仔豬免疫保護(hù)機(jī)制及早期斷奶對(duì)仔豬免疫機(jī)能的影響

zhaoyuyong

仔豬免疫保護(hù)機(jī)制及早期斷奶對(duì)仔豬免疫機(jī)能的影響
 摘要：從仔豬免疫保護(hù)機(jī)制的結(jié)構(gòu)，功能特點(diǎn)出發(fā)，分析了早期斷奶對(duì)仔豬免疫機(jī)能的影響，為乳豬料的開(kāi)發(fā)和免疫調(diào)節(jié)劑的應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。?關(guān)鍵詞：早期斷奶；仔豬；免疫?
 仔豬免疫系統(tǒng)特別是來(lái)自母源的被動(dòng)免疫在仔豬早期抵抗外來(lái)病原的侵害中發(fā)揮重要作用。然而3周齡以后仔豬獲得的被動(dòng)免疫處于最低水平，自身免疫系統(tǒng)要到4～5周齡才開(kāi)始發(fā)揮作用。因而3～4周齡的早期斷奶正是仔豬抗病力相對(duì)較低的時(shí)期。早期斷奶不僅中斷了母源免疫因子的提供，而且會(huì)造成仔豬自身循環(huán)抗體水平下降，抑制細(xì)胞免疫能力，從而引起仔豬抗病力下降。這是造成仔豬斷奶后出現(xiàn)的采食量下降，飼料利用率低，腹瀉等所謂“仔豬早期斷奶綜合癥”的重要因素之一。?1 仔豬的免疫機(jī)制?1.1 仔豬的非特異性免疫1.1.1 結(jié)構(gòu)屏障 仔豬抵抗外來(lái)病原微生物感染的“結(jié)構(gòu)屏障”包括體表屏障和內(nèi)部屏障。體表屏障由覆蓋在體表的皮膚及與外界相通的腔道內(nèi)襯著的粘膜構(gòu)成，是機(jī)體防御微生物的第一道防線(畢愛(ài)華，1996)。如小腸粘膜上皮不僅具有消化吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的功能同時(shí)也是一道抵抗有害物質(zhì)(包括細(xì)菌、病毒、病原體、變應(yīng)原大分子物質(zhì)等)的重要屏障(Kato等，1994)。仔豬內(nèi)部屏障主要是血腦屏障，它能阻止血液中的病原微生物及其他大分子物質(zhì)進(jìn)入腦組織和腦室，從而保護(hù)中樞神經(jīng)系統(tǒng)。此外，消化道的蠕動(dòng)和呼吸道粘膜纖毛的運(yùn)動(dòng)不僅對(duì)腸腔內(nèi)微生物有機(jī)械清除作用，而且還可以阻止微生物粘附到粘膜上，粘膜上皮的定期脫落更替降低了各種微生物建群的機(jī)會(huì)。?1.1.2 化學(xué)屏障 呼吸道和消化道各器官分泌的各種分泌物(含有溶菌酶、補(bǔ)體、天然抗體等)構(gòu)成了仔豬抗感染的“化學(xué)屏障”。如仔豬口腔中的唾液(主要含有溶菌酶)可殺死多種病原微生物，胃分泌的胃酸和胃蛋白酶能破壞日糧抗原并能有效抑制多種微生物從口咽進(jìn)入小腸，而進(jìn)入小腸的某些微生物對(duì)小腸中的膽汁也非常敏感；另外，胰液中的蛋白酶可破壞細(xì)菌細(xì)胞膜。腸道杯狀細(xì)胞分泌的粘液既可保護(hù)脆弱的腸上皮免受機(jī)械損傷，又可作為一種粘性基質(zhì)來(lái)包栽抗原物質(zhì)使其更易被胰和上皮細(xì)胞分泌的酶降解(Gaskins,1999)；此外，粘液可以保護(hù)上皮免受腸道菌群分泌的消化酶的破壞和阻止病原體侵入上皮(Nevtre等，1987).1.1.3 生物屏障 腸道中的大量正常菌群又被稱(chēng)為“生物屏障”。Hentges等(1983)認(rèn)為正常菌群的主要作用是阻止入侵微生物在腸道中建群。Gaskin等(1996)報(bào)道認(rèn)為正常菌群可刺激粘膜和全身免疫機(jī)制的發(fā)育從而增強(qiáng)機(jī)體免疫。正常菌群分泌的各種抗菌物質(zhì)如細(xì)菌素能抑制某些厭氧菌和革蘭氏陰性菌定居和繁殖。