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豬病實(shí)驗(yàn)室常規(guī)診斷技術(shù)(連載)之一、診斷室工作人員的總的要求

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發(fā)表于 2009-6-19 21:57:32 | 只看該作者 回帖獎(jiǎng)勵(lì) |倒序?yàn)g覽 |閱讀模式
一、診斷室工作人員的總的要求

(一)任務(wù)

1.
快速和初步檢出細(xì)菌與毒素。

2.
采集的原標(biāo)本和分離菌種的后送。

3.
病毒處理和后送。

4.
常見疾病的初步診斷與監(jiān)測(cè)。

5.
動(dòng)物群體血清抗體水平監(jiān)測(cè)。


(二)注意事項(xiàng)


從事獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室診斷,會(huì)接觸病原微生物,故要求工作謹(jǐn)慎,嚴(yán)防微生物擴(kuò)散或?qū)嶒?yàn)室感染。實(shí)驗(yàn)過程中的污染器材和污染物,應(yīng)進(jìn)行無害化處理,嚴(yán)禁亂扔。提高人員防護(hù)意識(shí),防止事故,確保人員安全。實(shí)驗(yàn)室又是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)診斷的重要工作場(chǎng)所,故應(yīng)保持整潔,有序,并注意節(jié)約。


整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過程,要有無菌操作的意識(shí),特別是在微生物的分離培養(yǎng),純化,生長鑒定,動(dòng)物感染試驗(yàn)等操作中,要嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作的原則,否則結(jié)果將無意義。


(三)檢查方法

病原學(xué)檢查(包括顯微鏡檢查、細(xì)菌分離培養(yǎng)、動(dòng)物試驗(yàn))
血清學(xué)檢查(抗原抗體反應(yīng))
變態(tài)反應(yīng)檢查(布氏桿菌病,結(jié)核桿菌)

二、顯 微 鏡 的 構(gòu) 造 及 使 用
顯微鏡是從事畜牧獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室研究工作必不可少的工具之一,只有了解顯微鏡的原理和結(jié)構(gòu),才能正確地使用和充分發(fā)揮它的作用。
(一)顯微鏡的結(jié)構(gòu)
顯微鏡的結(jié)構(gòu)可分為機(jī)械部分和光學(xué)部分

1.機(jī)械部分
鏡筒
是顯微鏡上方斜向的圓筒,上端套有接目鏡,下端連接半球形膨大部,內(nèi)裝有一塊五角棱鏡。鏡筒下部與鏡臂之間有轉(zhuǎn)向裝置,并由一小螺旋固定,使鏡筒在一個(gè)固定平面上轉(zhuǎn)動(dòng)不同的方向。

物鏡轉(zhuǎn)換器
連接在鏡筒下端的一個(gè)凸面圓盤上裝置3—4個(gè)不同放大率的物鏡,轉(zhuǎn)換器的邊緣有一個(gè)固定卡,每當(dāng)所轉(zhuǎn)換的物鏡與光軸同心時(shí),即發(fā)出一種吻合的響聲。

鏡座及鏡柱
鏡座在顯微鏡的底部,呈馬蹄形,支撐著整個(gè)顯微鏡,使其穩(wěn)固地放置在工作臺(tái)上,有些顯微鏡的鏡座內(nèi)還裝有照明光源和反射鏡。鏡座上接鏡柱。鏡柱是載物臺(tái)、聚光器鏡臂等的支柱,也是細(xì)調(diào)節(jié)裝置的機(jī)巢。

鏡臂
在鏡座與鏡筒之間,呈弓形,在鏡臂的底部與鏡座相接處有粗、細(xì)調(diào)節(jié)輪。

粗調(diào)節(jié)輪(粗螺旋)
系一對(duì)較大的旋動(dòng)手輪,位于鏡臂下端,粗調(diào)節(jié)輪旋轉(zhuǎn)一圈可使物鏡迅速抬升或下降10毫米,以調(diào)節(jié)焦距。

細(xì)調(diào)節(jié)輪(細(xì)螺旋)
為一對(duì)較小的旋動(dòng)手輪,位于粗調(diào)節(jié)輪前方的鏡柱上,旋轉(zhuǎn)一圈可使鏡筒抬升或下降0.1毫米,細(xì)調(diào)節(jié)輪根部有不動(dòng)的外套圈和可動(dòng)的內(nèi)軸(圈),它們均有刻度,表示每格等于0.002毫米,每動(dòng)一格表示物鏡抬升或下降2微米。

