規(guī) 模 化 豬 場(chǎng) 豬 瘟 的 凈 化 與 防 制
豬瘟(Classical swine fever, CSF) 是由黃病毒科
瘟病毒屬的豬瘟病毒感染引起, 是當(dāng)前我國(guó)規(guī)?;i場(chǎng)的主要傳染病之一, 也是需要重點(diǎn)防控的重要傳染病。根據(jù)2005年5月中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部令第53號(hào)《動(dòng)物病原微生物分類名錄》, 豬瘟病毒分類于二類動(dòng)物病原微生物, 屬高致病性病原。值得注意的是, 雖然規(guī)?;i場(chǎng)典型急性豬瘟大面積流行已不常見, 但豬瘟的發(fā)生尤其是非典型豬瘟仍然普遍存在, 而且由于診斷技術(shù)的缺陷往往造成對(duì)豬瘟疫情的忽視與誤判。本文將介紹在規(guī)?;i場(chǎng)的工作實(shí)踐中豬瘟凈化的必要性、有利條件以及凈化策略。
1 規(guī)?;i場(chǎng)豬瘟的凈化
1.1 豬場(chǎng)
分別為我國(guó)北方( 河北 A)、中部( 河南 B) 以及南方( 江西 C)3 個(gè)規(guī)?;N豬場(chǎng), 地理?xiàng)l件和隔離措施良好, 飼養(yǎng)管理正規(guī), 消毒措施嚴(yán)格, 基礎(chǔ)母豬都在 600 頭以上, 自繁自養(yǎng)。
1.2 操作方法
分別用扁桃體活體采樣法采取種豬扁桃體樣品。在 1~2 d 內(nèi)對(duì)整條生產(chǎn)線采樣, 24 h 內(nèi)低溫送實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè), 在實(shí)驗(yàn)室做成觸片, 采用豬瘟熒光抗體( 購(gòu)自中國(guó)獸藥監(jiān)察所) 染色檢測(cè)豬瘟病毒抗原,1~2 d 內(nèi)檢測(cè)完畢, 在檢測(cè)報(bào)告送達(dá) 1~2 d 內(nèi)一次性淘汰所有陽(yáng)性豬。然后對(duì)整個(gè)繁殖群普遍免疫 1 次豬瘟弱毒組織苗( 成兔脾淋苗,2 頭份/頭), 以后每次所留后備豬都進(jìn)行扁桃體活體檢測(cè), 陽(yáng)性者不得作為種用。
1.3 初步凈化結(jié)果
3 個(gè)豬場(chǎng)豬瘟凈化與檢測(cè)結(jié)果如表 1 所示, 河北 A 豬場(chǎng)凈化半年后檢測(cè), 陽(yáng)性率下降 70.09%, 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(χ2 檢驗(yàn), SPSS 軟件) 表明, 豬瘟帶毒率明顯下降(P<0.01)。同時(shí), 通過(guò)凈化, 豬場(chǎng)的生產(chǎn)指標(biāo)明顯提高, 母豬分娩率提高 0.8%, 產(chǎn)活仔率提高4%, 窩均產(chǎn)活仔增加 1.3 頭, 全期死亡率下降13.6%。河南B豬場(chǎng)間隔 5個(gè)月 2 次檢測(cè), 種豬豬瘟病毒陽(yáng)性率下降 83.30%(P<0.01), 第 1 次檢測(cè)淘汰后平均窩產(chǎn)健康仔豬由 9.28 頭提高到 9.56 頭, 生長(zhǎng)豬成活率由 81.4%提高到 83.9%。在江西 C 規(guī)模化豬場(chǎng), 筆者首先對(duì)整個(gè)繁殖群免疫 1 次豬瘟弱毒組織苗( 成兔脾淋苗, 2 頭份 /頭), 然后對(duì)繁殖障礙豬群進(jìn)行檢測(cè)與淘汰。第 2 次對(duì)全群進(jìn)行檢測(cè), 結(jié)果豬群陽(yáng)性率下降 90.20%(P<0.01), 同樣淘汰陽(yáng)性帶毒種豬。在進(jìn)行豬瘟凈化的同時(shí), 以 gE- ELISA 監(jiān)測(cè)結(jié)果對(duì)豬群進(jìn)行了偽狂犬病的凈化, 并對(duì)豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)采取針對(duì)性的防控措施。在很短的時(shí)間內(nèi), 繁殖群生產(chǎn)性能得到大幅度提高, 窩均產(chǎn)活仔數(shù)由 5.2 頭提高到9.2頭, 產(chǎn)死、殘、弱仔比例由49.50%降至10.44%, 豬場(chǎng)生產(chǎn)效益得到極大提高。以上3個(gè)規(guī)模化豬場(chǎng)豬瘟的凈化實(shí)踐表明, 在規(guī)模化豬場(chǎng)采用“檢測(cè)與淘汰”策略是控制豬瘟的有力措施。

