如何檢測(cè)飼料原料中的非蛋白氮

xinhongsi

現(xiàn)在原料中攙假嚴(yán)重,給飼料廠家?guī)?lái)很大損失和麻煩.誰(shuí)有好辦法,用飼料廠常用化驗(yàn)設(shè)備很好地檢測(cè)非蛋白氮

dongnongzz

給你提供一點(diǎn)魚(yú)粉摻非蛋白氮的檢驗(yàn)方法
8．魚(yú)粉中摻尿素的檢驗(yàn)
      方法1
稱取10克樣品于燒杯中，加入100ml蒸餾水中攪拌，取濾液1ml于點(diǎn)滴板上，加2-3滴甲基紅指示劑，再滴加2-3滴尿素酶溶液（或用生黃豆粉水溶液代替尿素酶溶液，生黃豆粉中含有尿素酶），約經(jīng)5分鐘，如點(diǎn)滴板上呈深紅色。則說(shuō)明樣品中摻有尿素。
尿素酶溶液的配制：稱取0.2g尿素酶，溶解于100ml 95%的乙醇中。
  甲基紅指示劑的配制：稱取甲基紅0.1g，溶解于95%的乙醇中。
    方法2
無(wú)尿素酶藥品時(shí)，則可用此方法檢驗(yàn)。取兩份105g魚(yú)粉于兩支試管中，其中一支加入少許黃豆粉，兩管各加蒸餾水5ml，震蕩，置60-70℃恒溫水浴中3分鐘，滴6-7滴甲基紅指示劑，若加黃豆粉的試管中出現(xiàn)較深紫紅色，則說(shuō)明魚(yú)粉中有尿素。
    方法3
稱取10g魚(yú)粉樣品,置 于150ml三角瓶中,加入50ml的蒸餾水,加塞用力振蕩2-3分鐘,靜置,過(guò)濾,取濾液5ml,于20ml的試管中，將試管放酒精燈灼燒，當(dāng)溶液蒸干時(shí),可嗅到強(qiáng)烈的氨臭味.同時(shí)把濕潤(rùn)的PH試紙放在管口處,試劑立即變成紅色，此時(shí)PH植高達(dá)近14。如果純魚(yú)粉則無(wú)強(qiáng)烈的氨氣味，置于管口處的PH試紙稍有堿性反應(yīng)，微顯藍(lán)色，離開(kāi)管口處則慢慢退去。
      9．魚(yú)粉中摻入雙縮脲的檢驗(yàn)
稱取魚(yú)粉試樣2g，加20ml蒸餾水，充分?jǐn)嚢?，靜止10分鐘，干燥濾紙過(guò)濾，取濾液4ml于試管中，加6moL/L氫氧化鈉溶液1ml，再加入1.5%CaSO4溶液1ml，搖勻，立即觀察，溶液呈藍(lán)色則魚(yú)粉沒(méi)有摻入雙縮脲，若呈紫紅色，則魚(yú)粉中摻有雙縮脲，紅色越深，摻入雙縮脲的比例越大。

秋葉

測(cè)真蛋白就可以了
真蛋白測(cè)定方法
1、原理
      硫酸銅在堿性溶液中，可將蛋白質(zhì)沉淀，且不溶于熱水過(guò)濾和洗滌后，可將純蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)含蛋物分離，再用凱氏定蛋法測(cè)定沉淀中的蛋白質(zhì)含量。
2、儀器設(shè)備
      （1）燒杯：200ml。
      （2）定性濾紙。
      （3）其他設(shè)備與粗蛋白質(zhì)測(cè)定法的相同。
3、試劑及配制
      （1）100g/L硫酸銅溶液：分析純硫酸銅（CuSO4·5H2O）10g溶于100mL蒸餾水中。
      （2）25g/L氫氧化鈉溶液：將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100mL蒸餾水中。
      （3）10g/L氯化鋇溶液：1g氯化鋇（BaCl·H2O）溶于100mL蒸餾水中。
      （4）2moL/鹽酸溶液。
      （5）其他試劑預(yù)一般粗蛋白測(cè)定法的相同。
4、測(cè)定步驟
               準(zhǔn)確稱取試樣1g左右（精確到0.0001g），置于200mL燒杯中，加50mL蒸餾水，加熱至沸，加入20mL硫酸銅溶液，20mL氫氧化鈉溶液（加入以上兩種溶液多要緩慢，且要邊加入邊攪拌），用玻璃棒充分?jǐn)嚢?，放?h以上，用傾斜過(guò)濾（用定型濾紙），然活后用60~80℃熱蒸餾水洗滌沉淀5~6次，用氯化鋇溶液5滴和鹽酸溶液1滴檢查濾液，直至不生成白色沉淀為止。將沉淀和濾紙放在65℃烘箱干燥2h，然后全部轉(zhuǎn)移到凱氏燒瓶中，消化后進(jìn)行定蛋測(cè)定。
5、結(jié)果計(jì)算
       同粗蛋白測(cè)定。

