豬繁殖與呼吸綜合征的控制與凈化
豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是世界范圍內(nèi)一種嚴重危害養(yǎng)豬業(yè)的傳染病,也是目前我國規(guī)模化豬場的主要傳染病,給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失[1,2]。PRRS臨床上表現(xiàn)為生產(chǎn)母豬的繁殖障礙以及各階段豬的呼吸道癥狀。豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)的獨特性增加了控制該病的困難。首先,PRRSV很容易發(fā)生變異,從而逃避免疫反應(yīng);第二,一個豬場可能存在兩種或幾種毒株同時感染;第三,PRRSV的免疫
反應(yīng)復(fù)雜而特異,有時病毒血癥與循環(huán)抗體同時存在,而且PRRSV本身破壞免疫細胞,因而很容易在豬體形成持續(xù)性感染;第四,豬群感染PRRSV后,極容易繼發(fā)其他低毒力病原的混合感染,形成各種疾病綜合征,如呼吸系統(tǒng)疾病綜合征(PRDC),給養(yǎng)豬業(yè)造成非常嚴重的損失;第五,PRRSV傳播能力非常強,有時即使在采取了非常嚴格的生物安全措施或生產(chǎn)手段后仍然發(fā)生感染;第六,非常遺憾的是到目前為止,還沒有非常有效的疫苗和便利、廉價的監(jiān)測方法用于臨床。但是,如果聽之任之,PRRS爆發(fā)及繼發(fā)感染造成的損失有時會給豬場生產(chǎn)帶來災(zāi)難性的后果。筆者通過ELISA監(jiān)測國內(nèi)部分規(guī)?;i場,發(fā)現(xiàn)幾乎所有豬場都呈血清學陽性,只不過陽性率存在差異。所以,在目前的形勢下,規(guī)?;i場尤其是種豬場有必要根據(jù)本場的實際情況,制定切實可行的控制策略,部分地理條件優(yōu)越的種豬場,可以考慮PRRSV清除策略。以下介紹有關(guān)控制與清除PRRS的一些相關(guān)策略及其注意事項,希望對同行有所借鑒。
1 豬繁殖與呼吸綜合征的診斷
控制PRRS的第一步是準確的診斷。PRRS的確診必須綜合流行病學、豬場生產(chǎn)記錄、臨床癥狀以及實驗室診斷結(jié)果。在此要特別強調(diào)實驗室診斷,及時準確送樣是非常重要的環(huán)
節(jié),當懷疑爆發(fā)PRRS時,檢測仔豬樣品往往結(jié)果更確實。而對于流產(chǎn)的樣品,出現(xiàn)死胎和木乃伊胎的同窩弱仔是最合適的檢測樣品,死胎和木乃伊胎中病毒存活的時間很短。通常情況下,哺乳仔豬、斷奶豬以及生長豬感染后4~6周內(nèi)可從血清中分離到病毒,而種豬為1~2周,肺灌洗液檢出病毒時間約4~6周。早期感染后,PRRSV可在各種組織中復(fù)制,后期則主要集中于淋巴結(jié)和扁桃體。由于PRRSV可以通過公豬精液傳播,因此,對公豬的精液和血清進行PRRSV檢測非常必要。隨著生物技術(shù)的發(fā)展,尤其是PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))技術(shù)在獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用極大增強了檢測的敏感性,雖然成本相對較高,但是比傳統(tǒng)的病毒分離方法,P C R在臨床上更為快速。P C R可以檢測血清、組織、以及精液中的病毒核酸,如果進一步對PCR產(chǎn)物進行序列測定,則可以區(qū)分野毒和弱毒疫苗株。血清學方法中,ELISA已成為標準的檢測方法,同時可以高通量檢測大批樣品。IDEXX?。牛蹋桑樱猎噭┩ㄟ^檢測樣品與陽性對照的比值來判定結(jié)果,S/P高于0.4判定為陽性,感染后9~14?。淇蓹z測到血清陽轉(zhuǎn)。需要注意的是,血清學檢測結(jié)果僅僅表明豬群是否接觸過PRRSV,并不代表是否具有保護力,而且現(xiàn)有的血清學方法無法區(qū)分血清陽轉(zhuǎn)是由野毒感染還是疫苗接種引起。在進行血清學監(jiān)測時,應(yīng)包括母豬、新斷奶仔豬、保育豬、以及育肥豬,分群監(jiān)測能了解特定豬群的感染或免疫狀況。
