疑似病毒性疾病病料的采集、保存和運(yùn)輸

dragonli97

用于實(shí)驗(yàn)室診斷的豬病料的采集、保存和運(yùn)輸方法介紹（1）： 疑似病毒性疾病病料的采集、保存和運(yùn)輸 李龍* 浙江大學(xué)動(dòng)物預(yù)防醫(yī)學(xué)研究所, 杭州，310029 章葉恩 上海諾華動(dòng)物保健有限公司，上海，200031 多病原的混合感染已經(jīng)成為當(dāng)前豬傳染性疾病流行的最主要特征之一，導(dǎo)致發(fā)病率和死亡率的顯著上升，帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失，同時(shí)造成了臨床癥狀的不典型，為診斷帶來(lái)了很大的難度，臨床上，我門(mén)已經(jīng)很難簡(jiǎn)單地將幾個(gè)癥狀組合起來(lái)就判定是什么疾病。在2006年的“高熱病”風(fēng)暴中，就有太多的由于誤診或診斷不及時(shí)，導(dǎo)致嚴(yán)重后果的例子。在具有豐富臨床經(jīng)驗(yàn)的獸醫(yī)指導(dǎo)下，尋找有效的疾病控制措施的同時(shí)，很多時(shí)候我們需要對(duì)疾病進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室確診。如何按照幾個(gè)大類對(duì)可能感染的病原進(jìn)行分類，然后針對(duì)性的采集、保存和送檢病料，是實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)室診斷的前提。臨床上，往往由于病料的選擇、采集方法、儲(chǔ)存和運(yùn)輸方式不正確，最后送到實(shí)驗(yàn)室的樣品無(wú)法進(jìn)行檢測(cè)，或?qū)е聶z測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，最后延誤了疾病的診斷，甚至造成誤診。本文主要介紹各種病毒性送檢病料和血樣的采集、保存和運(yùn)輸方法，為臨床操作提供一些可操作性的方案和建議。在以后的文章中，我們還會(huì)具體介紹用于細(xì)菌性和寄生蟲(chóng)性疾病，以及其他疾病診斷的送檢病料的采集、保存和運(yùn)輸方法。 一、用于各種病毒性疾病病原檢測(cè)病料的采集和保存 以下提到病料樣品，如不是直接進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，都需要冷凍保存（-20℃）！ 1、疑似豬瘟病例的送檢病料采集 豬瘟在臨床上主要表現(xiàn)為典型和非典型兩種癥狀，隨著我們國(guó)家豬瘟疫苗免疫的普及程度越來(lái)越高，近年來(lái)，典型豬瘟在臨床上較為少見(jiàn)。這里主要介紹對(duì)與非典型豬瘟的病料采集方法。但是對(duì)于豬瘟的診斷，很多臨床例子是采用血清學(xué)的診斷方法（一般為血凝抑制試驗(yàn)），來(lái)檢測(cè)豬瘟抗體的水平，以此來(lái)判斷豬場(chǎng)的豬瘟感染情況。因?yàn)橥ǔ５囊?guī)模豬場(chǎng)都已經(jīng)進(jìn)行了豬瘟疫苗的免疫，因此在這里，作者必須申明，在這樣的豬場(chǎng)，檢查血清抗體的方法，只能一定程度上反映本場(chǎng)豬瘟疫苗免疫后的抗體水平如何、豬場(chǎng)的豬瘟免疫合格率多少。