載物臺(tái)
固定在鏡柱前上方,呈方形或圓形。臺(tái)中央的圓孔稱為通光孔,臺(tái)的表面裝有二個(gè)壓夾,用以固定玻片標(biāo)本。有的載物臺(tái)是移動(dòng)式,由上、下兩層構(gòu)成,裝有旋柄,可使載物臺(tái)下層能左右、前后移動(dòng)。如不需載物臺(tái)活動(dòng)可擰緊在右側(cè)的載物臺(tái)固定螺旋。有的載物臺(tái)上可裝置推進(jìn)器,利用推進(jìn)器的兩個(gè)旋鈕可以前后、左右移動(dòng)玻片標(biāo)本。

2.光學(xué)部分
光學(xué)部分主要包括目鏡、物鏡、聚光器、鏡筒內(nèi)的棱鏡及反光鏡等。

目鏡(接目鏡)
目鏡套在鏡筒端,主要作用是擴(kuò)大物鏡所形成的實(shí)像,常由上、下兩組透鏡組成,在兩組透鏡之間有一個(gè)固定光柵,光柵的大小決定視場(chǎng)(視野)的大小。目鏡上標(biāo)有5×、10×、15×等符號(hào),代表目鏡的放大倍數(shù),常用的為10×。根據(jù)教學(xué)需要,在目鏡內(nèi)可以自行裝置“指針”(用一小段發(fā)絲膠粘有固定的光柵上)。

物鏡(接物鏡)
是顯微鏡的主要光學(xué)部分,常稱為鏡頭,它由多組透鏡片組成,嵌在物鏡轉(zhuǎn)換器下方。用來放大被檢的玻片標(biāo)本。物鏡一般分為低倍鏡、高倍鏡和油浸鏡三種。低倍鏡:其透鏡鏡口率(即數(shù)值孔徑,簡稱N.A.)小、焦距長、放大倍數(shù)低、工作距離長,約7.63毫米(工作距離是指在調(diào)準(zhǔn)焦點(diǎn)的情況下,物鏡的前透鏡至標(biāo)本蓋玻片表面的距離)。如低倍物鏡上標(biāo)著10×/NA0.25和160/0.17(10×是放大倍數(shù),NA0.25是鏡口率,160是指鏡筒長度,0.17是要求蓋玻片的厚度)。高倍鏡上標(biāo)有40×/0.65和160/0.17,工作距離為0.53毫米,同一型號(hào)顯微鏡的低、高倍物鏡,在高計(jì)時(shí)已經(jīng)考慮到可進(jìn)行同高調(diào)焦,由低倍物鏡轉(zhuǎn)成高倍物鏡后稍轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)調(diào)節(jié)輪即可調(diào)準(zhǔn)焦距。有些高倍鏡、油鏡,在鏡頭下端安有彈簧裝置,可以壓縮,可防止損壞玻片標(biāo)本。

一般把目鏡和物鏡的放大倍數(shù)相乘,其得數(shù)即是顯微鏡的放大倍數(shù)。如目鏡10×,物鏡10×,顯微鏡的放大倍數(shù)即10×10=100(即放大100倍)。從物鏡使用性能上的不同,又可分為干燥系物鏡和油浸系物鏡。干燥系物鏡:是指鏡頭與被檢標(biāo)本之間以空氣為介質(zhì)的物鏡,放大倍數(shù)較低,5×、10×、20×、40×等的物鏡均屬此類。油浸系物鏡:在鏡頭與被檢物之間需要以油為介質(zhì)的物鏡叫油浸鏡,是物鏡中放大倍數(shù)最大的鏡頭,有90×或100×等。鏡頭上有黑圈、紅圈或雙層螺紋為標(biāo)記。在使用時(shí)必須在被檢的玻片標(biāo)本上滴加香柏油或石蠟油(與鏡片的折光率相近似),使鏡頭與玻片之間借油滴相接觸,避免透射的光線散失。
聚光器
由一組透鏡組成,裝置于載物臺(tái)下方,旋動(dòng)聚光器升降螺旋,可改變聚光器的位置,借以調(diào)節(jié)被檢物體上的光線強(qiáng)度,聚光器抬升時(shí),光線增強(qiáng),下降時(shí),光線減弱。聚光器上還裝有可變光柵(虹彩)以調(diào)節(jié)進(jìn)光量。

反射鏡
裝在鏡柱前下方,聚光器下,有平、凹兩面。反光鏡可向各方轉(zhuǎn)動(dòng),主要用來聚集光線,一般在人工光源或需要強(qiáng)的光線時(shí),使用凹面鏡,在天然光線或不需要較強(qiáng)的光線時(shí),使用平面鏡。

鏡筒內(nèi)折射棱鏡
裝在鏡筒下部的球形膨大部內(nèi),通過棱鏡,可將接物鏡所形成的影像呈45度角折射向目鏡。

(二)顯微鏡的使用
在使用顯微鏡時(shí)必須細(xì)心、謹(jǐn)慎,使用時(shí)應(yīng)注意:

