(shí)習(xí)時(shí)可用小的蠕蟲、水蚤和別的容易獲得的微生物。
11.8.3 甘油明膠制片 (E5)
這是一個(gè)非常精致的制標(biāo)本的方法。適合于所有用 E3 和 E4 起皺紋的標(biāo)本或脫色太多的標(biāo)本。用方法 E1 固定 24h ,然后用 50% 酒精沖洗 2h 。轉(zhuǎn)到 60% 的酒精中浸 15 分鐘。然后用硼砂洋紅染色 1-3d 。以后,回到 60% 酒精里。如果染色太敏感或太深,然后能被區(qū)分或用酒精 +HCl 清洗,然后用 70% 的異丙醇酒精沖洗 1h 。然后,仍然每個(gè)步驟作用 15 分鐘( 80% , 90% , 95% 和 100% 異丙醇酒精)。為了更進(jìn)出口步的準(zhǔn)備,你需要 95ml 異丙醇酒精( 100% )加 5mg 甘油,儲(chǔ)存在密閉瓶里。倒大約 5ml 地混合物到淺皿里,放這個(gè)標(biāo)本在里面,放在暖和的地方,無(wú)塵。異丙醇酒精將揮發(fā),在幾小時(shí)到幾天內(nèi),這個(gè)標(biāo)本在純的 glycerin 里。這個(gè)時(shí)間可以通過(guò)表面部分的蒸發(fā)或部分的覆蓋而調(diào)整。器皿是凹底是非常好的,因?yàn)闃?biāo)本都聚集在最升的點(diǎn)。
現(xiàn)在這個(gè)標(biāo)本能直接從無(wú)酒精的甘油轉(zhuǎn)到有動(dòng)物膠的載片上封埋。用小刀或刮刀,挑一滴動(dòng)物膠到載片上。加熱載片。當(dāng)這個(gè)甘油明膠溶化后,不要立刻包埋這個(gè)蠕蟲,直到明膠冷卻下來(lái)時(shí)。然后用解剖針從明膠轉(zhuǎn)到載片上,且放它們?cè)诟视兔髂z里。如果當(dāng)你取蓋片時(shí),動(dòng)物膠粘性太強(qiáng),你可先加熱載片。讓這個(gè)載片水平放置,直到動(dòng)物膠凝固。刮去多的材料,封閉蓋片邊緣。此封閉工作在接下來(lái)的幾天必須重復(fù)。作為練習(xí),可用來(lái)至土壤里的小線蟲,蠕蟲或來(lái)至動(dòng)物食物里的微蠕蟲。
11.8.4 鞭毛蟲和纖毛蟲的染色固定
在鞭毛蟲和纖毛蟲能辨別區(qū)分之前,它們必須被固定,那樣細(xì)胞形狀,細(xì)胞核;和鞭毛就能辨認(rèn)。甲基綠福爾馬林液適合于此染色。制工作液,加 0.1g 甲基綠和 80ml 蒸飭水到棕色或琥珀瓶里,密閉。輕輕搖動(dòng),分解染料,然后加 20ml 福爾馬林( 30% 到 40% )。當(dāng)所有的成分都混合后,此溶液就準(zhǔn)備好了,可以用了。
作為細(xì)胞核染色,洋紅酸是適合于許多鞭毛蟲,雖然它們破壞這個(gè)鞭毛蟲。
我們通常采用新鮮樣品制備,包括腸道內(nèi)容物,膽汁或皮膚涂片。首先我們舉著載片,去掉所有的固體,厚的組織殘余。然后加一些生理鹽水,蓋上蓋片。如果制片太厚,仍然直到水蒸發(fā),減少內(nèi)部的空間或間隔。然后加一些甲基綠福爾馬林在蓋片邊緣,然后在 200 到 300 倍下觀察,鞭毛的死亡。當(dāng)液體在載片上停止旋動(dòng)以后,搜尋單獨(dú)的標(biāo)本在高倍下觀察。
作為均勻分布的染色液,一滴滴液體包含了鞭毛蟲,或者別的皮膚涂片有非常少的水,在載片上。下一步,滴一滴甲基綠福爾馬林液或洋紅酸大約鞭毛蟲滴大小 1/4 的一半。用解剖針迅速混合兩滴液體,然后蓋上蓋片。然后在中等鏡下觀察,可看到鞭毛蟲,然后在高倍下觀察。由于此種方法固定原生動(dòng)物將會(huì)不能保存,最好作個(gè)圖或至少有一個(gè)標(biāo)本的略圖。
甲基綠福爾馬林液染血液細(xì)胞和皮膚細(xì)胞成藍(lán)綠色,而細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)暗綠色。如果細(xì)胞染成深綠色,需要用太多的染色液。
