人工授精是現(xiàn)代畜牧生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用的重要技術(shù)措施,實(shí)踐證明,它可以最大限度地利用優(yōu)秀種公豬,提高畜群質(zhì)量,減少公畜飼養(yǎng)費(fèi)用。豬的人工授精技術(shù)包括采精、精液品質(zhì)檢查、精液的稀釋與分裝、精液的保存與運(yùn)輸、輸精等技術(shù)環(huán)節(jié)。為規(guī)范我省豬人工授精操作,保證受胎效果,特制定本操作規(guī)程。
1 .采精前的準(zhǔn)備
1.1采精場應(yīng)選擇在寬敞、平坦、清潔、安靜的地方,以室內(nèi)為宜。
1.
2設(shè)立假臺(tái)畜供公豬爬跨進(jìn)行采精。假臺(tái)畜可用鋼材或木材制作,高60-70厘米,寬25-30厘米,長100-120厘米架,背鋪上適當(dāng)厚度的麥草或棉花等有彈性的軟物,外面包一張經(jīng)過處理的豬皮或橡膠皮,以利清洗消毒。
1.3一切與精液接觸的器皿和用具(如集精瓶、紗布等)必須嚴(yán)格清洗消毒好備用 1.4采精前將稀釋液配好,置于30ºC恒溫箱內(nèi)備用。寒冷季節(jié)里也要放入恒溫箱中預(yù)熱。
2.公豬的調(diào)教
對于初次用假臺(tái)畜采精的公豬必須進(jìn)行調(diào)整,建議調(diào)教方法為(1)在假臺(tái)畜后軀涂抹發(fā)情母豬的陰道粘液或尿液,引起公豬性欲而誘導(dǎo)其爬跨假臺(tái)畜,經(jīng)幾次采精后即可調(diào)教成功;(2)在假臺(tái)畜旁邊牽一頭發(fā)情母豬,引起公豬性欲和爬跨后,不讓交配而把公豬拉下來,反復(fù)數(shù)次,待公豬性沖動(dòng)至高峰時(shí),迅速牽走母豬,誘導(dǎo)公豬直接爬跨假臺(tái)畜;(3)將待調(diào)教的公豬栓系在假臺(tái)畜附近,讓其目睹另一頭已調(diào)教的公豬爬跨假臺(tái)畜,然后誘其爬跨。
2.
采精頻率
公豬每次射精排出大量精液,使附睪中貯存的精液排空,而公豬體內(nèi)精子的再生產(chǎn)與成熟又需要一定時(shí)間,因此,采精最好隔日一次,也可以采精兩天休息一天,青年公豬(1歲)和老年公豬(4歲以上)以每三天采精一次為宜。
4.采精方法
徒手采精是目前采用最廣泛、有效最好的一種方法。具體操作方法是:采精員右手戴上消毒的乳膠手套,蹲在假臺(tái)畜左后側(cè),等公豬爬跨后,用0.1%的高錳酸鉀溶液將公豬包皮極其周圍皮膚洗凈消毒,當(dāng)公豬陰莖伸出時(shí),既用右手手心向下握住公豬陰莖前的螺旋部,不讓陰莖來回抽動(dòng),并順勢小心地把陰莖全部拉出包皮外,掌握陰莖的松緊度以不讓陰莖滑脫為準(zhǔn),手指有彈性而有節(jié)奏調(diào)節(jié)壓力,刺激性欲,并將拇指和食指稍微張開露出陰莖前端的尿道外口,以便精液順利射出。這時(shí)左手持帶喲過濾紗布的保溫的集精瓶收集精液。起初射出的精液多為精清,且?;煊心蛞汉团K物,不宜收集,待射出乳白色精液時(shí)再收集。同時(shí)用拇指隨時(shí)撥除排出的膠狀物,以免影響精液過濾。公豬第一次射精停止,再重復(fù)上述手法促使公豬第二、三次射精,直至射完為止。待公豬射完精后,采精員順勢用手將陰莖送入包皮內(nèi),并將公豬慢慢地從假臺(tái)畜上趕下來,采集的精液應(yīng)迅速放入30º的保溫箱或恒溫水浴鍋中,以防溫度變化。
1射精量:公豬的射精量平均為250毫升,每次射出的精子總數(shù)約200-800億。射精量可從集精瓶的刻度上直接讀出,
2顏色和氣味:正常的公豬精液顏色是乳白色或灰白色,具有一種特殊的腥味。精液乳白色程度越高,表明精子數(shù)量越多。顏色和氣味異常的精液不宜使用。
3.
PH值:公豬精液正常的PH值在6.8-7.8之間,呈弱堿性,可用“萬能試紙”進(jìn)行測定。
4.
