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硫酸阿米卡星可溶性粉對(duì)人工誘發(fā)雞大腸桿菌和沙門(mén)氏菌 關(guān)鍵詞:沙門(mén)氏菌, 阿米卡, 大腸桿菌, 硫酸, 可溶性粉 作者:趙海 硫酸阿米卡星可溶性粉屬于氨基糖苷類藥物,具有抗菌譜廣、抗菌效果強(qiáng)等特點(diǎn),可有效防治雞大腸桿菌和沙門(mén)氏菌病,本試驗(yàn)通過(guò)人工誘發(fā)雞大腸桿菌和雛雞沙門(mén)氏菌病為病理模型,進(jìn)行了硫酸阿米卡星可溶性粉內(nèi)服的藥效學(xué)觀察,為在臨床上有效安全使用提供了科學(xué)依據(jù)。 一、材料與方法 (一)試驗(yàn)材料 試驗(yàn)藥物:硫酸阿米卡星可溶性粉(20%可溶性粉),批號(hào):20050901,由山西省太原恒德源動(dòng)??萍奸_(kāi)發(fā)有限公司提供。試驗(yàn)動(dòng)物1日齡的健康海蘭雛雞480只(無(wú)大腸桿菌病和沙門(mén)氏菌病母源抗體),從山西省軍區(qū)種雞場(chǎng)購(gòu)入。菌種雞源大腸桿菌O2(E.ColiO2)和雞源沙門(mén)氏菌C79-1,購(gòu)于中國(guó)獸藥監(jiān)察所;C79-1陽(yáng)性血清由本研究室制作。 (二)試驗(yàn)方法 試驗(yàn)動(dòng)物的選擇
試驗(yàn)動(dòng)物選用體重相近,體質(zhì)健壯,精神狀況良好,健康無(wú)病的1日齡海蘭雛雞480只作為試驗(yàn)動(dòng)物。試驗(yàn)動(dòng)物分組與攻毒接種量將選擇好的480只1日齡海蘭雛雞,按隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),分為兩個(gè)試驗(yàn)。第一個(gè)試驗(yàn):雞大腸桿菌攻毒治療試驗(yàn)。將240只試驗(yàn)雞隨機(jī)分為2個(gè)大組,其中第1大組(4個(gè)小組)用)0.05毫升(2.4億個(gè)活菌)雞大腸桿菌O2攻毒后進(jìn)行治療試驗(yàn);第2大組(4個(gè)小組)用0.1毫升(2.5億個(gè)活菌)雞大腸桿菌O2攻毒后進(jìn)行治療試驗(yàn)。第二個(gè)試驗(yàn):雞沙門(mén)氏菌C79-1攻毒治療試驗(yàn)。將240只試驗(yàn)雞隨機(jī)分為2個(gè)大組。其中第1個(gè)大組(4個(gè)小組)用0.05毫升(2.4億個(gè)活菌)沙門(mén)氏菌C79-1攻毒后進(jìn)行治療試驗(yàn);第2大組(4個(gè)小組)用0.1毫升(2.5億個(gè)活菌)沙門(mén)氏菌C79-1 攻毒后進(jìn)行治療試驗(yàn)。體外抑菌試驗(yàn)通過(guò)測(cè)量抑菌圈的大小初步了解試驗(yàn)菌株對(duì)受試藥的敏感性(含藥量30微克/點(diǎn))。治療用藥劑量及用藥方法把細(xì)菌攻毒各大組平均分成4個(gè)小組,每小組30只雞,其中3個(gè)組為不同劑量水平治療組(水中濃度分別為40毫克/千克、50毫克/千克和70毫克/千克),1個(gè)組不治療,作為對(duì)照組。各治療組在攻毒后5~7小時(shí),即感染后初顯臨床癥狀時(shí),立即分別給予藥物飲水,每天2次,連用5天。療效判定標(biāo)準(zhǔn)用藥后病雞腹瀉癥狀減輕,眼結(jié)膜潮紅消失。采取雞心血在試驗(yàn)室進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、顯微鏡檢查,大腸桿菌呈陰性,判定為有效或治愈,反之判定為無(wú)效。試驗(yàn)時(shí)間試驗(yàn)時(shí)間為15天,其中預(yù)試期5天,正式試驗(yàn)10天。 (三)觀察記錄等項(xiàng)目 1.接種后仔細(xì)觀察和記錄各組雞的發(fā)病情況、臨床變化及死亡情況。 2.對(duì)死亡雞及時(shí)進(jìn)行剖檢,記錄病理變化,連續(xù)觀察10天。 3.對(duì)死亡雞進(jìn)行剖檢,取心血、肝進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng),并作血清學(xué)鑒定或用陽(yáng)性血清與培養(yǎng)菌進(jìn)行玻片凝集反應(yīng),確定雞只死亡是否由接種感染菌所致。 4.各組雞在感染前和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)分別稱重1次,觀察增重效果。 二、結(jié)果與分析 (一)體外抑菌試驗(yàn)結(jié)果 硫酸阿米卡星可溶性粉對(duì)雞源大腸桿菌O2和沙門(mén)氏菌C79-1株,均產(chǎn)生明顯的抑菌作用,其抑菌圈的直徑分別為23毫米和29毫米,根據(jù)細(xì)菌對(duì)藥物敏感度的判定標(biāo)準(zhǔn)(硫酸阿米卡星的抑菌直徑≥17為高敏),結(jié)果表明,雞源大腸桿菌O2和沙門(mén)氏菌C79-1 對(duì)硫酸阿米卡星可溶性粉均高敏。 (二)對(duì)雞大腸桿菌株O2感染的治療 試驗(yàn)人工病模試驗(yàn)各治療組和細(xì)菌感染組雛雞在攻毒后5~7小時(shí),部分雛雞出現(xiàn)不同程度的大腸桿菌臨床癥狀,主要表現(xiàn)為精神不振,輕度腹瀉、眼結(jié)膜潮紅、食欲減退,嚴(yán)重者食欲廢絕等。三個(gè)用藥組治療后的第2天臨床病癥明顯減輕,到5天臨床病癥基本消失,但仍有個(gè)別病重的雞只,也有死亡。而對(duì)照組從攻毒開(kāi)始至第8天,臨床癥狀非常嚴(yán)重并陸續(xù)死亡,到第9天存活雞臨床病癥基本消失。 從上表可以看出,治療組從治療開(kāi)始到第10天,無(wú)論是0.05毫升攻毒組,還是0.1毫升攻毒組,其40毫克/千克治療組的雞只死亡率平均為 6.6%;50毫克/千克和70毫克/千克治療組的平均死亡率為0。而對(duì)照組的死亡率平均為43.3%,由此可見(jiàn),雞的死亡率試驗(yàn)組之間雖有差異,但差異不顯著(P>0.05);而與對(duì)照組相比較,則差異極顯著(P<0.01)。說(shuō)明硫酸阿米卡星可溶性粉對(duì)雞大腸桿菌O2株感染有良好的治療效果。死亡雞剖檢變化及主要特征解剖病死雞可見(jiàn)氣管粘液增多,肝臟大多有散在的出血點(diǎn),較瘦的雞只表現(xiàn)為纖維素性肝周炎、心包炎、腸黏膜肥厚,腸腔內(nèi)有多量黃色泡沫,腎臟稍腫。把死亡雞的心血和肝接種于鑒別培養(yǎng)基麥康凱瓊脂平板上進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng),95%的死亡雞分離出大腸桿菌,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)鑒定,全部是大腸桿菌O2株,說(shuō)明雛雞死亡的原因是由該菌株引起的。 上述試驗(yàn)結(jié)果表明,硫酸阿米卡星可溶性粉能有效地控制雞大腸桿菌感染、減輕臨床癥狀、減少發(fā)病和死亡率,同時(shí)能遏制存活雞的體重下降。在藥物的用量上,50毫克/千克和70毫克/千克優(yōu)于40毫克/千克硫酸阿米卡星可溶性粉。 (三)對(duì)雞沙門(mén)氏菌C79-1感染的治療效果 人工病模試驗(yàn)各治療組和細(xì)菌感染組雛雞在接種了沙門(mén)氏菌C79-1 后6~7小時(shí),部分雞只出現(xiàn)不同程度的發(fā)病癥狀,主要表現(xiàn)為精神不振、閉目縮頸、畏寒、食欲減退或廢絕。治療的當(dāng)天發(fā)病率已達(dá)50%左右,治療組經(jīng)過(guò)治療,到第5天臨床病癥基本消失,期間個(gè)別組病重者死亡;而對(duì)照組從感染的第2天到第4天臨床癥狀明顯,并發(fā)生大批死亡,從第5天死亡開(kāi)始下降,至7~10 天臨床病癥才基本消失。 從表中可以看出,治療組從治療開(kāi)始到第10天,無(wú)論是0.05毫升攻毒組,還是0.1毫升攻毒組,其40毫升/千克治療組的雞只死亡率平均為3.3%;50毫克/千克和70毫克 /千克治療組的平均死亡率均為0。試驗(yàn)組之間雖有差異,但差異不顯著(P>0.05);而與對(duì)照組的60.0%的死亡率相比,則差異極顯著(P<0.01)。雞的增重結(jié)果也呈現(xiàn)上述規(guī)律,說(shuō)明硫酸阿米卡星可溶性粉對(duì)雞沙門(mén)氏菌C79-1感染有良好的治療效果。死亡雞剖檢變化及主要特征通過(guò)對(duì)病死雞的病例解剖,肉眼觀察可見(jiàn)嗉囔空虛,肝臟腫大,呈土黃色并有磚紅色條紋,脾臟腫大、充血。把死亡雞的心血和肝接種于鑒別培養(yǎng)基S.S瓊脂平板上進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng),90%以上的死亡雞分離出沙門(mén)氏菌,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室用抗血清進(jìn)行玻片凝集反應(yīng)為陽(yáng)性,說(shuō)明雛雞死亡的原因是由沙門(mén)氏菌C79-1株引起的。 上述試驗(yàn)結(jié)果表明,硫酸阿米卡星可溶性粉能有效地控制雞沙門(mén)氏菌感染、減輕臨床癥狀、減少沙門(mén)氏菌的感染率和死亡率,在治療期間一定程度上能遏制存活雞的體重下降。在藥物的用量上,50毫升/千克和70毫克/千克無(wú)論在控制死亡和遏制體重下降方面都優(yōu)于 40毫克/升硫酸阿米卡星可溶性粉。 三、小結(jié) 1. 硫酸阿米卡星可溶性粉對(duì)雞大腸桿菌和沙門(mén)氏菌具有抑殺作用,臨床上能有效地阻止大腸桿菌和沙門(mén)氏菌的感染,降低發(fā)病率和病雞的死亡率。 2. 本試驗(yàn)采用40毫克/千克、50毫克/千克和70毫克/千克,即低、中、高三個(gè)治療濃度,研究了其藥效及臨床應(yīng)用的治療劑量,根據(jù)感染后雛雞的發(fā)病率、死亡率、臨床病癥及相對(duì)增重率進(jìn)行評(píng)價(jià),結(jié)果表明,三個(gè)臨床應(yīng)用劑量都能有效地減少雞大腸桿菌病和沙門(mén)氏菌病的發(fā)病率、死亡率,并能遏制體重的下降,但相比較之下,50毫克/千克和70毫克/千克的治療效果更好。 |