洋紅酸染細(xì)胞核是紅色和細(xì)胞質(zhì)品紅色。
11.8.5 細(xì)菌染色
細(xì)菌染色需要酒精噴嘴,一個(gè) Bunsen 噴嘴,或丙烷手電筒,和染色架或建線的支架。這個(gè)支架高應(yīng)足夠下面的火焰加熱,上面的支架應(yīng)足夠 3 或 4 個(gè)載片挨著放著。這個(gè)支架應(yīng)比上面的載臺(tái)寬;那樣具有穩(wěn)定性。可看圖 117 。
染色不易從常用的器具上洗掉,不應(yīng)把它倒在水溝里或廁所里。用過(guò)的染色劑放在密閉瓶里,放它們?cè)谔貏e的垃圾收集箱里。
外行人不能完全辨認(rèn)細(xì)菌,需要在特別培養(yǎng)基里培養(yǎng)。這個(gè)菌落的大小,顏色和別的特征需要專家才能認(rèn)識(shí)。但是,留心的顯微鏡觀察者能辨別出細(xì)菌,且能決定用何種抗生素治療它們。鑒于此,你必須注意大小和細(xì)菌的活動(dòng)。細(xì)菌的大小決定了以后的固定和染色。
現(xiàn)在從含有細(xì)菌的液體里制涂片。對(duì)于準(zhǔn)備的器官,取一小點(diǎn)組織,用兩個(gè)干凈的載片壓碎。然后,帶一個(gè)干凈的載片,壓它在前面的載片上;再用另一個(gè)載片壓同上壓到載片上。你現(xiàn)在有 4 個(gè)非常薄的壓片。(結(jié)核孢囊也能用此種方法),這 4 個(gè)載片放在空氣中約 2h ,讓它干燥。然后,它們必須加熱固定。
加熱固定載片時(shí),拿著載片,標(biāo)本在一旁,在拇指和食指之間,通過(guò)火焰 3 次。這個(gè)載片必須感覺(jué)到熱,但是不要靠得太近,燒著了你的手。這個(gè)載片現(xiàn)在準(zhǔn)備好了。
11.8.6 革蘭氏染色( E7 )
取一個(gè)或更多的固定載片,把它們放在染色臺(tái)上,進(jìn)行革蘭氏染色程序。這個(gè)載片必須水平放置以使染色劑不會(huì)跑掉。這個(gè)時(shí)期給出圖表說(shuō)明,可以通過(guò)你的自己經(jīng)驗(yàn)。當(dāng)你倒染色劑時(shí),用這個(gè)鑷子,不要用手(因?yàn)槿旧珓?huì)深深地染了你的皮膚)。拿著這個(gè)載片直到龍膽汁液完全覆蓋切片。 3 分鐘后,讓染色劑去掉。
要盡可能的迅速,滴一些 KI 液,讓染色去掉,可多加一些。讓它作用 80 秒。去掉后,沖洗載片 60 秒在裝有 94% 酒精的容器里。用過(guò)濾紙或吸水紙吸去載片上的水滴。然后讓它水平放置幾分鐘。
現(xiàn)在品紅液作用 80 秒。用水完全清洗后,空氣晾干涂片,加一滴樹脂,然后,蓋上蓋片。涂片和蓋片之間的空間要小,那樣你能用油鏡。如果你 lyquify the balsam 用 1/3 二甲苯,那蓋片和載片之間的空間就非常小了。
G+ 細(xì)菌出現(xiàn)藍(lán)染色而 G- 菌出現(xiàn)紅色。這種染色是因?yàn)?/font>G+ 菌保持了紫色在酒精里,而 G- 菌失去了紫色,而有品紅變成了紅色。但是,如果這個(gè)辨別進(jìn)行得太長(zhǎng),甚至 G+ 菌也會(huì)失去它們的顏色。
11.8.7Zieht-Neelsen Stain(E8)
此種染色需用于區(qū)別結(jié)核菌。如果你不能確定組織里的胞囊是結(jié)核菌還是魚醉菌。你可以用此種染色,可使你看到結(jié)核桿菌。
成熟的孢囊常不會(huì)包含有任何細(xì)菌,因此幾個(gè)孢囊必須一起壓片。
放自然干燥的載片和加熱固定的標(biāo)本在染色臺(tái)上,用品紅液完全掩沒(méi)染色?,F(xiàn)在加熱載片直到有煙氣從染色劑里升直。在任何情況下,溶液必須沸騰。酚的氣味是有毒的,因此操作時(shí),必須打開窗子。通過(guò)加熱,保持煙氣 3 分鐘。再裝滿一些蒸發(fā)的染液干燥。然后讓載片冷卻 1 分鐘,再洗掉染液。用酒精和 HCl 完全清洗(看 11.8.2 )。然后再用水沖洗。用甲基蘭液與蒸餾水配 1 : 5 的比例,染色 3 分鐘。沖洗掉染液用蒸餾水,在空氣中晾干。加一滴稀釋的樹脂再蓋上蓋片。
