真蛋白的測(cè)定

ljs3611

方法一，鹽析法
①試劑
1． 硫酸銅溶液：10%，稱取50.00g硫酸銅加水溶解，并稀釋至500ml
2． 氫氧化鈉溶液：2.5%，稱取12.50g氫氧化鈉，加水溶解，并稀釋至500ml
3． 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：0.05mol/L
②真蛋白測(cè)定
精確稱取樣品1g左右，置于250ml燒杯中，加50ml蒸餾水，于電爐上加熱煮沸，加入20ml10%硫酸銅溶液，再在攪拌下緩緩加入20ml2.5%氫氧化鈉溶液，搖勻。從電爐取下，室溫放置2小時(shí)。沉淀物用中速定性濾紙傾瀉法過(guò)濾。并用少量70℃以上熱水多次洗滌燒杯和沉淀物，直至濾液無(wú)so2+4離子（用5%BaCl2溶液檢驗(yàn)無(wú)沉淀），連沉淀物一起放入80℃干燥箱中烘至略潮，和入凱氏定氮燒瓶中，消化，測(cè)定其中的蛋白質(zhì)含量（同粗蛋白的測(cè)定），同時(shí)進(jìn)行空白測(cè)定。另取樣品0.5g進(jìn)行粗蛋白的測(cè)定。
方法二：測(cè)非蛋白氮（NP）法
①NP的測(cè)定
稱取15g左右樣品（精確到0.1mg）,準(zhǔn)確加入100ml5% 三氯乙酸溶液，浸泡振蕩2h ,靜置過(guò)濾，精確量取10－20ml濾液定氮（消化時(shí)可加2－3滴正辛醇作消泡劑），同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)。
②NP的計(jì)算
同粗蛋白質(zhì)（CP）的計(jì)算
③真蛋白質(zhì)（TP）的計(jì)算
TP%＝CP%－NP%
真蛋白質(zhì)的比率＝TP%/CP%*100%
一般來(lái)講，真蛋白質(zhì)的比率應(yīng)符合下列數(shù)值：
進(jìn)口魚粉應(yīng)≥80%，國(guó)產(chǎn)魚粉≥75%。

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呵呵，大家有好東西多分享??！

ljs3611

另求教其他蛋白原料的比例

xuzai1008

不錯(cuò) 的 呵呵 有2個(gè)方法可以選擇的

ljs3611

不過(guò)我做過(guò)第一種方法，但是我們的消化管太小了，要連濾紙一塊消化，用的硫酸比較多，最后快滿了，不敢煮了

桑椹子

我們也用的第一種方法，經(jīng)常測(cè)出來(lái)都偏低，不知道是啥原因

ljs3611

消化完全了么？我們是因?yàn)闉V紙消化不完全，有可能影響蛋白的消化

zhanghongquan

我們一般檢測(cè)的是用第一種方法，做起來(lái)還可以，不過(guò)鍋爐的時(shí)候要非常注意，要捌沉淀物全部轉(zhuǎn)移到濾紙上。然后測(cè)定的方法根粗蛋白的測(cè)定方法一樣，加硫酸的時(shí)候要多加一點(diǎn)。

MHHY

濾紙烘干一點(diǎn)是不是更好些？