精子密度:是指每毫升精液中所含的精子總數(shù)。豬的精子密度比較稀,平均每毫升1-2億。用估測法在顯微鏡下觀察,根據(jù)視野內(nèi)精子分布情況評為密、中、稀三級。密:精子密集,精子間的距離小于1個(gè)精子(每毫升約3億);中:精子間能容納1-2個(gè)精子;?。壕娱g距離很大,能容納2個(gè)以上精子(約一億)。
精子密度比較精確的檢查方法是用血球計(jì)數(shù)器來計(jì)數(shù)。操作方法是:用白血球吸管吸取精液至0.5刻度處(稀釋20倍),再吸取3%的氯化鈉溶液至11刻度處;用拇指和食指按住吸管的兩端搖勻,棄去前端一滴,然后緩慢地沿計(jì)數(shù)器板與蓋玻片邊緣空隙,讓精液自動(dòng)滲入計(jì)數(shù)室內(nèi),到滲滿為止,不能有氣泡,在顯微鏡載物臺(tái)上靜置3分鐘,讓精子沉淀后進(jìn)行鏡檢;鏡檢時(shí)先用低倍顯微鏡找到400個(gè)小方格組成的25個(gè)中方格的計(jì)數(shù)室,然后用高倍顯微鏡找到中方格,計(jì)算四角的中央的共五個(gè)中方格(既80個(gè)小方格)中的精子數(shù),計(jì)數(shù)時(shí),壓在中方格邊線上的精子計(jì)上不計(jì)下,計(jì)左不計(jì)右。用以下公式計(jì)算: 每毫升精液中的精子總數(shù)=5個(gè)中方格的精子數(shù)×1000000(注:按稀釋20倍計(jì))
5.精子活力:是指精子的運(yùn)動(dòng)能力,用鏡檢視野中呈直線運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)占精子總數(shù)的百分比來表示。檢查方法是:取一滴精液在載玻片上,使充滿精液且無氣泡,然后放在顯微鏡下放大150-200倍,計(jì)算一個(gè)視野中呈直線運(yùn)動(dòng)的精子數(shù)目,來評定等級。一般分為十級,100%的精子都是直線運(yùn)動(dòng)為1.0級,90%為0.9級,80%的為0.8級,依次類推?;盍υ?/font>0.5級以下的精液不宜使用。檢查時(shí)環(huán)境溫度宜在37-38ºC,通常在保溫箱中進(jìn)行,內(nèi)裝15-25W的燈泡。精子活力是精液檢查的主要指標(biāo),應(yīng)與采集后、稀釋后、輸精前后分別做出檢查。
6.畸形精子率;正常精子形似蝌蚪,凡精子形態(tài)為卷尾、雙尾、折尾、無尾、大頭、小頭、長頭、雙頭、大頸、長頸等均為畸形精子?;尉拥臋z查方法是:取原精液一滴,均勻涂在載玻片上,干燥1-2分鐘后,用95%的酒精固定2分鐘,用蒸餾水沖洗,再干燥片刻后,用美藍(lán)或紅藍(lán)墨水染色3分鐘,再用蒸餾水沖洗,干燥后即可鏡檢。鏡檢時(shí),通常計(jì)算500個(gè)精子中的畸形精子數(shù),求其百分率,一般豬的畸形精子率不能超過18%。
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1.
稀釋液的配制
精液稀釋液應(yīng)當(dāng)天用當(dāng)天配,隔天不得再用。建議配方:
配方1 鮮奶或奶粉稀釋液;將新鮮牛奶通過3-4層紗布,過濾兩次,裝在三角燒瓶或燒杯內(nèi),放在水鍋里,煮沸消毒10-15分鐘后取出,冷卻后,除去浮在上面的乳皮,重復(fù)二到三次即可使用,奶粉稀釋液配制方法同上,按1克奶粉加水10毫升的比例配制。
配方2 糖-檸-卵稀釋液:取食用蔗糖5克,加蒸餾水到100毫升,煮沸消毒,冷卻;取上述溶液97毫升,加入新鮮蛋黃3毫升,充分混合后待用。
配方3 葡萄糖稀釋液:取無水葡萄糖5克,檸檬酸鈉0.3克,乙二胺四乙酸二鈉0.1克,加蒸餾水到100毫升。
上述各種稀釋液,在稀釋時(shí)按每毫升加入青霉素200單位和鏈霉素200微克。
配方4 Modena(摩得娜)溶液:取葡萄糖(右旋糖)27.5克,檸檬酸鈉6.9克,碳酸氫鈉1克, ,乙二胺四乙酸二鈉2.35克,檸檬酸2.9克二羥甲(基)氨基甲烷5065克,硫酸多粘霉素(B)0.0169克,硫酸慶大霉素0.15克,用蒸餾水配到1000毫升。
2.