結(jié)核細(xì)菌會(huì)呈現(xiàn)紅色,而別的細(xì)菌和組織碎片會(huì)顯示蘭色。為了制長(zhǎng)久的切片,可以在干燥后清洗載片,并用蓋片密封。
11.8.8 單獨(dú)細(xì)菌的染色( E9 )
細(xì)菌可以用品紅液和用甲基蘭迅速和深度染色。這些程序都相同的。不幸的是,這個(gè)組織碎片也會(huì)染色,因此一些細(xì)菌出現(xiàn)模糊。這個(gè)程序如下:
1 .空氣曬干涂片 1-2h
2 .加熱固定
3 .滴一滴品紅液或甲基蘭作用 5 分鐘
4 .沖洗
5 .空氣曬干
6 .用稀釋的樹脂包埋
在 300 到 600 倍下鏡檢。
11.8.9 粘膜和皮膚染色( E10 )
皮膚、血液和許多壓片不是非常明暗差別強(qiáng)烈的標(biāo)本。任何寄生蟲在里面是容易辨認(rèn)的,雖然組織結(jié)構(gòu),細(xì)胞壁和細(xì)胞不會(huì)非常明顯。如果你想看更多的細(xì)節(jié),你必須染色標(biāo)本。甲基蘭是適合的,以 1 : 5 稀釋,保存在密閉的瓶里。
加一些染液到載片上的水里或血液里,然后等一分鐘再蓋片。去掉蓋片邊緣多出的污點(diǎn)。細(xì)胞核染色比細(xì)胞質(zhì)深,染色少的顏色淺。為了染色深,再一些染色劑在標(biāo)本上,而不加水,血液涂片用此種方法顯示如圖 NO.40 。纖毛蟲染色也用此種方法。
11.9 作為存檔的照相
任何一個(gè)顯微鏡學(xué)家在顯微鏡下讓他感興趣的東西,他都會(huì)想將它們保存下來(lái)。因此才產(chǎn)生顯微照相。另一個(gè)原因是你還不能肯定,一旦你對(duì)一個(gè)好標(biāo)本進(jìn)行隔離和制作你正在觀察的發(fā)標(biāo)本不會(huì)被新載玻片損壞。然而正是那些稀有標(biāo)本最容易丟失。另一方面,典型的照片對(duì)診斷也很有幫助。許多標(biāo)本制作和貼片都很困難,所以照相就成了鑒定病變的唯一途徑。
照出一張好的顯微照相并不需要一種特殊的照相機(jī)。任何一個(gè)具可變鏡頭的單鏡頭照相面都可以。其光源非常重要。要照出好的照片需要較強(qiáng)的光源和 Koehler 光照系統(tǒng),在序言中你可看到關(guān)于如何打開顯微鏡 Koehler 光。制片做的不好不可能照出好的照片來(lái)。電力越高,標(biāo)本切片越薄因?yàn)樵诜糯舐试黾訒r(shí),焦距準(zhǔn)確度下降。
照相機(jī)機(jī)身和機(jī)殼經(jīng)顯微轉(zhuǎn)接器(各種類型在市場(chǎng)上都有售)與視覺(jué)窗口相聯(lián)接。例如,一種類型是可滑向顯微管的上面部分。
用照相機(jī)操作有幾個(gè)值得考慮。一般說(shuō)來(lái),任何單鏡反射都是適合照相的,但是,實(shí)際上今天通常僅用建的模型來(lái)曝光。這個(gè)“內(nèi)部測(cè)量?jī)x”模型自動(dòng)決定快門的速度,在一些照相機(jī),甚至?xí)槟阍O(shè)制;而在另一些照相機(jī),你需從刻度發(fā)現(xiàn)和人工調(diào)制曝光。在整個(gè)操作系統(tǒng),因?yàn)橐鶕?jù)物體的光線和黑暗位置是平均值,所以有時(shí)要自動(dòng)的正確調(diào)制。這個(gè)內(nèi)部的計(jì)量系統(tǒng)是用許多現(xiàn)代的照相機(jī)制造的。有一些非新的工具提供了點(diǎn)的計(jì)量,根據(jù)曝光場(chǎng)景中的小點(diǎn)曝光。
