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19樓

發(fā)表于 2010-4-14 13:10:58 | 只看該作者

豬支原體肺炎（168株）活疫苗簡介
豬支原體肺炎（168株）活疫苗是由江蘇省農科院獸醫(yī)研究所和南京天邦生物科技有限公司研制申報，經農業(yè)部獸用生物制品規(guī)程委員會審查通過，2006年3月14日被批準為國家二類新獸藥[證號：（2007）新獸藥證字10號]。豬支原體肺炎（168株）活疫苗的研制是三代研究人員智慧與汗水的結晶，實現了多項重大技術突破。
一、病原特點
1．豬支原體肺炎168株分離于1979年甘肅省蘭州市安寧區(qū)豬肺炎支原體強毒株人工感染發(fā)病的168號二花臉豬，經3次克隆化培養(yǎng)，無細胞培養(yǎng)340代次，人工致弱為弱毒菌株，何正禮、金洪效、邵國青等三代科研人員深入研究，并通過大量的實驗室與臨床試驗，證明168株安全性穩(wěn)定，同時具有良好的免疫原性。
2．通過基因特征的研究完成了168弱毒株的生物標記，邵國青等（1998）以SDS-PAGE比較168弱毒株與強毒株及模式株蛋白組成的差異，以脈沖場電泳檢測弱毒株染色體的分子量，同時克隆了168株P46基因，通過測序分析和RAPD試驗，探討弱毒株的變異規(guī)律。結果表明，經過漫長的致弱過程，豬肺炎支原體的毒力基因發(fā)生了改變，168弱毒株具有其獨特、穩(wěn)定的基因特征，通過分子基因手段標記的“豬肺炎支原克隆致弱株”于2000年2月5日獲得國家發(fā)明專利（專利號：ZL99114276.4）。
3．獨特的無細胞培養(yǎng)技術最終克服了支原體疫苗的生產瓶頸。支原體的培養(yǎng)難度很高，乳兔肺組織苗不可避免地含有較多雜蛋白，而其它同類疫苗多需要采用濃縮手段才能達到所需抗原滴度。1974年金洪效研究員等以變通的Switzer氏培養(yǎng)基（KM2）分離到豬肺炎支原體，在當時被多方采用。這種無細胞的培養(yǎng)技術經多次改變和改進，形成了目前所采用的江蘇Ⅱ號（KM2）培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基適用于支原體疫苗的大規(guī)模生產，并使168株與同類疫苗相比之下具有高純度、高滴度、低價格的特點。
二、豬支原體肺炎（168株）活疫苗的作用機理與免疫機理
作用機理  支原體強毒的早期感染過程，首先是附著在纖毛的上端，導致細胞病變、纖毛萎縮、功能受損，進一步發(fā)展就會破壞黏膜層，導致其他病原菌易于侵入而引起繼發(fā)感染。豬感染肺炎支原體后，大量淋巴細胞在各級氣管周圍以及肺泡中聚集、增生，引起咳嗽或氣喘，肺炎支原體抑制被感染細胞的代謝，溶解破壞肺泡結構與淋巴小結，留下永久性的組織傷痕，表現明顯的肺部實變和免疫抑制。豬支原體肺炎（168株）活疫苗具有特異的占位效應與主動免疫反應，形成了抵御強毒支原體感染的堅強堡壘。
占位效應  無論是強毒疫苗株還是弱毒疫苗株都只能粘附在氣管、支氣管、肺泡等上皮細胞表面的受體上，而不進入組織和血液。仔豬在出生后5~7天還不會自然感染肺炎支原體，活疫苗弱毒株通過肺內注射直接到達肺泡黏膜表面，在肺泡細胞表面形成優(yōu)勢占位，借助黏膜蛋白等營養(yǎng)物質大量繁殖，最終占據肺泡表面所有可占用的空間（大約需1~2周時間），這個過程同時伴隨機體發(fā)生局部黏膜免疫、細胞免疫和體液免疫。此時，如果仔豬再次吸入感染肺炎支原體野毒，肺泡表面已缺乏可占據的空位，同時被抗體中和、淋巴細胞吞噬或衰竭而死，從而大大減少氣喘病的發(fā)生幾率。
免疫機理  支原體的免疫反應可以分為三種，即體液免疫（循環(huán)抗體）、局部黏膜免疫（分泌型IgA）以及細胞免疫。疫苗通過肌肉注射，也可產生較高的循環(huán)抗體水平。但從有效防治氣喘病的角度來說，僅有較高的循環(huán)抗體水平還是遠遠不夠的，還必須對靶器官如呼吸道和肺部進行重點免疫保護，因為循環(huán)抗體很難有效到達這些靶器官，所以還必須依賴針對靶器官的局部黏膜免疫和細胞免疫。經研究證明豬支原體肺炎（168株）活疫苗能同時刺激產生三種免疫效應，有效預防豬的氣喘病。
凈化效應  雖然滅活疫苗免疫和藥物治療對豬支原體肺炎控制有一定效果，但豬肺炎支原體具有免疫逃避、慢性感染、反復發(fā)病的特性，所以實現豬場凈化難以實現。支原體活疫苗同樣具備免疫逃避和反復感染的特性，長期免疫可形成豬群和環(huán)境的弱毒菌群優(yōu)勢，通過弱毒菌株的競爭與占位逐步達到強毒菌株的凈化，是豬場長期、持續(xù)免疫支原體肺炎（168株）活疫苗的最終目的和必然結果。
三、疫苗特點
1、免疫效力堅強而持久，只需正確接種1次，便可在2周內產生保護力，1個月抗同群感染，2個月抗強毒感染，免疫期可達9個月；
2、安全性更好，采用獲國家專利的豬肺炎支原體克隆致弱株及無細胞培養(yǎng)技術，疫苗純度高，較乳兔肺組織苗更安全；
3、相對進口滅活疫苗具有更高的性價比，在長期使用中會給養(yǎng)殖場創(chuàng)造出更高經濟效益。
四、使用方法
1、豬只在未感染肺炎強毒的時候免疫效果較好，建議5~15日齡時仔豬免疫1頭份?；钜呙绮捎脽o細胞培養(yǎng)基技術培養(yǎng)，還可以通過鼻腔免疫接種，為大豬特別是母豬免疫提供了方便，建議在母豬進產房時噴鼻免疫。
2、接種時需采用肺內注射，使用疫苗配套的專用注射針頭，從肺臟所處位置的中間部位的肋間隙垂直進針注射（初次操作可按右側肩胛骨后緣沿中軸線向后2~3肋間，垂直進針是指入針方向與豬體皮膚之間的角度為90°），每只小豬換一個針頭。使用時按瓶簽注射頭份，用滅菌生理鹽水稀釋，每頭豬注射0.5~1毫升。
3、免疫前后1~2周禁用抗支原體藥物（如土霉素、壯觀霉素、卡那霉素、林肯霉素、泰樂菌素等）和飼料添加劑；作用于細胞壁或非敏感藥物（如青霉素、阿莫西林、羥氨芐青霉素、頭孢菌素II、磺胺二甲氧嘧啶、鏈霉素、多粘菌素等）可正常使用。

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