稀釋方法
稀釋倍數(shù)主要根據(jù)精液的密度而定,一般為2-3倍,通過稀釋后,每毫升應(yīng)含的精子數(shù)不低于0.4億。稀釋精液時(shí),應(yīng)測量原精液的溫度,調(diào)整稀釋液的溫度,兩者溫度差不超過2ºC,然后慢慢將稀釋液沿瓶壁倒入精液,輕輕的攪拌混勻。
3精液的標(biāo)記
不同品種豬的精液加不同顏色的無毒色素,以標(biāo)記品種,建議杜洛克加紅色,大約克加綠色,長白加黃色,地方品種無色。
4稀釋后精液的分裝
稀釋的精液需檢查精子的活力,若證明稀釋的過程沒有問題,可以進(jìn)行分裝。用消毒過的漏斗把稀釋后的精液分裝入貯精瓶內(nèi),每瓶裝20或25毫升,裝完后用瓶塞加蓋,貼上標(biāo)簽,標(biāo)明公豬號、采精時(shí)間、精液數(shù)量等,再用白蠟加封瓶口,分發(fā)使用或進(jìn)行貯藏。
精液的保存方法常用的有常溫和低溫保存兩種,常溫保存指在15-20ºC室溫下保存精液,一般可保存2-3天。方法是:將分裝包好的貯精瓶裝在塑料袋里,浸在冷水中每天換水一次,或放入廣口保溫瓶中,用膠皮管通入不斷循環(huán)的自來水,獲得較好的常溫恒溫效果;或把包裝好的精液放入塑料桶內(nèi),系上繩子沉于水井或地窖保存。低溫保存是指在有冰箱或冰源條件下在0-5ºC保存精液。方法是:將分裝包好的貯精瓶用紗布包裹好,放入冰箱低層,經(jīng)5-10分鐘后移入冰箱中層保存。在沒有冰箱設(shè)備的地方可用廣口瓶(冰壺)裝入冰塊作冰源,將包裹好的貯精瓶放入廣口保溫瓶,定期傾取瓶內(nèi)的融化的冰水,添加冰塊,保持恒溫。在冰源缺乏的條件下,可用食鹽10克溶解于1500毫升冷水中,加入氯化銨400克,配好后裝入保溫瓶中,溫度可降到2ºC左右,造成低溫條件保存精液。
精液運(yùn)輸-是地區(qū)之間交換精液,擴(kuò)大良種利用率,加速豬種改良,保證人工輸精順利進(jìn)行的必要環(huán)節(jié)。精液運(yùn)輸中精液保存條件一致,切記溫度發(fā)生劇烈變化并防止運(yùn)輸過程中震蕩造成精子死亡??捎脧V口瓶或疫苗貯運(yùn)箱(盒)運(yùn)輸精液,運(yùn)輸時(shí)間盡可能縮短。
1.
輸精器具:經(jīng)過消毒的30-50毫升玻璃注射器、豬用輸精管、紗布。
2.
輸入精液的質(zhì)量:輸精前,應(yīng)對保存后的稀釋精液進(jìn)行品質(zhì)檢查,精子活力不低于0.5級的精液方可用來輸精。輸精時(shí)精液溫度要求為35ºC,保存的精液需逐步緩慢升溫。
3.
輸精操作:先用自來水清洗母豬陰部,最好再用高錳酸鉀溶液消毒
4.
一下,將輸精管涂以少許稀釋液或精液使之潤滑,將輸精管先稍斜向上方,然后水平方向插入豬陰戶,邊旋轉(zhuǎn)邊插入,待遇到阻力后,稍停頓,輕輕刺激子宮頸口約10-20秒左右,可感到子宮頸口已開張,輸精管可繼續(xù)向內(nèi)深入,直至插入子宮內(nèi)不能前進(jìn)為止,然后向外拉動(dòng)一點(diǎn),輸精員右手持注射器,緩慢將精液注入子宮內(nèi)。輸完后緩慢抽出輸精管,并用手掌按壓母豬腰薦結(jié)合部,防止精液倒流。輸精后,可使母豬緩慢行走,防止排尿,趕回圈舍休息一小時(shí)后可喂食。一般母豬一個(gè)情期輸精兩次,輸精量為每次20-25毫升,每次精子數(shù)不少于8億,兩次間隔8-12小時(shí),輸精后,應(yīng)立即填寫配種卡片,做好配種記錄。
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