豬的血液常規(guī)檢查法

yongqing907

　血液常規(guī)檢查的項(xiàng)目有多種,但是目前用于豬病診斷的項(xiàng)目不多,常用的有血紅蛋白含量測定、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)等。必須指出的是,血液常規(guī)檢查僅僅是為臨診診斷提供一些數(shù)據(jù),是一種輔助診斷手段,在操作時(shí)要嚴(yán)格遵循操作規(guī)程和注意事項(xiàng),力求準(zhǔn)確,避免差錯,同時(shí)應(yīng)與臨診檢查密切結(jié)合,才能得到正確的結(jié)論。
　　1.血紅蛋白含量測定 健康豬的血紅蛋白值為10.5 克/100 毫升(變動范圍9.5-12.0,若是血紅蛋白的含量增多,見于各種原因引起的血液濃縮,如劇烈的腹瀉、嘔吐、出大汗及某些中毒病。血紅蛋白含量降低,見于仔豬貧血及各種慢性消耗性疾病,如慢性豬瘟、仔豬蛔蟲病等。
　　(1)器械和試劑 ①國產(chǎn)薩利氏血紅蛋白計(jì)；②0.1摩/ 升(1%－2%)鹽酸溶液。
　　(2)方法 ①于測定管內(nèi)加入0.1摩/升鹽酸溶液至百分?jǐn)?shù)刻度的"20"處(約5－6滴)。②用血紅蛋白吸管吸取供檢血液至20(或10)立方毫米處,用清潔脫脂棉拭凈血紅蛋白吸管尖端外壁附著的血液,迅速將血紅蛋白吸管插入測定管底部的鹽酸溶液中,緩緩壓出血液,并以此鹽酸溶液反復(fù)洗凈管內(nèi)所附著的血液。③以玻棒充分?jǐn)嚢?/SPAN>,使供檢血與鹽酸溶液充分混合,靜置10分鐘。④沿管壁向測定管內(nèi)逐滴加入蒸館餾水(或N/10鹽酸溶液),隨加隨用玻棒攪拌,并與兩側(cè)的標(biāo)準(zhǔn)色柱相比較,直至管內(nèi)液體的顏色與標(biāo)準(zhǔn)色柱一致為止。⑤ 讀取測定管內(nèi)液體凹面的刻度數(shù),-即100毫升血液中所含血紅蛋白的克數(shù)或百分?jǐn)?shù)。如被檢血的用量只達(dá)血紅蛋白吸管的刻度"10"處時(shí),將讀數(shù)加倍。
　　(3)注意事項(xiàng) ①吸血量應(yīng)準(zhǔn)確,血紅蛋白吸管中的血柱不應(yīng)混有氣泡。②供檢血液及稀釋液均應(yīng)沿測定管壁加入, 不能直接沖向管底而產(chǎn)生大量氣泡。③攪拌要均勻,防止血液發(fā)生凝塊。④稀釋時(shí)蒸餾水應(yīng)分次、逐滴加入,勿使液體顏色談于標(biāo)準(zhǔn)色柱而無法比色。⑤混合完畢,應(yīng)于10分鐘后、 30分鐘內(nèi)進(jìn)行比色。因在室溫下,1分鐘后約有75%的血紅蛋白可與鹽酸作用而呈褐色,5分鐘后有88%,至10分鐘時(shí), 有95%的血紅蛋白才能轉(zhuǎn)化為褐色的酸性血紅素。
　　2.紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)是將一定量供檢血經(jīng)一定倍數(shù)稀釋后,計(jì)算其一定容積內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù),并換算為每立方毫米血液的含量,健康豬的紅細(xì)胞數(shù)平均值為600萬/立方毫米,(變動范圍為500 萬－700萬)。紅細(xì)胞增多,為血液濃縮,如脫水、出大汗、胸膜炎的滲出期等；紅細(xì)胞減少,為各類貧血性的疾病或慢性消耗性的疾病。
　　(1)器材和稀釋液 ①血紅蛋白吸管,吸血用(與測定血紅蛋白通用)。②紅細(xì)胞計(jì)數(shù)板,同時(shí)也可用于白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)用。目前一般使用的為鮑氏計(jì)數(shù)板，上面刻劃兩個(gè)計(jì)數(shù)室,每個(gè)計(jì)數(shù)室分為9個(gè)大方格,每1大方格的面積為1平方毫米,加血后(蓋片)的深度為1/10毫米。每個(gè)大方格又劃分為16個(gè)中方格(用于白細(xì)胞計(jì)數(shù)),每個(gè)中方格又分為16個(gè)小方格,共計(jì)400個(gè)小方格,用于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。③蓋玻片、吸管、試管及生理鹽水等。
