（轉(zhuǎn)）:::::益生菌對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)表現(xiàn)、微生物區(qū)系:::::

tony2005428

張振斌, 林映才, 蔣宗勇, 林 勇, 禹慧明

（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所，廣東 廣州 510640）



摘 要：為研究不同益生菌對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)表現(xiàn)、微生物區(qū)系和小腸黏膜絨毛結(jié)構(gòu)的影響，試驗(yàn)選用7 kg杜×(長(zhǎng)&#8226;大）三元雜種斷奶仔豬112頭，按體重、性別、窩別分至如下7個(gè)處理組：（1）對(duì)照組（不添加益生菌）；（2）200×10-6腸球菌制劑組；（3）1 000×10-6腸球菌制劑組；（4）200×10-6乳桿菌制劑組；（5）1 000×10-6乳桿菌制劑組；（6）200×10-6腸球菌與乳桿菌的混合菌制劑組；（7）1 000×10-6腸球菌與乳桿菌的混合菌制劑組。每處理2個(gè)重復(fù)（欄），每重復(fù)8頭豬。測(cè)定斷奶后兩周和試驗(yàn)全期仔豬的生長(zhǎng)表現(xiàn)，以及斷奶兩周末仔豬胃內(nèi)容物pH、回腸內(nèi)容物微生物區(qū)系、小腸黏膜絨毛高度與隱窩深度。結(jié)果表明， 1）在斷奶后兩周內(nèi)，益生菌極顯著增加仔豬日采食量與料重比，各試驗(yàn)組均值分別較對(duì)照組高14%和10%（P<0.01），益生菌有提高仔豬日增重的趨勢(shì)（P=0.090 1），其中，1 000×10-6乳桿菌制劑組仔豬日增重較對(duì)照組增加20.6%（P<0.05）；在試驗(yàn)全期（7～19 kg），益生菌降低仔豬采食量（P<0.05），而對(duì)日增重與料重比沒有影響（P>0.05）。2) 益生菌對(duì)斷奶后兩周末仔豬胃內(nèi)容物pH（P=0.841 8）、回腸大腸桿菌（P=0.503 9）及乳酸桿菌數(shù)量（P=0.139 7）均無顯著影響。3)益生菌對(duì)仔豬絨毛高度/隱窩深度比值影響顯著，各試驗(yàn)組均值較對(duì)照組增加17.7%(P=0.023 8)，并有增加小腸黏膜絨毛高度的趨勢(shì)，試驗(yàn)組小腸黏膜絨毛高度均值較對(duì)照組高12.8%(P=0.053 8)，但對(duì)仔豬小腸黏膜隱窩深度沒有影響（P>0.05）。以上結(jié)果提示，益生菌能提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)表現(xiàn)，改善小腸黏膜結(jié)構(gòu)，不失為抗斷奶應(yīng)激添加劑的一種理想選擇。

關(guān)鍵詞：益生菌；仔豬；生長(zhǎng)表現(xiàn)；微生物區(qū)系；小腸黏膜結(jié)構(gòu)


仔豬斷奶后腸道內(nèi)環(huán)境及微生物區(qū)系發(fā)生改變，乳酸桿菌數(shù)量減少，大腸桿菌數(shù)量增加，同時(shí)引發(fā)小腸黏膜絨毛縮短，隱窩加深（Etheridge 等,1984；Hampson,1985；Cera等，1988；Kelly等，1991a,b；張振斌等,2000），導(dǎo)致仔豬以腹瀉、生長(zhǎng)差為特征的“早期斷奶綜合征”。為克服或緩解早期斷奶應(yīng)激反應(yīng)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者采用外源添加益生素或益生元來改善仔豬消化生理，提高仔豬生產(chǎn)性能（Siuta,2000 ；Jin等,2000）。同時(shí)，由于抗生素的藥物殘留問題，使得人們對(duì)規(guī)范合理使用抗生素引起重視，這樣可用的抗生素品種與劑量都很有限，因此迫切需要研制出安全、綠色、環(huán)保型飼料添加劑來替代部分抗生素。為此，本試驗(yàn)研究不同益生菌制劑對(duì)仔豬生長(zhǎng)表現(xiàn)、微生物區(qū)系和小腸絨毛結(jié)構(gòu)的影響，為尋求抗斷奶應(yīng)激劑及抗生素替代品提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物與分組