此外，正常菌群與病原微生物在建群點(diǎn)，營(yíng)養(yǎng)等生存條件上存在的競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，也在一定程度上抑制了病原微生物的生長(zhǎng)發(fā)育和繁殖。?1.1.4 吞噬細(xì)胞，自然殺傷細(xì)胞及體液中的抗菌物質(zhì) 仔豬血液中的吞噬細(xì)胞(部分來(lái)自母乳)包括中性粒細(xì)胞和單核/巨噬細(xì)胞。中性粒細(xì)胞在機(jī)體防御細(xì)菌感染中具有重要作用。中性粒細(xì)胞中的殺菌/滲透增強(qiáng)蛋白(BPI)不僅對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌具有廣譜抑制和殺傷作用，而且具有中和細(xì)菌內(nèi)毒素，抑制細(xì)胞因子釋放和抵御內(nèi)毒素致死效應(yīng)等作用(柯巖等，1998)。自然殺傷細(xì)胞(NK細(xì)胞)可產(chǎn)生干擾素，發(fā)揮細(xì)胞毒作用而殺傷感染細(xì)胞。此外，體液中的補(bǔ)體、溶菌酶干擾素及Tuftsin都發(fā)揮重要的非特異性免疫作用(畢愛(ài)華，1996)。?1.1.5 乳源非抗體保護(hù)蛋白 豬乳鐵蛋白(Loctoferrin,LTF)是母乳中一種非抗體保護(hù)蛋白，是新生仔畜轉(zhuǎn)運(yùn)鐵離子并作為母畜乳腺及新生仔畜腸道的一種防御屏障，此外，還具有調(diào)節(jié)非特異性免疫，促進(jìn)粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞有絲分裂等功能(鐘發(fā)剛等，1999)。?1.2 仔豬特異性免疫?1.2.1 仔豬自身特異性免疫系統(tǒng) 仔豬免疫系統(tǒng)由中樞免疫器官和外周免疫器官組成。仔豬中樞免疫器官包括骨髓和胸腺，它們是仔豬淋巴細(xì)胞等免疫細(xì)胞發(fā)生、分化和成熟的場(chǎng)所。仔豬外周免疫器官是成熟T、B淋巴細(xì)胞定居，增殖和對(duì)抗原制激進(jìn)行免疫應(yīng)答的場(chǎng)所，包括肝臟、腺臟、淋巴結(jié)和粘膜相關(guān)淋巴組織(Mucosal?associated lymphatic tissue MALT)。其中以消化道相關(guān)淋巴組織(Cut?associated lymphatic tissue,GALT)的作用最為重要。如腸道粘膜分泌的分泌型IgA(Secretary IgA,S?IgA)在仔豬粘膜局部免疫和抗感染中發(fā)揮至關(guān)重要的作用，分泌液中的大部分S?IgA主要由消化道和呼吸道等粘膜下彌散分布的淋巴細(xì)胞(IgA和J鏈)和上皮細(xì)胞(Sc)共同形成的(王魁等，1991)。雖然粘膜固有層中有多種免疫球蛋白，但只有S?IgA和多聚IgM能透過(guò)上皮細(xì)胞而進(jìn)入分泌液(Lamn等，1997)。S?IgA的主要功能是防止細(xì)菌附著于粘膜細(xì)胞上(徐光堯等，1996)，因而S?IgA一直以來(lái)被認(rèn)為是抵抗病原微生物粘附并滲透到粘膜的一道十分重要的保護(hù)屏障。而最近的研究結(jié)果表明，S?IgA似乎還具有干擾病毒繁殖的作用(Lamn等，1997)。目前，關(guān)于粘膜免疫的研究逐漸涉及到上皮間淋巴球(Intraepi?thelial lymphocytes,IEL)。上皮間淋巴球在免疫應(yīng)答抑制和損壞或感染上皮細(xì)胞的消除中發(fā)揮重要作用(Cenf?Bensussan等，1991)。IEL一般在仔豬5～7周齡才出現(xiàn)(Stokes等1994)。IEL中的γδT淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生細(xì)胞動(dòng)力素和生長(zhǎng)因子從而影響上皮細(xì)胞分化、增殖、且具有細(xì)胞毒活性而且對(duì)S?IgA的發(fā)育也起著重要作用(Kagnoff,1998;Fujihashi等，1996；Komano等1995)。