有非常好的快門,檢查這個(gè)標(biāo)本和照片的比較,是否有一些嚴(yán)重的模糊。如果,在明視野區(qū)域,這個(gè)標(biāo)本比背景黑,然后必須有正確的位置排列。因?yàn)檫@個(gè)測(cè)量系統(tǒng)是場(chǎng)景光線和暗度的平均值,這個(gè)曝光時(shí)間長(zhǎng)或短需要正確的調(diào)試。這個(gè)依據(jù)因素有兩個(gè):標(biāo)本的大小,標(biāo)本和背景的不同亮度。在亮點(diǎn)曝光時(shí)間長(zhǎng)點(diǎn),在間區(qū)域時(shí)間短點(diǎn)。
和電影的質(zhì)量?jī)H有很小的不同。今天許多照片被制成電影,產(chǎn)生有顏色的幼燈片。 The higher the ASA number 或估計(jì)這些小顆粒放大。影片是在 50-200ASA 是很普通的。非常好的影片有很長(zhǎng)的曝光時(shí)間。許多專業(yè)黑白影片是因?yàn)樵?/font>higher ASA 缺少沙粒相比于彩色影片。
綠色過(guò)濾常用于增加這個(gè)對(duì)照在黑白照片里。
彩色的照片很少依靠這個(gè)影片比依靠彩色過(guò)濾用于顯微鏡。顏色依靠光的溫度。用沒(méi)調(diào)試顯微鏡燈泡,用一個(gè)藍(lán)色過(guò)濾。
一個(gè)強(qiáng)的光源,對(duì)于短時(shí)曝光照相或高的放大是必須的,在大的顯微鏡上安裝一個(gè)低壓燈是足夠低倍鏡觀察的。
在高的放大標(biāo)本,不應(yīng)該移動(dòng),因此滴一些福爾馬林或固定染色( E6 )在蓋片的邊緣,并通過(guò)拿一片吸水紙吸去多余的液體。
在非常高的鏡下,這個(gè)曝光時(shí)間應(yīng)比照相機(jī)自動(dòng)調(diào)制的時(shí)間長(zhǎng),因此你不得不測(cè)試一下快門,調(diào)制一下曝光時(shí)間,直到發(fā)現(xiàn)適合的曝光時(shí)間。好的照片需要放大的倍數(shù),光度,和過(guò)濾和別的因素。
顯微鏡提供一個(gè)鏡子作為圖像,能用幻燈片放出來(lái),然后放一片玻璃在幻燈機(jī)和顯微鏡鏡子之間。印跡紙也適合于分解這些光。
幾乎任何人都能記得電影曝光的這個(gè)細(xì)節(jié),一旦電影準(zhǔn)備好后,和這個(gè)圖片準(zhǔn)備好后,因此必須注明這個(gè)重要的每個(gè)曝光。以后這些數(shù)據(jù)能被轉(zhuǎn)換成這個(gè)框架。但是,最好,注明這些信息在卡片上,為了配合每個(gè)成功的卡分,這個(gè)彩色的幻燈片和卡分的數(shù)字相同,和任何保存的切片標(biāo)本。片片系統(tǒng)有以下信息:
1 .檔案號(hào)
2 .標(biāo)本名稱
3 .照片日期
4 .膠卷號(hào)數(shù)
5 .照片號(hào)數(shù)
6 .膠卷商標(biāo)
7 .膠卷速度( ASA 或 DIW )
8 . Correction factor
9 .顯微放大倍數(shù)
10 .燈的設(shè)置
11 .過(guò)濾器
12 .新華通訊社穎器孔徑設(shè)置
13 .圖解的說(shuō)明
14 .圖鏡倍數(shù)
15 .物鏡倍數(shù)
16 .彩色幻燈片放大倍數(shù)
17 .標(biāo)本大小
18 .別的幻燈片注明
同樣的卡片號(hào)指出所有的信息在特別標(biāo)本上,使收回容易。
當(dāng)送任何彩色的幻燈片或彩色或黑白照片,給出標(biāo)本確切的大小,而不是顯微鏡放大倍數(shù)。
作者: lzm_001 時(shí)間: 2011-7-4 17:04
那么多,辛苦了,不容易啊。
作者: huangjiey_2000 時(shí)間: 2011-8-1 12:20
辛苦辛苦!支持支持
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