　　(2)方法 ①取小試管l支,先以普通吸管準(zhǔn)確吸取紅細(xì)胞稀釋液4毫升(準(zhǔn)確的數(shù)量為3.98毫升),置于試管中。② 稀釋血液。用血紅蛋白吸管吸取供檢血樣至20立方毫米處, 用于脫脂棉拭去管尖外壁附著的血液,然后將血紅蛋白吸管插入已裝稀釋液的試管底部,緩緩放出血液,再吸取上清液反復(fù)洗凈沾在吸管內(nèi)壁上的血液數(shù)次,立即振搖試管1－2分鐘,使血液與稀釋液充分混合,即得200倍的稀釋血液。③充液。取清潔干燥的計(jì)數(shù)板和蓋玻片,將蓋玻片緊密覆蓋于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上,并將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板置顯微鏡臺上,用低倍鏡先找到計(jì)數(shù)室,然后用小吸管取已搖勻的稀釋血液1滴,使吸管尖端接觸蓋玻片邊緣和計(jì)數(shù)室空隙處,稀釋的血液即可自然引入并充滿計(jì)數(shù)室。④計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)室充液后,應(yīng)靜置1－2分鐘, 待紅細(xì)胞分布均勻并下沉后開始計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)紅細(xì)胞用高倍鏡, 一般計(jì)數(shù)中央大方格中四角的4個(gè)及中央1個(gè)中方格(共計(jì) 5個(gè)中方格,即為80個(gè)小方格)內(nèi)的紅細(xì)胞,5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞的最高數(shù)和最低數(shù)相差不得超過正負(fù)10%,否則表示血液稀釋混合不均。紅細(xì)胞在高倍鏡下呈圓形,淡黃色,發(fā)亮。為避免重復(fù)和遺漏,在計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)按一定的順序進(jìn)行。壓在雙線上的紅細(xì)胞都應(yīng)計(jì)算在內(nèi)，對于壓在線上的紅細(xì)胞,每格都只計(jì)入上方和左側(cè)線上的紅細(xì)胞,而壓在下方和右側(cè)的紅細(xì)胞則均不計(jì)入。計(jì)算按下列公式進(jìn)行：
　　每立方毫米血液內(nèi)紅細(xì)胞總數(shù)=x/80×400(小方格總數(shù))×稀釋倍數(shù)×10
　　x為計(jì)數(shù)5個(gè)中方格(80個(gè)小方格)的紅細(xì)胞數(shù)。如血液稀釋200倍,為計(jì)算方便,也可將計(jì)數(shù)5個(gè)中方格(80個(gè)小方格)內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù),乘以10000,即得每立方毫米血液內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)。
　　3.白細(xì)胞計(jì)數(shù) 白細(xì)胞計(jì)數(shù),對某些疾病的輔助診斷有重要的意義。多數(shù)細(xì)菌性感染和炎癥,都能使白細(xì)胞增多,如豬丹毒、肺炎、鏈球菌感染等。而一些病毒性的傳染病則能使白細(xì)胞減少，如豬瘟、流行性感冒等；某些嚴(yán)重疾病的后期,機(jī)體高度衰竭時(shí),亦可見白細(xì)胞減少；長期應(yīng)用某種藥物(如氯霉素),也可引起白細(xì)胞減少。健康豬白細(xì)胞的平均值為 13000個(gè)/立方毫米(變動范圍為11000－16000個(gè))。
　　(1)器材和稀釋液 器材基本同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)所用,不同的是稀釋液采用1%－3%醋酸溶液(或1%鹽酸溶液)。為使白細(xì)胞核著色,便于識別,并與紅細(xì)胞稀釋液相區(qū)別,可于稀釋液中加入1%亞甲藍(lán)或1%結(jié)晶紫溶液數(shù)滴。
　　(2)方法 ①取清潔、干燥的小試管1支,以0.5毫升吸管準(zhǔn)確吸取白細(xì)胞稀釋液0.38毫升,放入試管中。②稀釋血液。以血紅蛋白吸管準(zhǔn)確吸取供檢血液至20立方毫米處,用干棉球擦去管尖外壁所附的血液,立即將被檢血吸入已裝稀釋液的試管底部,并吸取上清液反復(fù)洗凈沾在吸管內(nèi)壁上的血液數(shù)次,然后振搖試管1-2分鐘,使血液與稀釋液充分混合，即可成為20倍稀釋的血液。③充液的步驟和操作,同紅細(xì)胞計(jì)數(shù)。④計(jì)數(shù)的方法與紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相同,但白細(xì)胞計(jì)數(shù)時(shí)用低倍顯微鏡即可,計(jì)數(shù)四角處4個(gè)大方格(每個(gè)大方格包括16個(gè)中方格)內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù)。計(jì)算按下列公式進(jìn)行：
　　每立方毫米血液內(nèi)白細(xì)胞數(shù)=x/計(jì)數(shù)的大方格數(shù)×血液稀釋倍數(shù)(20倍)×10(計(jì)數(shù)室的深度)
　　x為計(jì)數(shù)4個(gè)大方格(或計(jì)數(shù)成對角線的位置上的兩個(gè)大方格)內(nèi)的白細(xì)胞數(shù)。 如血液稀釋20倍,并計(jì)數(shù)4個(gè)大方格,則白細(xì)胞的總數(shù)為x/4×20×10=x×50(個(gè)/立方毫米)。