豬病實(shí)驗(yàn)室常規(guī)診斷技術(shù)之十四、豬傳染性萎縮性鼻炎乳膠凝集試驗(yàn)（LAT）操作方法

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發(fā)表于 2009-6-24 21:21:28 | 只看該作者回帖獎(jiǎng)勵(lì)

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十四、豬傳染性萎縮性鼻炎乳膠凝集試驗(yàn)（LAT）操作方法

豬傳染性萎縮性鼻炎乳膠凝集試驗(yàn)是用支氣管敗血波氏桿菌，致敏乳膠抗原來檢測動物血清中的抗體。具有簡便、快速、特異、敏感之優(yōu)點(diǎn)。
（一）
試驗(yàn)材料

豬傳染性萎縮性鼻炎乳膠凝集試驗(yàn)抗體檢測試劑盒：包括豬傳染性萎縮性鼻炎致敏乳膠抗原、陽性血清、陰性血清、稀釋液、玻片、吸頭及使用說明書。由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院研制。
（二）操作方法

1．定性試驗(yàn)：取檢測樣品（血清）、陽性血清、陰性血清、稀釋液各一滴，分置于玻片上，各加乳膠抗原一滴，用牙簽混勻，攪拌并搖動1~2分鐘，于3~5分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。
2．定量試驗(yàn)：先將血清作連續(xù)稀釋，各取1滴依次滴加于乳膠凝集反應(yīng)板上，另設(shè)對照同上，隨后再各加乳膠抗原一滴，如上攪拌并搖動，判定。
（三）結(jié)果判定

1．判定標(biāo)準(zhǔn)：

“++++”全部乳膠凝集，顆粒聚于液滴邊緣，液體完全透明；

“+++”大部分乳膠凝集，顆粒明顯，液體稍混濁；

“++”約50％乳膠凝集，但顆粒較細(xì)，液體較混濁；

“+”有少許凝集，液體呈混濁：
“—”液滴呈原有的均勻乳狀。

2．對照試驗(yàn)出現(xiàn)如下結(jié)果試驗(yàn)方可成立，否則應(yīng)重試：陽性血清加抗原呈“++++”；陰性血清加抗原呈“—” ；抗原加稀釋液呈“—”。
以出現(xiàn)“++”以上凝集者判為陽性凝集。
（四）注意事項(xiàng)
1．試劑應(yīng)在2~8℃冷暗處保存，暫定1年。

2．乳膠抗原在使用前應(yīng)輕輕搖勻。