2 豬瘟凈化的必要性
2.1 豬瘟疫情在我國(guó)仍然普遍存在由于豬瘟兔化弱毒疫苗的廣泛應(yīng)用, 有效地控制了豬瘟的大面積流行, 但是現(xiàn)階段豬瘟疫情仍然普遍存在。劉有昌等使用美國(guó) IDEXX 公司生產(chǎn)的豬瘟病毒檢測(cè) ELISA 試劑盒, 于 2005 年 1~8 月對(duì)河北、天津、北京、遼寧、內(nèi)蒙古等地 10個(gè)豬場(chǎng)送檢的600 多份種公、母豬血液樣品進(jìn)行豬瘟病毒檢測(cè)發(fā)現(xiàn), 10個(gè)豬場(chǎng)都存在帶毒種豬, 各豬場(chǎng)除可疑豬外陽(yáng)性率為 3%~70%, 在 10%~20%的較多, 平均達(dá)20.5%[1]。中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所丘惠深研究員等近年來(lái)對(duì)我國(guó) 13個(gè)省、市 29個(gè)大、中型豬場(chǎng)的種豬進(jìn)行了檢測(cè),扁桃體豬瘟熒光抗體染色技術(shù)結(jié)果顯示,所有被檢豬場(chǎng)都存在種豬豬瘟帶毒, 全國(guó)種豬豬瘟抗原陽(yáng)性率平均為 11.12%, 最高的可達(dá) 30.7%,最低為 4.4%[2]。衛(wèi)秀余等利用酶標(biāo)的方法于 2004 年對(duì) 234 個(gè)豬場(chǎng)的送檢樣品進(jìn)行豬瘟抗原檢測(cè), 結(jié)果陽(yáng)性 64 個(gè), 陽(yáng)性率達(dá) 27.4%; 而同時(shí)采用間接血凝方法對(duì)4735份血清檢測(cè), 結(jié)果合格率僅為 69.1%[3]。筆者于 2005 年對(duì)北方部分規(guī)?;i場(chǎng)種豬帶毒情況進(jìn)行調(diào)查, 結(jié)果發(fā)現(xiàn), 種豬帶毒率為 5%~20%。此外,65%豬場(chǎng)弱仔以及保育豬豬瘟抗原臨床上監(jiān)測(cè)結(jié)果也呈現(xiàn)陽(yáng)性[4]。說(shuō)明我國(guó)豬場(chǎng)的母豬帶毒現(xiàn)象是相當(dāng)普遍的, 只是程度不同, 所以豬瘟仍然是現(xiàn)階段規(guī)模化豬場(chǎng)必須重視的重要疫病。
2.2 豬瘟的發(fā)生表現(xiàn)為種豬的繁殖障礙以及溫和型特點(diǎn)
由于免疫水平低下、低毒力豬瘟病毒常在或其它原因, 導(dǎo)致豬瘟病毒在種豬群形成持續(xù)感染, 豬瘟病毒在豬體內(nèi)長(zhǎng)期存在, 即可同時(shí)檢測(cè)到豬瘟病毒抗體和抗原, 只有通過(guò)實(shí)驗(yàn)室方法, 才能檢測(cè)出帶毒豬。持續(xù)感染種豬表現(xiàn)為妊娠母豬帶毒綜合征和公 豬精液傳播, 這是豬群中豬瘟疫情持續(xù)存在的根本原因。在臨床上種豬除可能出現(xiàn)繁殖障礙外, 往往不表現(xiàn)明顯的臨床癥狀。但是, 繁殖母豬可能出現(xiàn)流產(chǎn)和產(chǎn)死胎、木乃伊胎及弱仔, 仔豬的先天性感染往往形成免疫耐受[5]。臨床上經(jīng)常發(fā)現(xiàn), 部分種豬豬瘟病毒抗體及其它病原抗體水平極低, 但是抗原檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。如果帶毒后備豬進(jìn)入生產(chǎn)群, 則會(huì)在豬場(chǎng)形成豬瘟的惡性循環(huán)鏈, 因此要從源頭上控制規(guī)?;i場(chǎng)的豬瘟疫情, 則必須對(duì)種豬群進(jìn)行凈化[2]。
2.3 規(guī)模化豬場(chǎng)豬瘟往往與其它疾病發(fā)生混合感染
