近年來,中草藥飼料添加劑因其安全可靠、功能多樣,不斷得到推廣應用。目前已有200多種中草藥用作飼料添加劑。雖然中草藥飼料添加劑在促進豬、馬、牛、羊消化方面應用廣泛,但在促進犬的消化方面研究尚少。本實驗通過對采食不同中藥飼料添加劑白鼠各項消化指標的檢測,篩選出促進白鼠消化的最佳組方。并為生產(chǎn)促消化犬糧奠定基礎?! ? 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 中草藥
山楂、麥芽、萊菔子、蒲公英、陳皮、啤酒酵母、山藥等。購自哈爾濱市永發(fā)中藥材批發(fā)公司。
1.1.2 實驗動物
六周齡雄性Wistar大白鼠120只,六周齡雄性昆明小白鼠120只。購自哈爾濱市醫(yī)大二院實驗動物中心。
1.2 方法
1.2.1 組方與分組
本實驗綜合醫(yī)學治療功能性消化不良的經(jīng)驗和獸醫(yī)臨床促進牛,馬,豬,羊等動物消化功能的實驗報道篩選出12種中藥。按照祖國醫(yī)藥學傳統(tǒng)理論,考查藥物間的合理配伍及藥物與動物消化吸收的關系,組成以下三個方劑:組方1? 由山楂、萊菔子、蒲公英等六味藥組成;組方2 由啤酒酵母、山楂、山藥等六味藥組成;組方3 由山楂、麥芽、陳皮等六味藥組成。各組方均以1%、2%、4%劑量添加到鼠糧中。
將六周齡雄性Wistar大白鼠120只,隨機分為1個對照組和9個實驗組。其中,C為對照組,Ⅰ為組方1的1%劑量添加組、Ⅱ為組方1的2%劑量添加組、Ⅲ為組方1的4%劑量添加組、Ⅳ為組方2的1%劑量添加組、Ⅴ為組方2的2%劑量添加組、Ⅵ為組方2的4%劑量添加組、Ⅶ為組方3的1%劑量添加組、Ⅷ為組方3的2%劑量添加組、Ⅸ為組方3的4%劑量添加組,每組12只,分別飼養(yǎng)于10個鼠籠中。各實驗組大白鼠每天飼喂相應鼠糧,對照組飼喂正常鼠糧。六周齡雄性昆明小白鼠120只,分組情況同Wistar大白鼠。連續(xù)飼喂42d。
1.2.2 檢測指標
1.2.2.1 日增重
每周測一次增重,根據(jù)實驗全程(42d)白鼠所增長的體重克數(shù)計算其日增重。
1.2.2.2 胃排空率和小腸推進率
連續(xù)飼喂42d的小鼠禁食24 h后。灌胃給予半固體糊0.8mL/ 只。20 min 后脫頸椎處死小鼠,開腹,結(jié)扎胃賁門和幽門,取胃,用濾紙擦干后稱全重,然后沿胃大彎剪開胃體,洗去胃內(nèi)容物后擦干,稱凈重。以胃全重和胃凈重之差為胃內(nèi)殘留物重量,計算胃內(nèi)殘留物占所灌半固體糊的重量百分比為胃內(nèi)殘留率。同時迅速取出小腸,輕輕剝離后直鋪于白紙上,測量幽門至回盲腸部全長及幽門至黑色半固體糊前沿的距離。以幽門至黑色半固體糊前沿的距離占幽門至回盲部全長的百分率為小腸推進率。
1.2.2.3 胃蛋白酶活力
連續(xù)飼喂42d,將大鼠禁食,不禁水24h,乙醚麻醉后,仰臥固定于手術板上,沿劍突下腹白線剪開約2.5cm小口,將胃輕輕拉出,結(jié)扎幽門與十二指腸結(jié)合部,縫合腹壁切口。2h后拆線打開腹腔,結(jié)扎賁門后取出全胃,用濾紙擦凈血跡,沿胃大彎剪開胃腔,傾出內(nèi)容物,收集于刻度離心管中,再以3000r/min離心15min,吸取上清液,測定胃蛋白酶活力。
2 結(jié)果
飼喂相應鼠糧42d后,白鼠的日增重、胃內(nèi)殘留率、小腸推進率、胃蛋白酶活力的測定結(jié)果見表1。由表1可知, 42d時,Ⅲ、Ⅶ、Ⅳ、Ⅷ、Ⅸ組日增重高于對照組,Ⅳ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ組胃內(nèi)殘留率均低于對照組;Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ組小腸推進率均較對照組增高;Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ組胃蛋白酶活力高于對照組。其中Ⅶ,Ⅷ組以上4項指標與對照組相比差異顯著(p<0.05)。