Boismenu等(1994)報(bào)道小鼠γδT淋巴細(xì)胞在上皮損傷修復(fù)中也扮演重要角色。因而在早期斷奶仔豬時(shí)期由αβT淋巴細(xì)胞和S?IgA介導(dǎo)的粘膜免疫還不完全成熟的時(shí)候，γδT淋巴細(xì)胞擔(dān)負(fù)著非常重要的責(zé)任。?1.2.2 乳源免疫因子 母乳(特別是初乳)是仔豬斷奶前特異性免疫所需免疫細(xì)胞及免疫球蛋白的首要來(lái)源。初乳中免疫細(xì)胞包括兩大類(lèi)：一類(lèi)是吞噬細(xì)胞占總數(shù)的90%，其中中性粒細(xì)胞占40%～80%；另一類(lèi)是淋巴細(xì)胞占總數(shù)的10%，其中，B、T淋巴細(xì)胞各半(Newby,1982)。豬初乳中的淋巴細(xì)胞(經(jīng)腸道轉(zhuǎn)入仔豬體內(nèi)后又經(jīng)淋巴管轉(zhuǎn)運(yùn)到腸系膜淋巴結(jié))可增強(qiáng)仔豬的免疫力(Williams,1993)。初乳中的免疫球蛋白占乳清中總蛋白的60%以上，其中80%為IgG，其次為IgA(單虎等，1998)。初生仔豬由于腸道通透性很大，可以完全吸收初乳中的免疫球蛋白。免疫球蛋白的吸收高峰出現(xiàn)在吮乳后4～12 h，隨后由于“腸道閉鎖”(Gut closure)而迅速降低(Westrom等，1985)。IgG具有防止敗血癥，作為仔豬對(duì)外界刺激免疫反應(yīng)的發(fā)動(dòng)劑和保護(hù)腺組織向仔豬提供被動(dòng)免疫的雙重作用。IgA是一種重要的腸道保護(hù)型抗體(秦加華等，1998)。2 斷奶對(duì)仔豬免疫機(jī)能的影響?早期斷奶仔豬面臨多種應(yīng)激，主要表現(xiàn)為顯著的免疫抑制，其原因是多方面的，如母源有益因子的消失，自身細(xì)胞和體液免疫水平的下降、日糧抗原、采食量低和營(yíng)養(yǎng)吸收不良等都會(huì)使仔豬免疫機(jī)能受到抑制和損害。?2.1 母源有益因子的消失 斷奶對(duì)仔豬免疫機(jī)能最直接的影響就是乳源免疫活性物質(zhì)消失 (失去了被動(dòng)免疫)。另外，初乳和常乳中的乳源生長(zhǎng)因子、激素及其它活性物質(zhì)對(duì)生后仔豬最重要的免疫器官——胃腸道的分化和發(fā)育具有重要作用，斷奶時(shí)，這些因子的突然消失將對(duì)腸細(xì)胞生長(zhǎng)、分化以及細(xì)胞功能的發(fā)育產(chǎn)生負(fù)面影響。促進(jìn)仔豬小腸發(fā)育的乳生生物活性物質(zhì)有表皮生長(zhǎng)因子(epidermal growth factor,EGF)、胰島素(insulin)和類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子(insulin?like growth factor,IGF)，多胺(polyamines)及谷氧酰胺(Glutamine,Gln)。?2.1.1 表皮生長(zhǎng)因子及類(lèi)胰島素生長(zhǎng)因子 豬初乳和常乳中EGF濃度很高，達(dá)到37～107ng/ml(林軍等，1994)。EGF的主要功能是刺激上皮隱窩細(xì)胞增生(Drucker,1997)，還具有刺激胃酸分泌，激活多胺合成第一限速酶鳥(niǎo)氨酸脫羧酶(ODC)活性，促進(jìn)組織修復(fù)等作用(林軍等，1994)。IGF?Ⅰ和IGF?Ⅱ是乳汁中仔豬胃腸道生長(zhǎng)發(fā)育的激素類(lèi)生長(zhǎng)因子。吮乳仔豬可以從母乳中獲得大量的IGF?Ⅰ，IGF?Ⅰ對(duì)正?；驌p傷的腸道細(xì)胞增殖起重要的調(diào)控作用(Drucker1997)。