當(dāng)然抗體水平的高低，很多時(shí)候與用于血清采集的豬的日齡有密切關(guān)系，也就 是說(shuō)，如果懷疑豬場(chǎng)有豬瘟的問(wèn)題，而隨機(jī)的抽取一些發(fā)病豬的血清（血清采集方法附后），進(jìn)行抗體測(cè)定，并不能說(shuō)明任何問(wèn)題！如果要正確診斷是否感染有豬瘟病毒，必須進(jìn)行病原學(xué)診斷，相應(yīng)的常用方法有兩個(gè)：一個(gè)是抗原捕獲ELISA，這個(gè)方法當(dāng)然只需要采集血清就可以了，在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行與簡(jiǎn)單抗體檢測(cè)完全不同實(shí)驗(yàn)；另一個(gè)方法是利用PCR方法，檢測(cè)病料中是否存在豬瘟病毒的基因，以此來(lái)判定是否感染豬瘟病毒。因?yàn)樨i瘟病毒在扁桃體（靶器官）中的含量是最高的，因此摘取扁桃體進(jìn)行檢測(cè)是非常重要的，同時(shí)要取其它重要淋巴結(jié)和脾臟，必要時(shí)也可以取部分肺臟。 具體病料的采集步驟如下：①放血。從大腿內(nèi)側(cè)將皮膚、肌肉切開(kāi)，直至將股東脈割斷，放血至病豬休克死亡；②解剖摘取扁桃體。從胸部中線偏右處，切斷肋骨，打開(kāi)胸腔，在氣管與肺臟連接處向前5-10厘米位置，割斷氣管，并順著氣管向前割開(kāi)，直至咽喉部，從后向前將氣管割斷一半，這是就可以在舌跟靠近上顎的左右兩邊看到兩個(gè)淋巴結(jié)，即扁桃體。小心取下扁桃體放置于干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。③解剖摘取肺門(mén)淋巴結(jié)。一只手握住氣管切斷處，使勁向外拉出肺臟，另一只手幫忙扯斷肺臟與身體的連接，并將整個(gè)肺臟翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，使背面向上， 此時(shí)可在氣管分為支氣管，與肺臟連接處，找到分別位于左右兩側(cè)的兩個(gè)肺門(mén)淋巴結(jié)，小心摘取，放置于另一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。④肺臟樣品的采集。如有必要，此時(shí)可將割取部分肺臟樣品，一般只要割取介于病變和正常組織之間的部分就可以了，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。當(dāng)然也可以將整個(gè)肺臟保存，但這并不是好方法。⑤解剖摘取腹股溝淋巴結(jié)。將兩個(gè)后腿，向下向外壓，就可以在兩側(cè)凹陷的腹股溝處中間部位，看到微微或明顯隆起，即腹股溝淋巴結(jié)，小心割開(kāi)皮膚和淋巴結(jié)表面的被摸，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。⑥解剖摘取脾臟。沿腹中線將腹部皮膚、肌肉和腹膜，小心切開(kāi)并打開(kāi)腹腔，在腹腔的左側(cè)位于胃和回腸下面，找到脾臟，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。⑦解剖摘取腸系膜淋巴結(jié)。從腹腔的右側(cè)位于肝臟和胃下面，找到腸系膜，在腸系膜靠近腸道的末端，可以看到很多結(jié)節(jié)，即腸系膜淋巴結(jié)，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。