2007年9月,重慶某豬場持續(xù)發(fā)生以發(fā)熱、呼吸困難、關節(jié)腫脹為主要特征的疫情,豬場按各公司推薦的多種針對“高熱病”的藥物和方案進行處理,病情未得到控制,最后通過實驗室進行病原檢測,確診為豬圓環(huán)病毒、豬巴氏桿菌及副豬嗜血桿菌混合感染,經篩選敏感藥物以采取針對性的綜合防控措施控制了疫情。1 發(fā)病情況
2007年9月初,重慶某規(guī)?;i場哺乳仔豬和保育階段的小豬持續(xù)發(fā)生以體溫升高、呼吸困難、皮膚發(fā)紅或蒼白、厭食、消瘦、嗜睡和神經癥狀、下痢、關節(jié)腫脹、跛行為特征的疫病,豬場先后按多家飼料公司、獸藥廠技術員推薦的豬“高熱病”治療藥物和控制方案進行處理,用過治療呼吸道疾病的氟苯尼考、林可霉素、阿莫西林、鏈霉素、土霉素、慶大霉素、黃芪多糖等藥物,用藥后病情時好時差,效果不明顯,該病發(fā)病率達50%以上,病死率達30%~50%。
2 臨床表現(xiàn)
病豬精神沉郁,體溫升高達40℃~41.5℃ ,呼吸困難,流漿液性鼻液、食欲減退,身體極度消瘦、被毛粗亂無光呈“毛毛豬”,耳部、四肢及腹部皮膚明顯發(fā)紅,少數(shù)皮膚異常蒼白或發(fā)黃,拉黃色稀糞和茶色尿;站立困難、跛行或蹲伏不動、腕關節(jié)和跗關節(jié)明顯腫脹;部分豬有轉圈、四肢劃水狀運動等神經癥狀,觸摸腹股溝淋巴結腫大。
3 剖檢病變
淋巴結腫大,尤其是腹股溝淋巴結腫大明顯,切面出血或灰白色;心包有大量淡黃色透明液體,部分腹腔充滿淡黃色腹水,纖維素性胸膜炎和纖維索性腹膜炎,腹腔黏附較厚的白色纖維素性滲出物;肺有充血、出血或蒼白萎縮,間質增寬;肝臟腫大易脆,脾臟腫大、邊緣有小鋸齒狀突起,腎腫腫大出血有白色壞死灶,膀胱內潴留茶色尿液,膀胱底部和胃底部有不同程度充血,腕關節(jié)和跗關節(jié)腫大發(fā)紅,關節(jié)腔內有透明膠凍樣液體;扁桃體充血,腦膜充血、出血。
4 實驗室診斷
4.1 細菌學診斷
4.1.1 直接涂片觀察 無菌取病豬的心、肝、脾、肺、腎臟、淋巴結、心包液、腹水和關節(jié)液直接涂片,經革蘭氏染色,鏡下可見有兩種革蘭氏陰性細菌,一種呈現(xiàn)明顯兩極染色的球桿菌,另一種為大小不等,短小桿狀、球桿形、絲狀等多種不同形態(tài)細菌。肺、腎、脾和心包液細菌數(shù)量相對較多。
4.1.2 細菌分離鑒定 無菌取剖檢病豬的心、肝、脾、肺和腎接種于鮮血瓊脂平板和巧克力平板,在37℃培養(yǎng)觀察,24小時后在兩種平板上均可見到光滑、圓形,邊緣整齊的白色菌落,不溶血,革蘭氏染色陰性,兩極濃染的球桿菌,經生化鑒定為巴氏桿菌。繼續(xù)培養(yǎng)48小時后在兩種平板上又長出另一種邊緣整齊、圓形透明、針尖大小的菌落,沒有溶血現(xiàn)象,染色可見短小桿狀、球桿形、絲狀等不同形態(tài)的細菌,進行生化鑒定為副豬嗜血桿菌。
4.1.3 動物試驗將兩種細菌用TSB肉湯增菌培養(yǎng),各取0.5毫升腹部皮下接種2只小鼠,小鼠于10小時左右開始發(fā)病,表現(xiàn)為弓背彎腰,被毛豎立,呼吸困難,腹部扇動劇烈。接種巴氏桿菌的小鼠有1只于接種后10小時死亡,另1只于接種后24小時死亡;接種副豬嗜血桿菌組均在接種后48小時死亡,從死亡小鼠肝臟觸片和分離培養(yǎng)物中均可見到大量細菌。
4.2 藥敏試驗
將兩種細菌液分別涂布于巧克力瓊脂平板,以紙片法進行藥敏感試驗,藥敏試驗的藥物包括氟苯尼考、丁胺卡那霉素、紅霉素、頭孢噻呋鈉、氟哌酸、氨芐青霉素、卡那霉素、慶大霉素、環(huán)丙沙星、氧氟沙星、強力霉素、四環(huán)素、復方新諾明、先鋒V等14種。
結果表明,巴氏桿菌對丁胺卡那霉素高度敏感,對氧氟沙星、環(huán)丙沙星、先鋒V中度敏感,對其他9種藥不敏感;副豬嗜血桿菌對丁胺卡那霉素、頭孢噻呋鈉高度敏感,對氧氟沙星、環(huán)丙沙星中敏,對其他10種藥不敏感。
