在試樣的前處理過程中,“煮沸”要求是加熱至沸并保持30分鐘,目的是使試樣中的非蛋白氮類物質(zhì)充分溶解于水中。加10%硫酸銅溶液和25%氫氧化鈉溶液時(shí)最好采用移液管移取,然后沿著燒杯內(nèi)壁緩慢滴加,一方面防止局部氫氧化鈉太濃將溶解部分蛋白質(zhì),這樣會(huì)導(dǎo)致最終結(jié)果偏低;另一方面是為了使試樣中的真蛋白質(zhì)充分鹽析:放置2小時(shí)或靜置過夜也是這個(gè)道理。沉淀物宜以雙層中速定量濾紙過濾,雙層濾紙可以加快過濾速度,同時(shí)又不致于將沉淀物過濾掉。濾液無SO+2表明了已充分洗滌沉淀物,因?yàn)槿绻麨V液中仍有SO+2 。則表明沉淀物中間仍可能夾雜有部分可溶性非蛋白氮類物質(zhì)(如NH ),若不繼續(xù)洗滌則將導(dǎo)致最終結(jié)果偏高。將濾紙和殘?jiān)?沉淀物)包好放入烘箱中于65~70cc下干燥2小時(shí)是為了使沉淀物充分干燥。一方面是為了避免沉淀物中仍夾雜有一些氨類物質(zhì)(盡管這種情況一般不會(huì)發(fā)生。因?yàn)闉V液已經(jīng)過了氯化鋇試液的檢驗(yàn),但仍不能排除因人眼觀察的局限性使其中間仍夾雜有部分熱烘干的過程中揮發(fā)掉);另一方面也是為了下一步試樣消化的順利進(jìn)行。因?yàn)槿绻嚇映睗?,炭化升溫過快,氣體驟然膨脹不易從凱氏燒瓶中散發(fā)出去,很容易使試樣與氣體一同沖出凱氏燒瓶從而導(dǎo)致消化失敗 |
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