⑧流產(chǎn)胎兒。通常木乃伊胎不能作為檢測(cè)樣品。對(duì)于新鮮流產(chǎn)的胎兒，可作為檢測(cè)樣品。對(duì)于流產(chǎn)日齡較早的胎兒，可取整個(gè)胎兒保存；如果是晚期流產(chǎn)的胎兒，最好根據(jù)上述步驟，摘取相應(yīng)組織，保存送檢。胎兒的保存方法同上。 2、疑似藍(lán)耳病病例的送檢病料采集 豬藍(lán)耳病的學(xué)名叫豬繁殖與呼吸綜合征，顧名思義，對(duì)于藍(lán)耳病的檢測(cè)，繁殖系統(tǒng)和呼吸系統(tǒng)的病料都十分重要。同時(shí)，我們知道，藍(lán)耳病，最大的危害是侵害免疫系統(tǒng)，造成免疫抑制，因此，免疫系統(tǒng)的病料也十分重要。 具體病料采集程序與豬瘟病料的采集基本一致（包括步驟①、③-⑥、⑧），需要強(qiáng)調(diào)的是，在藍(lán)耳病的檢測(cè)中，必須包括淋巴結(jié)和肺臟樣本！如果是檢測(cè)流產(chǎn)胎兒，那么，最好⑨能剪取部分胎衣液或剪取胎衣樣本，保存方法同上。 3、疑似圓環(huán)病毒感染病例的送檢病料采集 到目前為止，對(duì)于圓環(huán)病毒在臨床上的危害，我們主要注意它免疫抑制，當(dāng)然圓環(huán)病毒還能引起腸炎和繁殖障礙。因此，對(duì)于疑似圓環(huán)病毒感染的病例，病料采集包括步驟①、③-⑦。記住，在圓環(huán)病毒的檢測(cè)中，必須包括淋巴結(jié)樣品。 4、疑似偽狂犬病例的送檢病料采集 偽狂犬病毒可危害呼吸系統(tǒng)、繁殖系統(tǒng)或中樞神經(jīng)系統(tǒng)，因此，病料采集包括步驟①-⑧。同時(shí)，最好能夠⑩采集神經(jīng)系統(tǒng)的樣品。具體步驟為用手術(shù)刀片將豬的頭皮剝?nèi)?，露出頭蓋骨，然后用鑿子（也可用一字螺絲刀），輕輕鑿開(kāi)頭蓋骨，并清理骨頭碎片，等整個(gè)大腦露出后，小心用手摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。特別提示，因?yàn)楝F(xiàn)在使用偽狂犬疫苗絕大多數(shù)都是基因缺失疫苗（gE或gD缺失），因此血清學(xué)診斷（即鑒別ELSA檢測(cè)抗體）在絕大多數(shù)情況下，可對(duì)該病進(jìn)行確診，因此血清樣品對(duì)于該病的診斷必不可少！具體采集 方法見(jiàn)第二部分。 5、疑似乙型腦炎病例的送檢病料采集 乙型腦炎病毒主要感染繁殖系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)。病料采集包括步驟①、⑤、⑧、⑩。注意，乙型腦炎病毒可感染人類，特別是兒童，導(dǎo)致嚴(yán)重的腦炎，因此取病料時(shí)，請(qǐng)務(wù)必帶上乳膠手套，并小心操作。 6、疑似傳染性胃腸炎和流行性腹瀉病例的送檢病料采集 本病的送檢病料采集，包括步驟①、⑤、⑦。同時(shí)需要⑩采集腸道樣品。從腹腔中剪取病變的小腸10-15厘米，從一側(cè)將腸道剪開(kāi)，輕輕刮去腸道內(nèi)容物，然后放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。 7、疑似流感病例的送檢病料采集 豬流感病料采集最為簡(jiǎn)單，通常情況下，只需要用干凈的脫脂棉球，沾去鼻腔液體，然后放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。