2 疫苗免疫方案
研究表明,豬體清除PRRSV需要細胞免疫和體液免疫同時參與,因此弱毒疫苗的效果往往優(yōu)于滅活苗,弱毒疫苗的保護期通??蛇_4個月以上,但弱毒苗可以在凈化豬群中散毒,
重新免疫后則不會散毒。因此應(yīng)注重豬群的監(jiān)測,以避免給感染豬群接種弱毒疫苗,不同豬場應(yīng)根據(jù)監(jiān)測結(jié)果制定自己的免疫程序,不可盲目跟從。首個商業(yè)化疫苗于1994年在美國問世,該疫苗是通過細胞反復(fù)傳代致弱培育。隨后又陸續(xù)有滅活疫苗及弱毒疫苗投入市場,部分商業(yè)化弱毒苗也在我國得到注冊。目前,PRRSV疫苗,尤其是弱毒疫苗在國內(nèi)外已得到廣泛應(yīng)用,同時養(yǎng)殖者和獸醫(yī)技術(shù)人員也對疫苗在田間及實驗條件下的安全性和效力有初步了解,對疫苗的選擇及使用也存在著非常大的爭議。但是有一點可以肯定的是,PRRSV疫苗尤其是弱毒疫苗具有免疫保護作用,同時也存在不足,首先,PRRSV疫苗并不具備完全的保護力;其次,疫苗產(chǎn)生免疫反應(yīng)需要較長時間;第三,PRRSV疫苗毒可以在免疫豬體組織中存在幾周時間;最后,也是非常重要的一點,弱毒疫苗可以從注苗豬向易感豬傳播。有專家認為,如果弱毒疫苗在豬群間傳播并存在較長時間的話,弱毒疫苗毒力可能返強,因此PRRSV疫苗的安全性值得關(guān)注。雖然滅活疫苗不存在病毒持續(xù)傳播以及毒力返強的缺點,但其效力確實值得懷疑。因此,弱毒疫苗仍將是主要防疫手段,在目前的形勢下,我們需要考慮的是特定的豬場是否需要以及如何合理使用弱毒疫苗。當然,最穩(wěn)妥的方法是對已經(jīng)出現(xiàn)PRRS臨床癥狀或受PRRSV威脅較大的豬群使用弱毒疫苗。但是值得注意的是,自從1994年在北美地區(qū)使用弱毒疫苗以來,關(guān)于注苗引發(fā)PRRS的報道仍不多見。
如果某個豬場決定使用疫苗,需要根據(jù)豬群中是否已經(jīng)存在或可能發(fā)生的臨床癥狀決定使用方法。如果各個階段的豬群都出現(xiàn)癥狀,那么全群都應(yīng)同時注射疫苗。有報道表明,在爆發(fā)PRRS時全群使用疫苗可以非常有效減緩PRRS臨床癥狀。但是,PRRSV疫苗的確切效果應(yīng)有田間條件下嚴格的對照實驗來證明,目前國內(nèi)這樣的臨床報告還不多見。通常情況下,某個豬群出現(xiàn)PRRS癥狀,如經(jīng)產(chǎn)或后備母豬出現(xiàn)繁殖障礙或仔豬出現(xiàn)呼吸系統(tǒng)癥狀時,有必要考慮使用PRRSV疫苗。為防止PRRSV引起的繁殖障礙,需要對經(jīng)產(chǎn)母豬和后備母豬在配種前注射疫苗,后備母豬通常注射2次,間隔1個月或稍長時間。部分豬場同時使用弱毒和滅活疫苗。有報道指出,交替使用兩個或多個疫苗毒株可以增加抗體滴度,至于能否增加保護作用現(xiàn)在還不清楚。雖然有可能造成先天感染,有些豬場由于持續(xù)出現(xiàn)PRRSV感染引起的臨床癥狀,所以也給懷孕期母豬注射疫苗。
為防止PRRSV感染引起的呼吸道癥狀,應(yīng)在仔豬可能暴露于強毒株前盡早注射疫苗以便產(chǎn)生足夠的免疫力。需要注意的是,仔豬注射PRRSV疫苗后需要很長時間才能產(chǎn)生足夠的保護力。因為PRRSV的特性決定其產(chǎn)生保護力非常緩慢。但是,弱毒疫苗對于潛伏感染P R R S V 的仔豬的影響還不太清楚。PRRSV疫苗同樣可以應(yīng)用于公豬,弱毒疫苗可以非常有效消除或降低公豬從精液排出野毒,但是,為預(yù)防公豬精液排毒的最佳疫苗劑量及注射途徑目前還不清楚,而滅活苗的效果則要大打折扣。但有實驗表明,弱毒疫苗會影響公豬精液的質(zhì)量,并可能從精液排疫苗毒,因此應(yīng)在疫苗使用一段時間后再使用精液。