Burrin等(1995)報(bào)道在代乳科中添加IGF?Ⅰ與不添加IGF?Ⅰ相比，仔豬小腸增重28%，空腸絨毛高度增加78%。?2.1.2 多胺 多胺(腐胺、精胺、精脒)及控制其合成的關(guān)鍵酶(ODC)對(duì)出生后仔豬腸道細(xì)胞增生和分化具有重要作用(kelly,1994)。由于新生仔豬的腸細(xì)胞鳥(niǎo)氨酸脫羧酶(ODC)活性很低(Blachier等，1992)。因此乳汁中外源性多胺對(duì)仔豬腸道的發(fā)育意義重大。乳汁中外源性多胺的作用是非特異性的，即作用于損傷細(xì)胞而產(chǎn)生效應(yīng)，同時(shí)也作用于非損傷細(xì)胞，有人認(rèn)為外源性腐胺可抑制或降低豆粕中抗?fàn)I養(yǎng)因子對(duì)小腸粘膜的負(fù)面作用(Gordon,1998)。近來(lái)多胺被認(rèn)為是一種細(xì)胞保護(hù)劑，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)離子平衡，維持細(xì)胞內(nèi)Ca??2+?穩(wěn)定，促進(jìn)細(xì)胞修復(fù)等生理功能(趙東等，1994)。關(guān)于多胺的作用機(jī)理一般認(rèn)為多胺通過(guò)對(duì)DNA、RNA及蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)而發(fā)揮其生理功能(程忠剛等，1998)。但許多報(bào)道認(rèn)為高濃度多胺是有害的。?2.1.3 谷氨酰胺 Gln作為胃腸道粘膜細(xì)胞的特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，具有維持腸粘膜組織結(jié)構(gòu)，提高腸道免疫力，減少胃腸外營(yíng)養(yǎng)(TPN)支持等出現(xiàn)的腸粘膜萎縮和細(xì)菌移位等作用(羅文福等，1993)。Souba等(1988)建議在應(yīng)激狀態(tài)下，谷氨酰胺應(yīng)作為一種保護(hù)腸道代謝、結(jié)構(gòu)和功能的日糧必需成份，如Wu等(1996)報(bào)道在仔豬豆餅—玉米型日糧中添加1%Gln可阻止斷奶后7 d空腸絨毛形態(tài)異常。另外，Gln缺乏能明顯降低腸腔中?S?IgA?含量。Bwrke等(1989)研究報(bào)道接受沒(méi)有加入Gln的全腸外營(yíng)養(yǎng)(Tofal Parenteral Nutrition,TPN)的動(dòng)物膽汁中S?IgA的分泌下降35%。而加入Gln的動(dòng)物膽汁中S?IgA的水平與正常動(dòng)物比較無(wú)差別，腸粘膜漿細(xì)胞計(jì)數(shù)也證實(shí)谷氨酰胺能阻止產(chǎn)生S?IgA細(xì)胞的減少(Alverdy,1990)。Gln還具有增強(qiáng)腸道免疫組織細(xì)胞抗氧化性損傷和改善創(chuàng)傷后免疫功能抑制(楊俊濤等，1999)。谷氨酰胺已被認(rèn)為是一種條件必需氨基酸，它的作用機(jī)理主要是為其它氨基酸、蛋白質(zhì)合成提供氮源，參與機(jī)體還原劑—谷胱甘肽的合成，參與DNA、RNA前體—嘌呤和嘧啶的合成、為免疫細(xì)胞分裂和分泌免疫蛋白提供氮源和能源(羅文福等，1993)。斷奶中斷了外源(母乳)谷氨酰胺的供應(yīng)，而且仔豬斷奶后短期內(nèi)采食量低會(huì)引起Gln攝入不足，因而在斷奶仔豬日糧中添加Gln的研究引起了足夠的重視(NRC，1998；彭健，1999；劉濤、彭健，1999)。?2.2 自身體液和細(xì)胞免疫水平的下降 斷奶會(huì)對(duì)仔豬還不完善的自身免疫系統(tǒng)造成損害。Blecha等(1983)報(bào)道認(rèn)為5周齡以前斷奶會(huì)造成對(duì)仔豬細(xì)胞免疫有害的一系列生理變化：如2周齡和3周齡斷奶仔豬與吮乳仔豬相比，對(duì)皮下注射PHA的應(yīng)答下降32%和16%(P＜0.01)體外淋巴細(xì)胞對(duì)PHA刺激轉(zhuǎn)化率降低。