近年來(lái), 隨著規(guī)?;?a href="http://www.ffers.com.cn/pigs/" target="_blank" class="relatedlink">養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展, 一些免疫抑制性傳染病病原如豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬圓環(huán)病毒2型給養(yǎng)豬生產(chǎn)帶來(lái)極大的危害, 豬瘟病毒通常與這些病原形成混合感染,一方面加重了豬瘟的危害性,另一方面給確診帶來(lái)了困難。這就需要采取實(shí)驗(yàn)室方法鑒定病原的種類, 對(duì)特定的豬群進(jìn)行具體分析,客觀科學(xué)地分析疫情,在進(jìn)行豬瘟凈化的同時(shí)不可忽視其它病原的危害,采取綜合防制措施。
3 凈化豬瘟的有利條件
3.1 便利的活體采樣技術(shù)
由于帶毒種豬是豬場(chǎng)豬瘟病毒持續(xù)存在的根本原因, 因此,對(duì)種豬采取“檢測(cè)與淘汰”策略可以從源頭上對(duì)豬瘟進(jìn)行凈化。目前, 國(guó)內(nèi)已有專用的豬扁桃體活體采樣器械, 可以非常便利對(duì)種豬進(jìn)行活體采樣(圖 1)。該方法簡(jiǎn)單易學(xué), 每頭豬鉤取扁桃體樣品約 30 mg, 置于低溫保存, 然后送有條件的實(shí)驗(yàn)室采用免疫熒光或 PCR 方法檢測(cè)豬瘟病毒抗原。需要注意的是采樣部位必須準(zhǔn)確, 同時(shí), 每頭豬采樣后應(yīng)及時(shí)消毒處理, 消毒劑一般可采用 2%~3%氫氧化鈉或酚類消毒劑。

3.2 高效、經(jīng)濟(jì)的豬瘟抗原抗體檢測(cè)方法
必須指出的是, 目前一些豬場(chǎng)僅憑借抗體檢測(cè)結(jié)果來(lái)監(jiān)測(cè)豬瘟病毒, 甚至根據(jù)抗體效價(jià)的高低來(lái)對(duì)豬瘟進(jìn)行診斷。實(shí)驗(yàn)室和臨床實(shí)踐表明, 抗體檢測(cè)診斷存在較大的誤區(qū), 因?yàn)榈侥壳盀橹梗?/SPAN> 現(xiàn)有的血清學(xué)方法還無(wú)法區(qū)分疫苗抗體和野毒抗體。因此僅憑借抗體效價(jià)高低來(lái)對(duì)豬瘟進(jìn)行診斷, 結(jié)果往往不確定。所以, 豬瘟病毒持續(xù)感染種豬的檢測(cè)必須側(cè)重于病毒抗原的檢測(cè)[6]。其中豬瘟病毒免疫熒光法為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法, 也是國(guó)際通用方法。通過(guò)熒光標(biāo)記的抗體直接測(cè)定豬瘟病毒抗原, 帶毒豬扁桃體隱窩上皮細(xì)胞胞漿呈現(xiàn)特異性熒光( 圖 2), 由于豬瘟兔化弱毒疫苗不會(huì)在豬體內(nèi)形成持續(xù)感染, 因此, 免疫熒光法可以快速有效檢測(cè)出持續(xù)帶毒豬[6,7], 同時(shí)也可以批量檢測(cè)樣品, 檢測(cè)成本相對(duì)較低。熒光抗體可從專門的機(jī)構(gòu)訂購(gòu),但對(duì)于結(jié)果的判定需要有一定的經(jīng)驗(yàn)。采用免疫熒光法凈化豬瘟已經(jīng)在一些豬場(chǎng)取得成功,凈化后豬瘟疫情得到有效控制[8,9]。

檢測(cè)抗原的 ELISA 方法的原理是雙抗體夾心法, 以豬瘟病毒血清包被微量反應(yīng)板, 與被檢樣品中豬瘟病毒抗原結(jié)合, 然后與豬瘟病毒特異的單克隆抗體形成夾心的上層, 采用辣根過(guò)氧化物酶檢測(cè),底物的吸光度與病毒抗原含量成正比。
