1
原理
油脂受到光、熱、空氣中氧的作用,發(fā)生酸敗反應,分解出醛、酸之類的化合物。丙二醛就是分解產(chǎn)物的一種,它能與TBA(硫代巴比妥酸)作用生成粉紅色化合物,在532nm波長處有吸收高峰,利用此性質(zhì)即能測出丙二醛含量,從而推導出油脂酸敗的程度。
2
試劑
2.1
TBA水溶液:準確稱取TBA0.288g溶于水中,并稀釋至100ml(如TBA不易溶解,可加熱至全溶澄清,然后稀釋至100ml),相當于0.02M;
2.2
三氯乙酸混合液:準確稱取三氯乙酸(分析純)7.5g及0.1gEDTA,用水溶解,稀釋至100ml;
2.3
氯仿(分析純);
2.4
丙二醛標準溶液:稱取0.315g1,1,3,3-四乙氧基丙烷,溶解后稀釋至1000ml,此溶液每ml相當于丙二醛100μg,置于冰箱內(nèi)保存。準確吸取10ml,稀釋至100ml,此溶液每ml相當于丙二醛10μg,備用。
3
操作步驟
(1)標準曲線的繪制
準確吸取每相當于丙二醛10μg的標準溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml置于納氏比色管中,加水至總體積為5ml,加入5mlTBA溶液,然后按樣品測定步驟進行,測得光密度繪制標準曲線。
(2)樣品測定:
準確稱取融化均勻的油脂樣品30g,置于100ml有蓋三角瓶內(nèi),加入20ml三氯乙酸混合液,振搖半小時(保持油脂融溶狀態(tài),如冷結(jié)即在70℃水浴上略微加熱使之融化后繼續(xù)振搖)用雙層濾紙過濾,除去油脂。濾液重復用雙層濾紙過濾一次。
準確移取上述濾液5ml置于25ml比色管內(nèi),加入5mlTBA溶液,混勻,加塞,置于90℃水浴內(nèi)保溫40min,取出,冷卻1h,移入小試管內(nèi),離心5min,上清液傾入25ml納氏比色管中,加入5ml氯仿,搖勻,靜置,分層,吸出上清液于532nm波長比色,對照標準曲線得到微克數(shù)(同時作空白試驗)。4
計算 丙二醛含量(mg/kg)=
式中C—從標準曲線查得丙二醛的微克數(shù)(ug)
m---樣品質(zhì)量(g) |
版權(quán)聲明:本文內(nèi)容來源互聯(lián)網(wǎng),僅供畜牧人網(wǎng)友學習,文章及圖片版權(quán)歸原作者所有,如果有侵犯到您的權(quán)利,請及時聯(lián)系我們刪除(010-82893169-805)。