haochunqing

現(xiàn)在測(cè)真蛋白沒(méi)作用了，好多非蛋白氮是不溶于水的。

尚天有道

非蛋白氮的檢驗(yàn)：水解蒸餾法        原理非蛋白氮主要包括以下五類(lèi)：尿素及其衍生物類(lèi)、氨態(tài)氮類(lèi)、銨類(lèi)、肽類(lèi)及其衍生物、動(dòng)物糞便及其它廢棄物類(lèi)。如果在原料中摻有氨態(tài)氮類(lèi)、銨類(lèi)和糞便比較容易判斷（可采用硫酸銅沉淀法加鏡檢），一般很少將肽類(lèi)及其衍生物摻入其中，剩下比較難鑒別的就是尿素及其衍生物。
          尿素和尿素衍生物經(jīng)過(guò)強(qiáng)酸或強(qiáng)堿水解為氨鹽或氨和其它的物質(zhì)，在強(qiáng)堿的條件下可以蒸餾出氨氣，原料中的蛋白質(zhì)經(jīng)過(guò)水解成氨基酸鹽，氨基酸鹽在強(qiáng)堿條件下穩(wěn)定，從而可將非蛋白氮和真蛋白氮進(jìn)行分離。儀器和設(shè)備：酒精噴燈，試管和其它常用的儀器。試劑與溶液：6mol／1的鹽酸溶液和其它常用的試劑。
測(cè)定方法：酸水解法。 
1、采樣品約100g，混勻后用四分法縮分出20g左右，將其粉碎，使其全部通過(guò)60目樣品篩。
2、精確稱取0.3000g的樣品，置于容積為 60ml的試管底部（注意樣品勿沾在管壁上），加入30ml  6mol／l的鹽酸溶液，將試管在距試管口 l～2cm處用噴燈加熱并封口。
3、將封好的試管置于干燥箱內(nèi)，于110℃下水解24h。
4、冷卻后打開(kāi)試管，將水解液過(guò)濾至100ml容量瓶中，用蒸餾水反復(fù)多次沖洗試管和濾紙，然后定容至刻度。
5、用10ml移液管移取10ml樣液移入半微量式定氮儀的反應(yīng)室中，加入20ml 1:1的氫氧化鈉溶液蒸餾10  min，余下的步驟按照測(cè)定粗蛋白的方法進(jìn)行操作，得出樣品所消耗的鹽酸的體積為V1（ml）。同時(shí)作空白滴定可得消耗的鹽酸的體積為V0，設(shè)所稱樣品的質(zhì)量為M（g）。  
  非蛋白氮的粗蛋白質(zhì)計(jì)算公式:   CP(%)＝(V1-VO)×C×O.14×6.25/ M  

尚天有道

以前看到過(guò)，自己沒(méi)有用過(guò)！可以試一試！自我感覺(jué)還可以！所以收藏至今！

dongnongzz

定量檢測(cè)要求設(shè)備很高的,不知道大家注意到?jīng)]有!

nonddy

上邊的方法太繁瑣，來(lái)點(diǎn)簡(jiǎn)單的??！
3.3 TCA分離可溶蛋白
(1) 稱0.5g左右的干燥試樣放入125ml的錐形瓶中 (2) 加入50ml蒸餾水，靜置30分鐘 (3) 加入10ml10%的三氯乙酸，靜置20-30分鐘 (4) 用54或者541目的濾紙過(guò)濾 (5) 用三氯乙酸溶液沖洗錐形瓶?jī)纱?(6) 把殘?jiān)D(zhuǎn)移至凱氏管內(nèi)測(cè)定其氮得到NPN

wujianping992

了解了解啦?。。。。。。。。。。。?！

xinhongsi

請(qǐng)教haochunqing老師：您認(rèn)為有什么好法來(lái)測(cè)不容于水的非蛋白氮？