選用7 kg杜 × （長(zhǎng)&#8226;大）三元雜種斷奶仔豬112頭，按體重、性別、窩別分至如下7個(gè)處理組：（1）對(duì)照組（不添加益生菌）；（2）200 × 10-6腸球菌（enterococcus faecium）制劑組；（3）1 000×10-6腸球菌制劑組；（4）200×10-6乳桿菌（lactobacillus acidophilus）制劑組；（5）1 000×10-6乳桿菌制劑組；（6）200×10-6腸球菌與乳桿菌的混合菌制劑組；（7）1 000×10-6腸球菌與乳桿菌的混合菌制劑組。其中，腸球菌制劑含腸球菌2×1010 cfu/g，乳桿菌制劑含乳桿菌1×1010 cfu/g，混合菌制劑含腸球菌4.2×108 cfu/g，含乳桿菌8.4×108 cfu/g，含枯草芽孢桿菌4.2×108 cfu/g。每處理2個(gè)重復(fù)（欄），每重復(fù)8頭豬。

1.2 試驗(yàn)飼糧及飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)基礎(chǔ)飼糧配方與營(yíng)養(yǎng)水平見表1。對(duì)照組不添加益生菌或益生元，試驗(yàn)組以載體等量替代不同品種和劑量的益生菌制劑。試豬飼養(yǎng)管理同正常商品豬生產(chǎn)，自由采食與飲水。

表1 基礎(chǔ)飼糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平

原料 比例(%) 營(yíng)養(yǎng)指標(biāo) 營(yíng)養(yǎng)水平

玉米

次粉

大豆粕

魚粉

乳清粉

大豆油

磷酸氫鈣

石粉

賴氨酸

小蘇打

食鹽

添加劑預(yù)混料 58.53

6.00

22.10

5.00

5.00

0.50

0.39

0.84

0.29

0.10

0.25

1.00 消化能(MJ/kg)

粗蛋白質(zhì)(%)

粗纖維(%)

鈣(%)

總磷(%)

有效磷(%)

賴氨酸(%)

蛋+胱氨酸(%)

蘇氨酸(%)

色氨酸(%) 13.60

20.00

2.06

0.74

0.57

0.36

1.25

0.67

0.80

0.25


注：1.每千克飼糧添加：維生素A22 000 IU，維生素D34 400 IU，維生素E 50 IU，維生素K35.0 mg，維生素B1 3 mg，維生素B2 10 mg，維生素B6 8 mg，維生素B12 40 μg，泛酸鈣15 mg，煙酸40 mg，葉酸1 mg，生物素0.48 mg，膽堿522 mg，鐵200 mg，銅225 mg，錳42 mg，鋅165 mg，碘0.36 mg，鈷0.21 mg，硒0.30 mg，土霉素250 mg，喹乙醇100 mg；2飼糧營(yíng)養(yǎng)水平為計(jì)算值。

1.3 測(cè)試項(xiàng)目與方法

1.3.1 生長(zhǎng)表現(xiàn) 試驗(yàn)期間記錄每重復(fù)組試豬的耗料量，分別于第二周末及第四周末試驗(yàn)結(jié)束時(shí)稱個(gè)體重，回稱剩料量，以計(jì)算試驗(yàn)前兩周及試驗(yàn)全期試豬的平均日采食量、日增重與料重比。

1.3.2 胃內(nèi)容物pH、小腸黏膜結(jié)構(gòu)與微生物區(qū)系試驗(yàn)第二周末稱重后，分別于對(duì)照組、1 000×10-6乳桿菌制劑組及1 000×10-6混合菌制劑組內(nèi)每重復(fù)選取體重相近的試豬2頭（公母各一），試豬麻醉開腹后取胃內(nèi)容物，采用上海雷磁儀器廠生產(chǎn)的PHS－2C型精密酸度計(jì)測(cè)定內(nèi)容物pH；于空腸中段切取1 cm腸段，置于含3.8%甲醛的福爾馬林溶液中，經(jīng)脫水、包蠟、切片、HE染色后，電鏡拍照測(cè)量絨毛高度與隱窩深度；同時(shí)，以無菌方法采集回腸消化物1 g，盛入預(yù)先配制的培養(yǎng)基內(nèi)，以定量稀釋法測(cè)定大腸桿菌和乳酸桿菌數(shù)量。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS軟件GLM過程進(jìn)行方差分析與多重比較。