表1? 42d后白鼠的日增重、胃內(nèi)殘留率、小腸推進率、胃蛋白酶活力
組別
| 日增重(g/d)
| 胃內(nèi)殘留率
| 小腸推進率
| 胃蛋白酶活力(u)
| C
| 1.573±0.5126
| 0.33±0.01
| 0.53±0.01
| 91.67±0.90
| Ⅰ
| 1.571±0.1792
| 0.41±0.01
| 0.49±0.09
| 57.80±1.02
| Ⅱ
| 1.506±0.4542
| 0.38±0.15
| 0.53±0.04
| 79.24±1.02
| Ⅲ
| 1.595±0.2735
| 0.41±0.10
| 0.52±0.04
| 89.63±1.04
| Ⅳ
| 1.578±0.1868
| 0.22±0.07
| 0.55±0.01
| 95.04±1.06
| Ⅴ
| 1.472±0.2846
| 0.54±0.06
| 0.55±0.05
| 88.11±1.05
| Ⅵ
| 1.456±0.1045
| 0.52±0.08
| 0.53±0.07
| 94.18±0.89
| Ⅶ
| 1.704±0.2629*
| 0.24±0.06*
| 0.61±0.03*
| 97.48±1.17*
| Ⅷ
| 1.730±0.2405*
| 0.26±0.11*
| 0.60±0.07*
| 97.49±1.17*
| Ⅸ
| 1.318±0.2230
| 0.28±0.05
| 0.54±0.09
| 93.16±1.32
| 3 小結(jié)與討論
隨著飼料工業(yè)的迅速發(fā)展,中藥詞料添加劑的研究日益受到重視,中藥的合理使用避免了抗生素和激素的不利影響,而且中藥本身含有一定量的營養(yǎng)物質(zhì),有的還含有動物喜愛的香味,添加在飼料中對動物有保健,增進食欲,幫助消化,促進吸收、生長,提高生產(chǎn)性能,降低飼料消耗的作用。
本實驗組方3(Ⅵ、Ⅷ、Ⅸ組)選用山楂、陳皮、麥芽、山藥、大棗、扁豆六味中藥。其中山楂、陳皮、麥芽、山藥具有理氣消食、助脾健胃的作用;大棗具有補肺氣、益脾氣、養(yǎng)血安神調(diào)和藥性的作用;扁豆具有補脾除濕的作用。經(jīng)合理配伍,該方具有健胃消食、健脾除濕、補氣理血、扶正祛邪、調(diào)和陰陽、調(diào)節(jié)臟腑的功能。實驗所測定的胃內(nèi)殘留率和小腸推進率均為反應大鼠胃腸機械運動能力的指標,分析各組大鼠的日增重、胃內(nèi)殘留率、小腸推進率、胃蛋白酶活力的測定結(jié)果表明:Ⅵ組(組方3的1%、Ⅷ組(組方3的2%)顯著優(yōu)于對照組。說明Ⅵ組(組方3的1%)、Ⅷ組(組方3的2%)能增強鼠胃腸運動,提高胃蛋白酶活力,促進鼠的消化功能。
本實驗采用營養(yǎng)性半固體糊食物進行灌胃,其營養(yǎng)結(jié)構(gòu)更接近日常食物。因此,能更近似反映藥物對胃排空生理機能的影響。實驗在營養(yǎng)性半固體糊中加入炭末,同時可觀察藥物對胃腸運動功能的影響,節(jié)省動物。用本法來測定胃排空率,可避免采用比色法測定因藥物自身顏色對測定結(jié)果的影響。用黑色營養(yǎng)性半固體糊比溶液性標示物更能反映藥物對小腸推進生理機能的影響。本實驗為研制促消化犬糧提供了理論依據(jù)。 |
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