而且斷奶亦會(huì)造成體液免疫中抗體合成減少?gòu)亩鴵p害抗體介導(dǎo)的免疫。Gwazdauskas等(1978)研究了斷奶對(duì)用豬和馬紅血細(xì)胞免疫的牛產(chǎn)生凝集抗體能力的影響，結(jié)果表明斷奶使牛對(duì)異種血紅細(xì)胞免疫后而合成抗體的水平下降。Blecha和welly(1981)做了類(lèi)似的實(shí)驗(yàn)表明斷奶前1 d免疫的仔豬在感染后7～14 d體內(nèi)巰基乙醇敏感凝集抗體滴度下降(P＜0.5)，而且γ?球蛋白的濃度在斷奶時(shí)升高。?2.3 斷奶日糧的改變 斷奶仔豬由吮吸母乳轉(zhuǎn)變到食用固體顆粒料造成仔豬過(guò)敏反應(yīng)，采食量下降，營(yíng)養(yǎng)吸收不良等應(yīng)激反應(yīng)，這些因素也在一定程度上損害了仔豬的免疫功能。?2.3.1 日糧抗原〖HT〗 斷奶使仔豬胃腸道系統(tǒng)遇到來(lái)自飼料抗原物質(zhì)的巨大挑戰(zhàn)。陳代文等(1996)研究了仔豬補(bǔ)充不同類(lèi)型的飼料蛋白質(zhì)對(duì)3周齡斷奶仔豬小腸粘膜形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響，認(rèn)為豆餅造成的損害最嚴(yán)重，玉米?豆餅混合型次之，而乳蛋白引起的損傷程度最輕。大多數(shù)報(bào)道認(rèn)為斷奶仔豬日糧中的大豆蛋白如大豆球蛋白(Phycincin)、β?聚球蛋白(β?Conglycicin)具免疫活性可引起仔豬腸道過(guò)敏反應(yīng)，導(dǎo)致小腸絨毛萎縮、隱窩細(xì)胞增生，血液中抗IgG滴定升高，水分及營(yíng)養(yǎng)吸收不良，腹瀉增加等癥狀。但關(guān)于飼料蛋白質(zhì)抗原引起過(guò)敏反應(yīng)的機(jī)制眾說(shuō)紛紜。現(xiàn)在一般認(rèn)為是混合型過(guò)敏反應(yīng)包括Ⅰ型過(guò)敏反應(yīng)(水分，營(yíng)養(yǎng)吸收不良和腹瀉的原因)和Ⅳ型過(guò)敏反應(yīng)(絨毛萎縮，隱窩增生的起因)(侯永平，周毓平，1996)。然而Hampso等(1986)認(rèn)為抗原性飼料蛋白質(zhì)對(duì)絨毛高度和隱窩深度到底有多大影響還無(wú)法確定。Kenworfhy等(1976)認(rèn)為此種腸道異常變化是飼料抗原和腸道微生物菌群共同作用的結(jié)果。有人認(rèn)為采食量是造成斷奶后仔豬腸絨毛形態(tài)異常的主要原因(Beers?Schrewrs等，1995)。另外，抗原性大豆蛋白對(duì)小腸組織中T、B淋巴細(xì)胞含量、小腸電解質(zhì)的分泌均有重要影響。除了抗原性大豆蛋白外，日糧中還有許多抗?fàn)I養(yǎng)因子如植物凝血素(Lectins)、單寧(fannir)以及α?淀粉酶抑制劑等。?2.3.2 采食量低和營(yíng)養(yǎng)吸收不良 近來(lái)，早期斷奶造成仔豬采食量下降營(yíng)養(yǎng)吸收不良而對(duì)仔豬免疫機(jī)能的影響也引起了重視(高士爭(zhēng)等，1999)，斷奶后仔豬采食量低下且變動(dòng)性極大以及自身消化酶水平的急劇下降而造成仔豬能量和各種營(yíng)養(yǎng)吸收不足。Chandra(1992)報(bào)道認(rèn)為蛋白質(zhì)?能量不足影響許多非特異性免疫機(jī)能，導(dǎo)致組織屏障萎縮、粘液分泌減少、蛋白質(zhì)諸如補(bǔ)體系統(tǒng)組分、轉(zhuǎn)鐵蛋白和干擾素生成量降低，且會(huì)造成T細(xì)胞受損。