2 結(jié)果與討論

2.1 生長(zhǎng)表現(xiàn)

益生菌對(duì)斷奶后兩周及試驗(yàn)全期仔豬生長(zhǎng)表現(xiàn)的影響見表2、表3。

在斷奶后兩周內(nèi)，益生菌極顯著提高仔豬采食量（P<0.01），多重比較結(jié)果表明，除1 000×10-6混合菌制劑組外，其余試驗(yàn)組仔豬日采食量均顯著或極顯著高于對(duì)照組。如將各試驗(yàn)組數(shù)據(jù)進(jìn)行合并，則益生菌可提高仔豬日采食量14%；益生菌有提高仔豬日增重的趨勢(shì)（P=0.090 1），其中，1 000×10-6乳桿菌制劑組仔豬日增重較對(duì)照組增加20.6%（P<0.05），其它組間無顯著差異；益生菌增加仔豬料重比，各處理組料重比均值較對(duì)照組增加10%（P<0.01）。

在試驗(yàn)全期，益生菌對(duì)仔豬采食量影響顯著，降低采食量4.8%(P<0.05)，而對(duì)日增重、料重比及腹瀉率沒有影響（P>0.05）。

試驗(yàn)中益生菌顯著提高斷奶后兩周仔豬采食量，從而克服了斷奶應(yīng)激引發(fā)仔豬采食量的下降，并提高日增重。這與Tkachev等（1995）結(jié)果相同。Siuta(2000)用含雙歧桿菌、乳桿菌、鏈球菌及酵母菌的益生素飼喂杜大長(zhǎng)初生仔豬，結(jié)果表明，益生菌組28日齡平均體重較對(duì)照組提高17%(P<0.001)。試驗(yàn)在斷奶后兩周內(nèi)，益生菌在10%顯著水平上提高日增重，而在試驗(yàn)全期則沒有影響（P=0.595 0），即益生菌對(duì)仔豬生長(zhǎng)的影響隨試驗(yàn)期延長(zhǎng)而減弱。Abe等（1995）對(duì)初生仔豬飼喂含雙歧桿菌、腸球菌及乳桿菌的益生菌，10日齡仔豬體增重較對(duì)照組增加75%，至20日齡時(shí)，體增重增加22%。由此，益生菌對(duì)生產(chǎn)性能的作用效果與添加時(shí)間長(zhǎng)短、仔豬年齡及體重等相關(guān)。

表2 益生素對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)表現(xiàn)的影響

項(xiàng)目 對(duì)照 腸球菌

200×10-6 腸球菌

1000×10-6 乳桿菌

200×10-6 乳桿菌

1000×10-6 混合菌

200×10-6 混合菌

1000×10-6 SEM P值

始重(kg)

末重(kg)

日采食量(g)

日增重(g)

料重比 7.05

11.19b

396cB

296b

1.34cBc 7.05

10.94b

443bB

278b

1.59abAB 7.05

10.50ab

441bB

318ab

1.39bcBC 7.08

11.00b

446bB

283b

1.58abAB 7.05

12.04a

444bB

357a

1.25cC 7.04

11.35ab

550aA

308ab

1.79aA 7.04

11.48ab

391cB

317ab

1.24cC 0.01

0.21

11

16

0.06 0.9984

0.0816

0.0003

0.0901

0.0024

注：同行肩注小寫字母相同表示差異不顯著(P＜0.05)，不同表示差異顯著(0.01＜P＜0.05)；同行肩注大寫字母不同表示差異極顯著(P＜0.01)，下同。

表3 益生菌對(duì)試驗(yàn)全期仔豬生長(zhǎng)表現(xiàn)的影響

項(xiàng)目 對(duì)照 腸球菌

200×10-6 腸球菌

1000×10-6 乳桿菌

200×10-6 乳桿菌

1000×10-6 混合菌

200×10-6 混合菌

1000×10-6 SEM P值

始重(kg)

末重(kg)

日采食量(g)

日增重(g)