當(dāng)然如果認(rèn)為重要也可以采集肺臟和淋巴結(jié)樣品。 二、用于各種病毒性疾病病原檢測(cè)病料的運(yùn)輸 無(wú)論是運(yùn)送新鮮的病料還是冰凍的病料，保證整個(gè)過(guò)程中，病料始終處于低溫狀態(tài)，十分重要。一個(gè)簡(jiǎn)單的方法是，用廢棄的礦泉水瓶，灌水后，放置在冰箱中，制備冰塊，在病料運(yùn)輸時(shí)，將足量的冰塊和病料一起放置在保溫箱中（用冰塊包裹所有病料，如果冰塊不夠多，最好將冰塊放置在病料的上面和下面。），密封后，由專人快速運(yùn)送到檢測(cè)單位。 三、血清樣品的采集、保存和運(yùn)輸 雖然血清學(xué)診斷，對(duì)于各種病毒性疾病的診斷，不能起確定作用（除了偽狂犬），但是血清學(xué)診斷對(duì)于上述診斷是十分必要的，所以只要條件允許，最好能夠同時(shí)采集血樣。特別指出，血液和血清是不同的概念！血清是血液的組成部分，它必須從血液中分離出來(lái)后，才能用于血清學(xué)實(shí)驗(yàn)，但是這種分離過(guò)程需要專業(yè)人員來(lái)操作。因此，在臨床上我們采集的血樣，最好在凝固后，直接送到檢測(cè)單位，以保證血清學(xué)實(shí)驗(yàn)的正確進(jìn)行。一般采血2-5毫升就足以滿足實(shí)驗(yàn)室診斷的用量了。重點(diǎn)提示，用于血清學(xué)試驗(yàn)的血樣，不能加任何抗凝血?jiǎng)? 這里只介紹三種最常規(guī)的采血方法。血樣采集具體步驟如下，⑴準(zhǔn)備好滅菌（至少是干凈的，但必須保證干燥?。└稍锏膸w子的塑料試管或者青霉素瓶若干；準(zhǔn)備好專業(yè)的采血針，或者一次性注射器（1毫升或2.5毫升）。保證每個(gè)血樣一個(gè)瓶子和一個(gè)針筒。⑵采血。采學(xué)前，在相應(yīng)的注射器或容器上作好標(biāo)記。①耳靜脈采血。本法為最常用的取血法之一。將豬保定后，或由助手以手扶住頭部及耳部。選耳靜脈清晰的耳朵，用75%酒精局部消毒，待干。用手指輕輕摩擦豬耳，使靜脈擴(kuò)張，用連有針頭的注射器在耳緣靜脈末端刺破血管待血液漏出取血或?qū)⑨橆^逆血流方向刺入耳緣靜脈取血，取血完畢用棉球壓迫止血。②心臟采血。將豬四腳向上，仰臥在地板上，固定四腳和頭部，同時(shí)暴露左側(cè)胸腔部位，探明心臟搏動(dòng)最強(qiáng)部位，通常在胸骨左緣的正中，選心跳最顯的部位，用專業(yè)的采血針作穿刺，抽取血液2-5毫升。周采血應(yīng)不超過(guò)10ml為宜。 ③股動(dòng)脈采血。將動(dòng)脈仰位固定在地板臺(tái)上，麻醉后，局部用碘酒或酒精消毒。切開(kāi)長(zhǎng)約2-3cm的皮膚，使股動(dòng)脈暴露及分離。然后，用鑷子提起股動(dòng)脈，插入針頭，輕輕抽取，血液會(huì)自動(dòng)流入注射器。④直接割破股動(dòng)脈，接取血液。這個(gè)方法只在上述方法都不能實(shí)現(xiàn)時(shí)使用，因?yàn)橛迷摲椒ㄊ占难?，容易污染，可能無(wú)法用于進(jìn)行血清分離，或分離的血清被污染，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。⑵血樣保存和運(yùn)送。將采完血樣的注射器活塞，微微拔出一些，使針筒內(nèi)留有部分空氣，然后蓋好針頭蓋子，將注射器針頭向上成30度角，斜放，等待血液完全凝固（大概10分鐘到30分鐘），此過(guò)程中不能移動(dòng)注射器，防止溶血。使用試管和青霉素瓶時(shí)也是一樣。然后將樣品打包，派專人立即送往檢測(cè)單位。 總結(jié)，用于病毒性病原檢測(cè)的病料：1）不需要完全無(wú)菌，一般只要保證清潔就可以了；2）最好冷凍保存，并保證整個(gè)運(yùn)輸過(guò)程的低溫保存；3）不同疑似病例的病料采集有所不同；4）同時(shí)送檢血樣。