采食量不僅對(duì)于早期斷奶仔豬免疫力高低至關(guān)重要(蔣宗勇，1994)，而且與斷奶仔豬腸道結(jié)構(gòu)形態(tài)變化密切相關(guān)(Pluske等，1996)。脂肪酸攝入不足會(huì)造成淋巴細(xì)胞萎縮，降低對(duì)T依賴(lài)和非T依賴(lài)抗原的抗體反應(yīng)(陳曉春等，1999)各種維生素及微量元素在仔豬免疫機(jī)能的發(fā)育和功能的發(fā)揮上同樣起著非常重要的作用(徐世文等，1999)。如維生素E在保持仔豬體液免疫和細(xì)胞免疫中起著十分重要的作用。硒，鎂，鐵等微量元素與仔豬自身免疫系統(tǒng)的發(fā)育密切相關(guān)。?3 結(jié)語(yǔ)早期斷奶前后是豬一生中免疫能力相對(duì)較差的時(shí)期。斷奶無(wú)疑是“雪上加霜”。斷奶造成仔豬免疫力下降而給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失是非常巨大的。隨著早期斷奶技術(shù)的推廣，解決這一問(wèn)題越來(lái)越顯得刻不容緩。斷奶仔豬營(yíng)養(yǎng)調(diào)控將面臨巨大的機(jī)遇和挑戰(zhàn)。早期斷奶仔豬免疫調(diào)節(jié)劑及保護(hù)劑具有廣闊的前景。?參 考 文 獻(xiàn)?1 單虎，等.中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào)，1991，18(1)：32～35.?2 劉濤，等.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，18(5)：457～460.?3 陳代文，等.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào)，1996，8(2)：18～24.?4 Boismenu R,et al.Science,1994,266:1253～1255.?5 Blachier F,et al.Biophysical Acta,1992,1175:21～26.?6 Blecha F, et al.J Anim Sci,1983,2:396～404.?7 Blecha,et al.J Anim Sci,1981,vol.53.No 2:439～447.?8 Chandron R K.J nutr,1992,122:597～600.?9 Drucker D J.The American Physiological Society,1997,G3～G6.?10 Gwazdansker F c,et al.Can Vet J,1978,19:150.?11 Hanpson D J.science,1986,21:69～75.?12 Kagnoff M F,et al.The American Physioloqical Society,1998,G455～G458.?13 Lamn M E.Annu Rev micrbiol,1997,51:331～340.?14 Newby T J,et al.Veterinary immunology and immunopathtologty.1982,3:61～94.?15 Soba W W,et al.J Surg Res,1990,48(4)：383～391.?16 Souba W W,et al.J Surg Res,1988,44(6):720～725.?17 Williams P L.Vet.Res,1993,57:1～8.?18 Wu G,et al.J nutr 1996,126:2578～2584.     程學(xué)慧，彭健? (華中農(nóng)業(yè)大學(xué)豬遺傳育種農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室，武漢 430070)

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