料重比

腹瀉率(%) 7.05

18.24

626abAB

400

1.57

6.06 7.05

18.39

580bcAB

405

1.44

3.54 7.05

18.43

565cB

407

1.39

2.32 7.05

18.16

563cB

398

1.43

2.14 7.05

19.69

651aA

452

1.44

3.36 7.04

18.24

598bcAB

400

1.50

2.86 7.04

18.54

617abAB

411

1.50

2.65 0.01

0.59

13

21

0.07

0.96 0.9884

0.5945

0.0161

0.5950

0.5686

0.2056

2.2 胃內(nèi)容物pH與回腸微生物區(qū)系

益生菌對(duì)斷奶后兩周末仔豬胃內(nèi)容物pH與回腸微生物區(qū)系的影響見表4。

益生菌對(duì)斷奶后兩周末仔豬胃內(nèi)容物pH（P=0.841 8）、回腸大腸桿菌（P=0.503 9）及乳酸桿菌數(shù)量（P=0.139 7）均無顯著影響。胃腸道pH與微生物區(qū)系二者具有協(xié)同作用，都與飼糧、試豬年齡及試驗(yàn)期長(zhǎng)短等有關(guān)。本試驗(yàn)益生菌對(duì)胃內(nèi)容物pH與回腸大腸桿菌及乳酸桿菌數(shù)量的影響不顯著，一方面可能與均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)誤數(shù)值較高，測(cè)定誤差較大有關(guān)；另一方面可能是試驗(yàn)重復(fù)數(shù)較少，從統(tǒng)計(jì)上掩蓋了試驗(yàn)的真實(shí)處理效應(yīng)。

表4 益生菌對(duì)斷奶后兩周末仔豬胃內(nèi)容物這pH、回腸微生物區(qū)系的影響

項(xiàng)目 對(duì)照 乳桿菌1000×10-6 混合菌1000×10-6 SEM P值

pH

大腸桿菌數(shù)(×10-6cfu/g)

乳酸桿菌數(shù)(×10-6cfu/g) 3.74

17.67

21.75 3.92

24.33

19.10 3.61

32.75

27.50 0.37

6.58

39.70 0.8418

0.5039

0.1397

2.3 小腸黏膜結(jié)構(gòu)

益生菌對(duì)小腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響見表5。

試驗(yàn)中益生菌對(duì)仔豬小腸黏膜隱窩深度沒有影響（P>0.05），但顯著影響仔豬絨毛高度/隱窩深度比值，各試驗(yàn)組均值較對(duì)照組增加17.7%(P=0.023 8)。同時(shí)，益生菌有增加小腸黏膜絨毛高度的趨勢(shì)，試驗(yàn)組小腸黏膜絨毛高度較對(duì)照組高12.8%(P=0.053 8)。小腸黏膜絨毛高度與絨毛高度/隱窩深度比值是決定仔豬消化吸收功能的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。Pluske等（1996）、Van Beers Schreurs等（1998）、McCracken等（1999）研究表明，采食水平高低與仔豬小腸黏膜絨毛高度及隱窩深度有關(guān)，高采食水平可促進(jìn)小腸黏膜的發(fā)育。本試驗(yàn)斷奶后兩周內(nèi)仔豬采食量顯著增加，因此，試驗(yàn)中小腸黏膜絨毛高度及絨毛高度/隱窩深度比值的增加可能是采食量增加的結(jié)果，即外源添加益生菌通過提高仔豬采食量促進(jìn)小腸黏膜的發(fā)育，從而增進(jìn)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收功能。

表5 益生菌對(duì)斷奶后兩周末仔豬小腸黏膜結(jié)構(gòu)的影響

項(xiàng)目 對(duì)照 乳桿菌1000×10-6 混合菌1000×10-6 SEM P值

絨毛高度(μm)

隱窩深度(μm)

絨毛高度/隱窩深度 500b

145

3.45b 580a

144

4.03a 548ab

134

4.09a 20

6

0.14 0.0538

0.4346

0.0238


3 結(jié)論

益生菌增加仔豬斷奶后兩周內(nèi)采食量和料重比，降低試驗(yàn)全期（7～19 kg）仔豬采食量；改善斷奶后兩周末仔豬小腸黏膜絨毛高度及絨毛高度/隱窩深度比值，而對(duì)小腸黏膜隱窩深度、胃內(nèi)容物pH、回腸大腸桿菌、乳酸桿菌數(shù)量及試驗(yàn)全期仔豬日增重和料重比均無顯著影響。