4.3 病毒的檢測
用IDXXX公司的ELISA試劑盒檢測10頭發(fā)病豬血清,豬瘟強毒陰性(0/10),gE-ELISA檢測豬偽狂犬病強毒抗體陰性(0/10),有5份血清為豬圓環(huán)病毒2型(PCV-2)抗體陽性(5/10);取3頭癥狀典型病豬的肺臟、淋巴結和脾抽提核酸用RT-PCR檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)全部為陰性。
4.4 弓形蟲和附紅細胞體的檢測
取病豬的肝、脾、肺臟和淋巴結做成涂片,用姬姆薩和瑞氏染色,于油鏡下觀察,未見弓形蟲。取病豬耳靜脈血1滴于載玻片上,加等量生理鹽水稀釋后,蓋上蓋玻片,在顯微鏡下沒有發(fā)現(xiàn)附紅細胞體。根據(jù)以上臨診斷癥狀、剖檢病變和實驗室檢測結果,綜合判定該豬場發(fā)病是由豬圓環(huán)病毒2型、巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌混合感染引起。
5 治療措施
5.1 注射給藥
立即隔離發(fā)病豬和疑似發(fā)病豬,肌肉注射組合藥物(干擾素+清開靈注射液+丁氨卡那霉素+氨基比林+維生素C),連續(xù)用4~5天;對關節(jié)腫脹嚴重的豬用組合藥物(丁氨卡那霉素+氨基比林+維生素C+地塞米松)直接注射到關節(jié)腔內,連用3天;飲水中加入氧氟沙星或環(huán)丙沙星,電解多維等讓豬自由飲用。
5.2 飼料加藥
在每噸飼料中添加藥物(金霉素300克+支原凈125克+磺胺間甲氧嘧啶500克+小蘇打500克+黃芪多糖500克),全群飼喂10天。
5.3 飲水給藥
給豬清潔飲水,在水中加入氧氟沙星或環(huán)丙沙星,電解多維等讓豬自由飲用。
5.4 加強環(huán)境消毒和飼養(yǎng)管理
在發(fā)病期間堅持1天消毒1次,同時保持圈舍通風,適當降低飼養(yǎng)密度,減少應激。病豬經治療處理后第3天明顯好轉,1周后控制了疫情。
6 小結
我國許多養(yǎng)豬場環(huán)境污染嚴重,豬病非常復雜,以多病原混合感染和繼發(fā)感染為主,豬場濫用抗生素導致許多病原性細菌已產生廣泛耐藥性,發(fā)病后用藥效果不理想。診斷豬病要結合流行病學、臨床癥狀、剖檢病變以及實驗室診斷進行綜合判定才能確診,否則只會誤診和漏診,導致延誤治療時機和加大損失。本次疫情通過全面診斷尤其是借助實驗室檢測技術,準確弄清了發(fā)病原因為豬圓環(huán)病毒2型、巴氏桿菌和副豬嗜血桿菌混合感染引起,采取針對性控制措施取得很好效果。
豬圓環(huán)病毒是一種免疫抑制性病原,可導致免疫失敗和繼發(fā)多種細菌感染,是引起斷奶仔豬發(fā)生多系統(tǒng)衰竭綜合征的主要病原,在我國豬場感染非常普遍,例如在2006年發(fā)生豬“高熱病”的很多豬場都分離到該病毒。該病還沒有理想的疫苗用于預防,據(jù)報道一些豬場采用自家組織滅活疫苗有一定的控制效果,但制作和使用自家苗一定要慎重和按相關規(guī)定操作,否則可能給豬場帶來新的問題。當豬群感染圓環(huán)病毒時主要采取以控制細菌繼發(fā)感染為主的治療方案,如本次分離到的巴氏桿菌與副豬嗜血桿菌對小鼠具有很強致死性,顯然是引起豬大量死亡的最主要原因,通過篩選敏感藥物進行治療效果非常明顯。為了防控豬圓環(huán)病毒給豬場造成更大損失,平時一定要加強飼養(yǎng)管理、減少豬群應激、加強生物安全措施、搞好重大豬病如豬瘟、豬偽狂犬病等的免疫接種和抗體監(jiān)測等工作。
作者 四川農業(yè)大學動物醫(yī)學院動物傳染病與基因芯片室 黃小波,四川農業(yè)大學資源環(huán)境學院 曹三杰、劉伍梅,重慶市武隆縣畜牧局 陳朝紅 |
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