豆粕脲酶活性的快速測定及其對肉用仔雞生長的影響

和興

豆粕脲酶活性的快速測定及其對肉用仔雞生長的影響

　　 飼用豆粕的脲酶活性是衡量豆粕營養(yǎng)價值的重要指標(biāo)之一。我國國家標(biāo)準(zhǔn)（GB10380-90）將脲酶活性定義為：在30℃±5℃和pH值等于7的條件下每分鐘每克大豆粕分解尿素所釋放的氨態(tài)氮的毫克數(shù)，并且規(guī)定大豆粕的脲酶活性不得超過0.4，即U＜0.4。常用的脲酶活性測定方法有國標(biāo)法（GB8622-88）、pH增值法（△pH）和尿素—酚紅快速測定法等。 1 材料與方法 1.1 豆粕的選擇 　　豆粕來自同一產(chǎn)地，粗蛋白含量一致，用上述尿素—酚紅測定法選出4種豆粕，并用國標(biāo)法、△pH法測出相應(yīng)數(shù)值，配成全價顆粒料后，再采樣按相應(yīng)方法測定脲酶活性（結(jié)果見表1）。

表1 豆粕及顆粒料脲酶活性的測定值

項目	豆粕			顆粒料
	快速法	國標(biāo)法	△pH法	快速法	國標(biāo)法	△pH
1	5%~10%紅點	0.0929	0.070	1%~2%　淡紅	0.0572	0.105
2	20%紅點	0.160 5	0.265	10%紅點	0.0724	0.142
3	30%紅點	0.318 6	0.413	10%~15%紅點	0.0771	0.150
4	40%紅點	0.492 0	0.550	20%紅點	0.0806	0.183

1.2 本次試驗所采用的尿素—酚紅快速測定法操作步驟 1.2.1準(zhǔn)備好0.2N的稀硫酸，帶滴管。 1.2.2配制尿素—酚紅試劑①將1.2g酚紅溶解于30ml0.2mol/l的NaOH中，用蒸餾水將之稀釋至約300ml；②加入90g尿素并溶解之，并用蒸餾水稀釋至2L；③加入70ml0.2mol/l的硫酸，用蒸餾水稀釋至最后體積3L，溶液為明亮琥珀色。 1.2.3豆粕樣品粉碎通過16目標(biāo)準(zhǔn)篩，取大約30g均勻鋪于平底培養(yǎng)皿，滴入尿素—酚紅試劑將豆粕充分浸潤，放置5min后立即觀察：①豆粕表面出現(xiàn)約5%—10%紅點，可認(rèn)為脲酶活性較低；②豆粕表面出現(xiàn)約20%~30%紅點，脲酶活性稍高；③豆粕表面出現(xiàn)約40%以上紅點，脲酶活性很高，豆粕夾生較多；④若沒有紅點出現(xiàn)，再放置25min后仍無出現(xiàn)，說明豆粕過熟。 　　本次試驗的目的旨在探討該尿素—酚紅快速測定法與國標(biāo)法、△pH法的相關(guān)程度，并將不同脲酶活性的豆粕制成全價日糧后飼喂肉用仔雞，考察其對生長性能的影響，以驗證該測定方法的科學(xué)性、實用性。 1.3 日糧配方及營養(yǎng)水平見表2

表2 日糧配方及營養(yǎng)水平

原料	配比 %	營養(yǎng)成分	水平
玉米	57.2	代謝能（MJ/kg）	13.05
豆粕	31.7	粗蛋白（%）	20.6
秘魯魚粉	3	鈣（%）	1.02
大豆油	4	總磷（%）	0.68
石粉	0.9	非植酸磷（%）	0.45
磷酸氫鈣	1.4	賴氨酸（%）	1.15
食鹽	0.3	蛋氨酸+胱氨酸（%）	0.95
預(yù)混料	1.5