顯而易見,目前的應(yīng)用實踐表明PRRSV疫苗,尤其是弱毒疫苗,是防止PRRS的有效工具,最起碼可以減輕PRRSV感染引的臨床癥狀。但是需要指出的是,目前并沒有一個放之四海皆準的疫苗使用策略,特定豬場應(yīng)該根據(jù)生產(chǎn)周期、生產(chǎn)指標、臨床癥狀和實驗室診斷結(jié)果決定疫苗使用方案,應(yīng)咨詢相關(guān)獸醫(yī)專家的意見。
3 豬群閉鎖方案[3]
該方案是通過較長時間(4~8個月)封閉繁殖群,禁止引入后備豬,使PRRSV感染限制在已有種群內(nèi),通過常規(guī)淘汰方案清除帶毒種豬。種群閉鎖方案的缺點是長時間缺乏后備母豬并因而給種群的胎次分布帶來負面影響。種群閉鎖方案能否取得長期效益的關(guān)鍵在于能否控制PRRSV由持續(xù)感染豬傳播給同群的易感種豬。在豬群閉鎖方案中,禁止活體豬的引入,同時采取全群人工授精方案是控制PRRSV的重要策略。
4 后備母豬培育方案
在PRRS控制措施中,后備母豬的培育是非常重要的環(huán)節(jié)。與細小病毒感染類似,直接引入陽性或者急性感染PRRSV的后備豬到生產(chǎn)豬群往往會造成嚴重的后果,導(dǎo)致PRRSV在豬群的持續(xù)傳播。因此,豬場應(yīng)建立后備豬培育計劃,建立嚴格的生物安全措施,設(shè)立嚴格的檢疫期和適應(yīng)期,在后備豬進入生產(chǎn)線之前系統(tǒng)培育后備豬群。首先在斷奶或體重25?。耄鐣r將所選后備豬飼養(yǎng)于特定的培育舍,通過免疫接種及適應(yīng)方案使后備豬和現(xiàn)有豬群的健康狀態(tài)保持平衡。部分豬場采用淘汰母豬或感染保育豬作為豬場特異毒株的來源,但往往成功率不高,在慢性感染豬群更是如此,因為野毒株往往不能形成活性感染。因此,在后備母豬培育計劃中,最好使用疫苗,這樣可以避免豬群中存在免疫空白后備豬。如果從場外引進PRRSV陰性后備豬,在進入生產(chǎn)群之前自然接觸豬場特異毒株的重要性更加突出。如果從PRRSV陽性場引種,需要注意毒株來源不發(fā)生變化,另外急性感染豬不可直接進入生產(chǎn)群。一般來說,對于繁殖年齡后備豬,實驗感染PRRSV持續(xù)時間不會超過3個月,因此,應(yīng)該設(shè)立3個月的檢疫隔離期,并采用全進全出的策略。生產(chǎn)豬群的穩(wěn)定是控制PRRSV的核心,穩(wěn)定的生產(chǎn)群就是指豬群不存在母豬—母豬以及母豬—仔豬的PRRSV傳播。
5 保育豬清群方案
保育豬清群是防止PRRSV從老齡豬傳播給新斷奶豬的一項非常經(jīng)濟有效的措施[5]。可以在很大程度上增加保育豬日增重,降低死亡率和治療費用,極大提升豬場經(jīng)濟效益。需要指出的是,雖然保育豬適時清群效果明顯,但是有報道計劃實施一段時間后仍然會發(fā)生PRRSV感染。因此有人認為保育豬清群的作用主要是針對一些條件致病病原,而不是針對PRRSV。保育豬清群包括如下幾個步驟:清空所有保育豬舍、清洗、消毒、并將豬舍放空至少2?。洹S捎冢校遥遥樱衷诃h(huán)境中的存活時間很短,因此空舍的時間不必太久,因而可以提高圈舍的利用率,并可以達到從保育豬群中清除PRRSV的目的,消毒劑一般選用酚類或醛類化合物,清群策略同樣可以適用于感染PRRSV的育肥豬群。
6 ?。校遥遥樱?/SPAN> 檢測與清除方案