來(lái)自鄉(xiāng)下的狼

用于實(shí)驗(yàn)室診斷的豬病料的采集、保存和運(yùn)輸方法介紹（2）： 疑似細(xì)菌性疾病病料的采集、保存和運(yùn)輸 章葉恩* 上海諾華動(dòng)物保健有限公司，上海，200031 李龍 密蘇里-哥倫比亞大學(xué)分子微生物與免疫系，哥倫比亞，65203，美國(guó) 上文我們介紹了在疑似病毒性疾病病例中，如何采集用于實(shí)驗(yàn)室診斷的豬病料方法，及其保存和運(yùn)輸要點(diǎn)。本文我們將著重介紹疑似細(xì)菌性病例的相關(guān)內(nèi)容。 多病原的混合感染是當(dāng)前豬傳染性疾病流行的最主要特征之一。臨床上多病原混合感染，通常是在原發(fā)性病原（以病毒最為常見(jiàn)，也包括部分細(xì)菌和其他病原，如支原體等）感染后，沒(méi)有得到及時(shí)控制，繼而感染了其他病原（以細(xì)菌最為常見(jiàn)），造成嚴(yán)重的、綜合性的臨床癥狀，導(dǎo)致死亡率迅速升高，甚至無(wú)法控制。在多病原混合感染的早期，通常只有原發(fā)性病原感染情況下，只表現(xiàn)為輕微的臨床癥狀，甚至呈隱性感染過(guò)程，因此豬場(chǎng)往往會(huì)忽略這個(gè)過(guò)程。隨著病情的發(fā)展，一些（條件性）細(xì)菌性或其他病原開(kāi)始感染，隨之出現(xiàn)一些細(xì)菌感染癥狀，很多豬場(chǎng)都會(huì)注意到這個(gè)時(shí)期，然后開(kāi)始試用各種抗生素治療，運(yùn)氣好的用了1-2種藥物后，碰到了敏感的抗生素，病情得到了暫時(shí)的緩解（原發(fā)病原依然存在）；但是大多數(shù)豬場(chǎng)并沒(méi)有這么好的運(yùn)氣，結(jié)果試了多種藥物后，情況非但沒(méi)有好轉(zhuǎn)，反而更加嚴(yán)重，表現(xiàn)出嚴(yán)重的細(xì)菌感染癥狀，開(kāi)始出現(xiàn)死亡，并持續(xù)加重。豬場(chǎng)往往會(huì)在這個(gè)時(shí)期大量用藥，但這也是藥物效果最差的時(shí)期。從上述過(guò)程，我們雖然沒(méi)有辦法歸納出多病原的混合感染的所有癥狀，但是從大量的臨床實(shí)踐來(lái)看，在多病原的混合感染的后期，通常豬場(chǎng)都表現(xiàn)為明顯的細(xì)菌感染癥狀，且藥物效果很差。因此，如何有效的控制細(xì)菌感染，往往成為很多豬場(chǎng)控制死亡率的關(guān)鍵。 臨床上，豬場(chǎng)通常是根據(jù)不同的癥狀和病理表現(xiàn)，來(lái)判斷使用何種（組合）的抗生素。如個(gè)別豬只出現(xiàn)發(fā)熱時(shí)，我們通常會(huì)使用青霉素加退燒藥；個(gè)別豬只出現(xiàn)咳嗽時(shí)，根據(jù)咳嗽的長(zhǎng)短、發(fā)出聲音的部位不同，常應(yīng)用的一些抗生素藥如枝原凈，林可，慶大霉素，氟苯尼考，頭孢等；個(gè)別豬只出現(xiàn)拉稀時(shí)，根據(jù)拉稀的不同表現(xiàn)，如糞便的顏色、飼料的消化程度，有無(wú)腸粘膜，氣味有無(wú)腥味等我們會(huì)選擇一些藥物如磺胺類、沙星類、慶大、卡那霉素，土霉素等；的確很多時(shí)候，經(jīng)過(guò)上述治療后，病情就會(huì)穩(wěn)定。