豬瘟病毒抗體檢測(cè)方法包括 ELISA 以及間接血凝方法。ELISA 方法由于測(cè)定試劑和方法的標(biāo)準(zhǔn)化, 試驗(yàn)結(jié)果可以定量, 同時(shí)可以高通量檢測(cè)樣品,也逐漸被用于臨床監(jiān)測(cè)。但由于試劑盒大部分為進(jìn)口, 因而成本相對(duì)較高, 樣品處理的過(guò)程也比較復(fù)雜。需要注意的是, 試驗(yàn)檢測(cè)過(guò)程需要嚴(yán)格設(shè)立陽(yáng)性和陰性對(duì)照, 對(duì)于試驗(yàn)人員的技術(shù)要求也比較高。目前在國(guó)內(nèi)測(cè)定豬瘟病毒抗體最常用的是間接血凝法, 該方法采用豬瘟病毒致敏紅細(xì)胞直接測(cè)定血清抗體效價(jià), 要求的設(shè)備比較簡(jiǎn)便, 結(jié)果判定直觀,因而適于基層應(yīng)用, 根據(jù)經(jīng)驗(yàn)一般以 1∶ 16或 1∶32作為臨界標(biāo)準(zhǔn)。需要注意的是, 抗體效價(jià)與保護(hù)力之間的關(guān)系尚無(wú)定論, 而且與其它血清學(xué)方法一樣, 無(wú)法區(qū)分野毒抗體和疫苗抗體。但是通過(guò)定期的抗體監(jiān)測(cè)可以及時(shí)了解豬群的免疫狀況, 評(píng)價(jià)疫苗免疫效果。因而, 定期的抗體監(jiān)測(cè)是豬場(chǎng)豬瘟綜合防制措施中必不可少的重要環(huán)節(jié)。
3.3 合格的豬瘟疫苗
豬瘟兔化弱毒疫苗的應(yīng)用實(shí)踐表明, 現(xiàn)有的疫苗毒株(C 株)對(duì)于毒力不同的田間毒株仍然具有堅(jiān)強(qiáng)的保護(hù)力,也就是說(shuō)不用懷疑疫苗毒株的效力。但是, 高效的疫苗毒株并不代表有效的商品疫苗。需要指出的是, 對(duì)免疫豬群仍然發(fā)生豬瘟的原因要進(jìn)行具體分析, 種豬帶毒和仔豬先天性感染是重要的原因。另外,不同廠家疫苗在生產(chǎn)過(guò)程中毒價(jià)可能存在一定的差異, 且疫苗在運(yùn)輸、保存、使用過(guò)程中措施不當(dāng)會(huì)對(duì)疫苗的效果產(chǎn)生影響, 免疫程序不合理也是重要因素, 如母源抗體的干擾。鑒于目前豬瘟的流行現(xiàn)狀, 對(duì)豬瘟進(jìn)行凈化的豬場(chǎng)仍然需要使用豬瘟疫苗,合格高效的豬瘟兔化弱毒疫苗對(duì)于凈化豬群可提供有力的保護(hù)作用。
4 總結(jié)與討論
實(shí)踐表明, 豬瘟仍然是當(dāng)前規(guī)模化豬場(chǎng)需要重點(diǎn)防范的傳染病, 而持續(xù)帶毒豬是豬瘟發(fā)生過(guò)程中的關(guān)鍵因素, 因此,只要從種群上凈化生產(chǎn)群, 對(duì)種豬采取“檢測(cè)與淘汰”策略, 將會(huì)從源頭上控制豬瘟在豬場(chǎng)的惡性循環(huán)鏈。規(guī)?;i場(chǎng)應(yīng)充分認(rèn)識(shí)豬瘟流行的新特點(diǎn), 更新觀念, 著眼于豬場(chǎng)的長(zhǎng)期發(fā)展,重點(diǎn)抓好種群的凈化,通過(guò)對(duì)種群2~3次凈化,對(duì)每批后備豬進(jìn)行檢測(cè), 將顯著降低種豬群的陽(yáng)性率,從而從根本上控制豬瘟疫情。同時(shí)要充分認(rèn)識(shí)到,豬瘟的防制是一項(xiàng)系統(tǒng)性的綜合工程, 豬場(chǎng)應(yīng)采取嚴(yán)格的生物安全措施, 控制人員、車輛、器械、治療工具的機(jī)械傳播, 加強(qiáng)消毒工作。要采用優(yōu)質(zhì)高效的豬瘟疫苗, 定期監(jiān)測(cè)豬瘟抗體水平, 通過(guò)定期的監(jiān)測(cè)建立適合本場(chǎng)的免疫程序并嚴(yán)格執(zhí)行, 規(guī)?;i場(chǎng)還應(yīng)該建立定期的流行病學(xué)監(jiān)測(cè)機(jī)制, 及時(shí)了解豬群疫病潛伏感染情況。在進(jìn)行豬瘟凈化的同時(shí), 還要加強(qiáng)對(duì)豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合征以及圓環(huán)病毒病等其它危害嚴(yán)重疫病的防制, 條件允許時(shí), 可以對(duì)多種疫病同時(shí)凈化, 真正建立一個(gè)健康、穩(wěn)定的繁殖群, 將極其有效地提高生產(chǎn)效益和增強(qiáng)品牌形象。 |