1.位置與姿勢(shì)
顯微鏡應(yīng)放置在平穩(wěn)的工作臺(tái)上,同時(shí)注意將顯微鏡在身前稍左側(cè),使用者最好用左眼觀察,右眼同時(shí)睜開,切忌在鏡檢時(shí)瞇起或閉起右眼,以防止損傷視力。

2.光線的采集
用天然光線應(yīng)避免日光直射,以免損傷視力和圖像出現(xiàn)光暈,如使用黃色燈時(shí)(鈉光燈)應(yīng)加藍(lán)色濾光片。

3.聚光器的調(diào)整
用高倍接物鏡或油浸鏡時(shí),應(yīng)將聚光器上升到最高點(diǎn)(此時(shí),光線最強(qiáng),但照明范圍?。J褂玫捅段镧R時(shí),應(yīng)將聚光器適當(dāng)下降,調(diào)節(jié)至整個(gè)視場(chǎng)光亮均勻。

4.目鏡的選擇
目鏡倍數(shù)越低觀察的影像愈清晰。初學(xué)者往往喜歡用高倍目鏡,這樣所獲的影像模糊不清,長時(shí)間觀察也會(huì)感到頭昏,平時(shí)應(yīng)采用10×目鏡為宜。

5.物鏡的使用
干燥系物鏡的使用
鏡檢時(shí)宜先用低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔或被檢材料,進(jìn)行觀察,必要時(shí),再換用高倍接物鏡觀察,不允許直接用高倍鏡。

使用低倍物鏡時(shí),先將被檢材料放在載物臺(tái)上,用臺(tái)上的壓夾或推進(jìn)器將玻片夾牢,然后轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)輪,使鏡筒下降接近被檢玻片標(biāo)本,約在6毫米左右,此時(shí),從目鏡中邊觀察邊轉(zhuǎn)動(dòng)粗調(diào)節(jié)輪,使鏡筒緩緩抬升,至視場(chǎng)中出現(xiàn)模糊的影像時(shí),再用細(xì)調(diào)節(jié)輪,至物像清晰為止。
在低倍物鏡下觀察到的物鏡,如需再放大,可調(diào)換高倍物鏡,但被檢物部分必須移到視場(chǎng)中央,一般情況下可直接轉(zhuǎn)換高倍物鏡,再用細(xì)調(diào)節(jié)輪稍加調(diào)節(jié)即可獲得清晰的影像。
油浸系物鏡的使用
使用油浸前,必須先在低倍和高倍物鏡下找到被檢的部分,并移到視野中央,然后將聚光器上升,提升鏡筒,轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器,調(diào)換成油鏡頭,在玻片上滴加香柏油或石蠟油一小滴,再全神貫注地慢慢下降油鏡,使鏡頭與滴加在蓋玻片上的油滴相接觸。這時(shí)再自目鏡中邊觀察邊慢慢旋轉(zhuǎn)細(xì)調(diào)節(jié)輪,使鏡筒提升,直到出現(xiàn)清晰物像為止,再適度調(diào)節(jié)聚光器及光圈,使達(dá)到良好的觀察效果。

注意使用油鏡時(shí),不宜大范圍地移動(dòng)玻片,以免油滴散失。
油鏡使用完畢,提升鏡筒,取去標(biāo)本,先用擦紙擦去鏡頭及玻片上的油滴,然后再用擦鏡紙蘸少量二甲苯擦拭一次,最后,用擦鏡紙?jiān)俅尾潦苗R頭及玻片,將殘留的二甲苯擦去。二甲苯的用量不宜過多,因二甲苯可以溶解粘接固定鏡片的膠質(zhì)。
(三)
顯微鏡的保護(hù)


1
.取放顯微鏡時(shí),右手握緊鏡臂,左手托住鏡座,拿正,拿穩(wěn),不得單手取放。


2
.勿使顯微鏡的任何部件與酸、堿或其他腐蝕性物品接觸。


3
.保持顯微鏡的清潔,使用完畢應(yīng)用綢布將鏡身機(jī)械部分擦拭干凈。旋轉(zhuǎn)鏡轉(zhuǎn)換器使用物鏡偏離通光孔,下降鏡筒。復(fù)原玻片夾,提升聚光器,把反射鏡豎立以避塵埃。


4
.注意防塵、防潮、防霉。擦拭鏡頭必須用擦鏡紙,保護(hù)好光學(xué)部分。


5
.不得隨意拆卸機(jī)械部件及光學(xué)部分,顯微鏡如發(fā)生故障可與供應(yīng)商聯(lián)系解決。
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沙發(fā)
發(fā)表于 2009-6-19 22:16:05 | 只看該作者
你這個(gè)徒弟我很難接受。以后談點(diǎn)實(shí)用的

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nety + 20 該貼得到樓主的二次獎(jiǎng)勵(lì)!
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