但是由于不同豬場(chǎng)對(duì)疾病的判斷能力不同、疾病本身表現(xiàn)出的新臨床癥狀（也可能是相對(duì)不同的管理者來(lái)說(shuō)）的改變、細(xì)菌耐藥性的大幅提高，導(dǎo)致我們保健、治療過(guò)程中不能對(duì)癥下藥，病情不能很快穩(wěn)定、甚至蔓延，特別是在混合感染的病例中，這種用藥不對(duì)癥的后果，也正是造成大量死亡的首要原因。如果這個(gè)時(shí)候，我們能夠進(jìn)行一些甚至是很簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)室診斷，如細(xì)菌分離培養(yǎng)、藥敏試驗(yàn)等，這樣就可以知道是什么原因造成病情不能控制，通過(guò)藥敏實(shí)驗(yàn)告訴我們什么藥物敏感，通過(guò)細(xì)菌分離培養(yǎng)制作自家菌苗（在病情較復(fù)雜的情況下，可先制作自家組織苗，另文介紹）來(lái)控制疾病。那么怎么樣才能保證實(shí)驗(yàn)室診斷的精確，實(shí)驗(yàn)室本身的診斷能力是一個(gè)方面，關(guān)鍵還在于采集的病料是否具有代表性，是否對(duì)采集的病料進(jìn)行合理的保存和運(yùn)輸。 一、用于各種細(xì)菌性疾病病原檢測(cè)病料的采集 由于細(xì)菌性病原很多，且同一種臨床癥狀可由多種細(xì)菌引起，因此在下文的介紹中，我們?cè)噲D根據(jù)幾種具有代表性臨床癥狀，來(lái)歸納不同情況下，用于實(shí)驗(yàn)室診斷的病料的采集方法。 在選擇細(xì)菌性疾病病原檢測(cè)病料時(shí)，要選擇有代表性的病例,最好選未經(jīng)抗菌素治療的病例（最近１周未經(jīng)抗菌素治療的病例）。有條件的最好選用活體送檢。 1、呼吸困難、咳嗽、打噴嚏病例的送檢病料采集 導(dǎo)致豬呼吸困難、咳嗽、打噴嚏的原因包括病毒、細(xì)菌、環(huán)境與貧血等等。這里我們只討論細(xì)菌感染病例的送檢病料采集方法。引起豬呼吸疾病的細(xì)菌性病原體主要包括：支原體、支氣管敗血波氏桿菌、多殺性巴氏桿菌、胸膜肺炎放線菌還是、豬副嗜血桿菌、鏈球菌等。臨床上由于豬瘟、豬繁殖與呼吸道綜合征、支原體肺炎的普遍存在，導(dǎo)致其他細(xì)菌的感染率居高不下。因此在有呼吸疾病的豬場(chǎng)，采集病料時(shí)要包括上述所有細(xì)菌病原體的寄生部位。 具體病料的采集步驟如下：⑴放血。從大腿內(nèi)側(cè)將皮膚、肌肉切開(kāi)，直至將股東脈割斷，放血至病豬休克死亡；⑵鼻腔粘液的提取。如果是用于細(xì)菌分離目的（如藥敏試驗(yàn)），那么最好在活體送檢或現(xiàn)場(chǎng)分離的情況下，由專業(yè)人員進(jìn)行鼻腔粘液的提??；其他情況下，我們不建議采用。如果采集的病料是用于病原核酸的診斷（如PCR），則可以采用：用清潔的（最好是滅菌的）脫脂棉簽，伸入病豬鼻腔中，充分刮檫后，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。⑶胸腔積液和心包積液的提取。同樣的不建議用于細(xì)菌病原分離目的的病料采集，最好活體送檢時(shí)由專業(yè)人員進(jìn)行。