注：預(yù)混料中包含有多維、微量元素、合成氨基酸、抗球蟲藥等。 1.4 試驗雞的選擇與分組 　 將相同來源的1日齡艾維茵健康雛雞400只隨機(jī)分成4組，每組設(shè)兩個重復(fù)，每個重復(fù)50只，各組體重差異不顯著。分別飼喂上述4組豆粕制成的肉用仔雞全價顆粒料。試驗時間21天。 1.5 飼養(yǎng)管理 　 采用地面平養(yǎng)，用細(xì)木刨花做墊料，紅外線燈保溫，自由采食和飲水。按正常免疫程序進(jìn)行免疫接種。各組飼養(yǎng)管理條件一致。 １.6 檢測項目 　采食量、增重、耗料增重比、拉稀糞情況、成活率。 2. 試驗結(jié)果 2.1 試驗結(jié)果見表3

表3 0周齡~3周齡肉用仔雞生長性能

項目	末體重（g/只）	日增重?。?/font>g/只）	日采食量?。?/font>g/只）	料重比	成活率%
1	753.51	34.07	52.38	1.54	100
2	753.80	34.09	51.90	1.52	100
3	692.65	31.17	52.85	1.69	97
4	648.92	29.09	48.33	1.64	95

2.2 從表3可以看出，第1、2組的平均日增重分別為34.07g/只和34.09g/只，組間差異不顯著（P＞0.05），第3、4組的平均日增重分別為31.17g/只和29.09g/只，組間差異不顯著（P＞0.05），但第1、2組與第3、4組間差異顯著（P＜0.05），說明脲酶活性紅點多于30%的豆粕影響肉用仔雞的日增重。 2.3 從各組日采食量看，第4組日采食量均比其它組的低（P＞0.05），盡管差異不顯著，但反映了用高脲酶活性豆粕的日糧導(dǎo)致肉用仔雞采食量下降的趨勢。 2.4 從飼料報酬方面看，第1、2組間差異不顯著（P＞0.05），第3、4組間差異不顯著（P＞0.05），但第1、2組與第3、4組間差異顯著（P＜0.05），說明脲酶活性高的豆粕降低了肉用仔雞的飼料利用率。 2.5 從成活率方面看，第1、2組均達(dá)到100%，第3組有3%死亡，第4組有5%死亡，死亡雞只均為拉稀導(dǎo)致體質(zhì)衰弱而死亡，反映了采食脲酶活性高的豆粕會導(dǎo)致仔雞消化不良，引起拉稀，影響生長。 2.6 從糞便情況看，第4組由于拉稀較多，更換墊料的次數(shù)比其它組要多，特別是試驗后期（17日齡~21日齡），每天更換墊料1次。 3 試驗小結(jié) 3.1 通過本次試驗，可知豆粕的脲酶活性用尿素—酚紅快速測定法測定，5min內(nèi)出現(xiàn)5%~20%紅點的，對肉用仔雞的生長無不良影，出現(xiàn)30%~40%以上紅點的，對肉用仔雞的生長產(chǎn)生不良影響，主要表現(xiàn)為拉稀增多，采食量下降，增重下降。 3.2 尿素—酚紅快速測定法與國標(biāo)法、△pH法存在正相關(guān)關(guān)系：即5%~10%紅點的豆粕U≈0.1，△pH≈0.07；20%紅點的豆粕，U≈0.16，△pH≈0.27；30%紅點的豆粕，U≈0.3，△pH≈0.41；40%紅點的豆粕，U≈0.5，△pH≈0.55。豆粕用于全價飼料后，飼料的脲酶活性并不等于豆粕的脲酶活性與豆粕在飼料中所占比例的乘積，但是全價飼料的脲酶活性在一定程度上可以反映所用豆粕的生熟程度。 3.3 根據(jù)本次試驗，該尿素—酚紅快速測定法所用判斷標(biāo)準(zhǔn)是可行的，并可以與國標(biāo)法聯(lián)系起來，即U值在0.3范圍內(nèi)的豆粕，可以允許在肉用仔雞小雞階段飼料中使用，U＞0.3的豆粕，最好不用于小雞階段，以免影響生長性能。建議夾生豆粕最好經(jīng)過烘炒后再使用。 3.4 應(yīng)用該方法時豆粕紅點比例的判斷，化驗人員需要經(jīng)過反復(fù)實踐才能熟練掌握。