由于PRRSV可以造成垂直傳播,并可以通過唾液,乳汁散毒。因此采取常規(guī)的分群飼養(yǎng)及早期斷奶技術(shù)來生產(chǎn)非感染仔豬往往達不到目標。所有養(yǎng)殖業(yè)者和獸醫(yī)人員必須清楚的是在控制與根除PRRSV的環(huán)節(jié)中,生產(chǎn)無PRRSV感染的斷奶仔豬是最重要的環(huán)節(jié)與目標,因此,帶毒種豬的檢測至關(guān)重要,因為PRRSV可以造成持續(xù)感染。研究發(fā)現(xiàn)持續(xù)感染豬在感染后225?。淙钥蓹z測到病毒核酸。但是PRRSV并不能在豬體內(nèi)終生存在,持續(xù)感染母豬使PRRSV在感染豬場持續(xù)散毒。持續(xù)感染母豬往往在慢性感染豬群中存在,這些豬群通常為ELISA抗體陽性,但抗原往往存在于淋巴組織。在散發(fā)豬場,持續(xù)感染母豬的比例通常不高(<2%)。試驗感染研究顯示帶毒母豬可在感染后86d仍可檢測到病毒并可以排毒。檢測與清除是一種非常有效的策略,該策略是通過對整個繁殖群的系統(tǒng)監(jiān)測,從而將帶毒種豬清除,達到阻止PRRSV垂直傳播目的[6]。國內(nèi)部分豬場通過該方法已經(jīng)成功凈化了偽狂犬病和豬瘟。檢測與清除策略是通過ELISA方法和PCR方法同時監(jiān)測血清中PRRSV抗體和抗原,任何一種方法檢測出陽性的種豬都及時清除。1998—2002年,美國30個豬場,包括18個人工授精中心以及12個繁殖豬群采取檢測與清除策略來凈化PRRSV[7],這些繁殖群平均母豬數(shù)1 500頭,該方案首先對全群在1~2?。鋬?nèi)采血樣并監(jiān)測,實驗室同時采用IDEXX公司ELISA試劑以及TaqmanPCR方法監(jiān)測抗體和抗原,用于PCR檢測的樣品3份合并為一份,ELISA以及PCR只要有一種方法陽性,在得到檢測結(jié)果后1~2?。鋬?nèi)清除所有陽性種豬,在檢測與清除計劃結(jié)束后每個月抽樣定期檢測,抽樣比例依據(jù)預(yù)測約5%的陽性率至少能檢測到一例陽性。檢測結(jié)果顯示,在12個繁殖群血清陽性平均10%(5%~15%),人工授精中心為15%(10%~20%),在所有30個養(yǎng)殖場中,清除的豬群在繁殖群為2%~12%,人工授精中心為10%~18%。清除豬群中大部分為ELISA 陽性/PCR 陰性(77%~85%),另外,ELISA和PCR雙陽性5%~12%,ELISA陰性/PCR陽性者比例較低(2%~4.5%)。其中有一個繁殖場和一個人工授精中心在該方案實施2年后重新感染,但測序顯示感染毒株與原毒株無關(guān)。這表明檢測與清除策略對于血清陽性較低的種豬群根除PRRSV是一種非常有效的策略,但是費用相對較高,在國內(nèi)檢測成本應(yīng)在120~150元/頭,而且檢測時間內(nèi)采樣工作量非常大。
對于地理條件優(yōu)越、飼養(yǎng)場密度很低、隔離條件非常好的種豬場可以考慮根除PRRSV,而對于飼養(yǎng)密度較高,隔離條件欠佳的商品豬場,采用疫苗防疫確實是較為明智的選擇,因為在目前的形勢下,完全清凈豬群對PRRSV的抵抗能力的確很脆弱,如果受到PRRSV威脅,會造成更嚴重的后果。目前的確有部分豬場在PRRSV感染的情況下,仍然具有一定的生產(chǎn)效益。因此,關(guān)于PRRSV的凈化的確是仁者見仁,智者見智。
7 總結(jié)與展望
總之,關(guān)于PRRSV的致病機理、傳播方式及防制方法,還有相當多的未知數(shù)。以上介紹了一些國內(nèi)外控制PRRSV的策略,PRRSV致病的獨特性決定凈化該疾病將是一項長期而艱巨的任務(wù)。但是只要執(zhí)行嚴格的疫病防制策略,控制PRRSV還是切實可行的,任何情況下,嚴格的生物安全措施都是控制PRRSV和其它豬群疫病的法寶,任何時候都應(yīng)有這樣的觀念,現(xiàn)代化養(yǎng)豬重點在防病而不是治病。采取切實可行的措施阻止人員、車輛、衣服、鞋子、注射針頭等帶毒傳播, 及時清除病豬并及時消毒,禁止老弱豬只與健康豬只混養(yǎng),實行嚴格的全進全出策略,保持保育舍的通風良好。同時最重要的一點,必須加強對豬群的定期疫情監(jiān)測,在每個豬群設(shè)立哨兵豬,通過實驗室手段,及時了解特定豬群的免疫或感染狀況,從而采取針對性的措施。 |