如果是用于病原核酸的診斷（如PCR），則可以用新的一次性注射器抽取幾毫升，并做標(biāo)記即可。需要注意的是，在暴露胸腔或心包腔之前，不可以污染。一個(gè)最基本的標(biāo)準(zhǔn)是除了必須用于切開(kāi)胸腔或心包腔的手術(shù)器械（手術(shù)刀片或剪刀）以外， 不能接觸其他任何物體，直到樣品采集完成。⑷剖摘取整個(gè)肺臟。一只手握住氣管切斷處，使勁向外拉出肺臟，另一只手幫忙扯斷肺臟與身體的連接，并將整個(gè)肺臟翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，使背面向上， 此時(shí)割取部分肺臟樣品，一般只要割取介于病變和正常組織之間的部分就可以了，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。當(dāng)然也可以將整個(gè)肺臟保存，但這并不是好方法。⑸解剖摘取脾臟。沿腹中線將腹部皮膚、肌肉和腹膜，小心切開(kāi)并打開(kāi)腹腔，在腹腔的左側(cè)位于胃和回腸下面，找到脾臟，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。⑹解剖摘取整個(gè)肝臟。在打開(kāi)的腹腔靠近膈肌的位置，幾乎完全被肝臟覆蓋。從肝臟與消化道連接處，將整個(gè)肝臟提起，然后割斷連接，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。⑺提取關(guān)節(jié)液。只在活體送檢時(shí)采用。 2、腹瀉病例的送檢病料采集 導(dǎo)致豬只腹瀉的原因同樣很多，這里我們只討論細(xì)菌性腹瀉病例的送檢病料采集。引起仔豬腹瀉的細(xì)菌性病原體主要包括大腸桿菌、梭菌（Ａ型產(chǎn)氣莢膜梭菌、Ｃ型產(chǎn)氣莢膜梭菌等）、勞森菌、結(jié)腸菌毛樣螺旋體、腸球菌、豬痢疾密螺旋體、沙門(mén)氏菌等。 具體病料的采集步驟包括：⑴⑸⑹。⑻提取部分腸、結(jié)腸內(nèi)容物。根據(jù)各種細(xì)菌感染的部位不同提取部分腸、結(jié)腸內(nèi)容物：如大腸桿菌一般感染整個(gè)小腸，回腸還是結(jié)腸無(wú)區(qū)別；沙門(mén)氏菌、梭菌及腸球菌感染整個(gè)腸道；勞森菌感染回腸；結(jié)腸菌毛樣螺旋體與豬痢疾密螺旋體感染結(jié)腸。⑼剪取部分腸、結(jié)腸。也可根據(jù)上述方法，剪取不同的腸道部位，但是需要指出的是，在實(shí)際送檢過(guò)程中，很難保證腸道樣品免受污染，因此作者并不建議用送檢部分腸道。⑽特別提示，在所有的腹瀉病例中，病豬排泄物的細(xì)菌檢查是十分必要的；而在大多數(shù)情況下，這種常規(guī)化驗(yàn)工作完全可以在當(dāng)?shù)蒯t(yī)院的檢驗(yàn)科完成。豬場(chǎng)要做的只是新鮮采集病豬排泄物樣品就可以了，很多時(shí)候并沒(méi)有必要送到幾百里外的獸醫(yī)專業(yè)實(shí)驗(yàn)室。 3、神經(jīng)癥狀和步態(tài)不穩(wěn)病例的送檢病料采集 導(dǎo)致豬只神經(jīng)癥狀和步態(tài)不穩(wěn)的原因包括病毒、細(xì)菌、原蟲(chóng)、營(yíng)養(yǎng)與中毒。這里我們討論細(xì)菌性神經(jīng)癥狀和步態(tài)不穩(wěn)病例的送檢病料采集。引起豬只神經(jīng)癥狀和步態(tài)不穩(wěn)的細(xì)菌性病原體主要包括支原體、豬副嗜血桿菌、鏈球菌、大腸桿菌、李氏桿菌等。 具體病料的采集步驟如下：⑴，⑶⑷⑸⑺。⑾采集神經(jīng)系統(tǒng)的樣品。具體步驟為用手術(shù)刀片將豬的頭皮剝?nèi)?，露出頭蓋骨，然后用鑿子（也可用一字螺絲刀），輕輕鑿開(kāi)頭蓋骨，并清理骨頭碎片，等整個(gè)大腦露出后，小心用手摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。 二、用于各種細(xì)菌性疾病病原檢測(cè)病料的運(yùn)輸 如果是是用于細(xì)菌分離的病料，必須新鮮運(yùn)送，并保證整個(gè)過(guò)程中，病料始終處于低溫狀態(tài)（但絕對(duì)不能結(jié)冰），保證始終無(wú)人為的污染，十分重要。一個(gè)簡(jiǎn)單的方法是，用廢棄的礦泉水瓶，灌水后，放置在冰箱中，制備冰塊，在病料運(yùn)輸時(shí)，將足量的冰塊和病料一起放置在保溫箱中（用冰塊包裹所有病料，如果冰塊不夠多，最好將冰塊放置在病料的上面和下面。），密封后，由專人快速運(yùn)送到檢測(cè)單位。如果是用于病原核酸檢測(cè)的病料，則病料可以冷凍保存，同樣需要并保證整個(gè)過(guò)程中，病料始終處于低溫狀態(tài)，保證始終無(wú)人為的污染。 三、有安排的活豬送檢，是進(jìn)行細(xì)菌分離和藥敏試驗(yàn)最好的保證 無(wú)論我們?nèi)绾闻Φ厝?yán)格執(zhí)行病料采集和運(yùn)送的各個(gè)程序，但病料的污染（微生物學(xué)和化學(xué)意義上的）是不可避免的，只是污染程度的不同和對(duì)結(jié)果的影響程度不同而已。這種病料的采集過(guò)程通常需要具有相當(dāng)微生物和獸醫(yī)學(xué)知識(shí)的人員來(lái)操作，同時(shí)還需要一定硬件條件支持。送檢活豬就可以避免上述污染，但是同樣需要注意以下問(wèn)題。通常送檢的病豬或者用于采樣的病豬，至少滿足以下三個(gè)條件：最好是在一周內(nèi)沒(méi)有經(jīng)過(guò)任何抗生素治療，病癥相對(duì)整個(gè)豬場(chǎng)具有代表性，且病豬處于垂死狀態(tài)。正是因?yàn)樯鲜鋈齻€(gè)條件，就要求豬場(chǎng)在活豬送檢前，與檢測(cè)單位約定好時(shí)間和人員，以保證及時(shí)進(jìn)行病理檢查和細(xì)菌分離。因此送檢活豬務(wù)必事先有充分的準(zhǔn)備。 總結(jié)，用于細(xì)菌性病原檢測(cè)的病料采集和送檢需要注意以下問(wèn)題。如用于細(xì)菌分離和藥敏試驗(yàn)?zāi)康模?）需要要完全無(wú)菌，保證操作過(guò)程中無(wú)人為的污染2）最好冷藏（不可以冷凍！）保存，并保證整個(gè)運(yùn)輸過(guò)程的低溫（不可以冷凍！）保存；3）不同疑似病例的病料采集有所不同。4）送檢活豬是進(jìn)行細(xì)菌分離的最好材料。如果用于病原的核酸檢測(cè)：則病料可以冷凍保存和運(yùn)送。 (本文來(lái)自：中國(guó)畜牧人論壇,http://www.ffers.com.cn )

mydream

太實(shí)用了，真是感激不盡。。。

penglin1984

總結(jié)得太豐富了，感謝分享！

志在高遠(yuǎn)

不錯(cuò)學(xué)習(xí)了

拒絕打折

竊喜中??！這么好居然不花錢??！謝謝樓主，您辛苦了