凱氏定氮-測定真蛋白

samlinfing

剛開始做這一行，其中暴露出很多問題，在這里向各位前輩求教，thanks.
1.稱取0.5000g樣品于250ml燒杯中，加蒸餾水50ml，電爐上煮沸，加入10ml10%硫酸銅溶液，攪拌下加入12.5ml2.5%NaOH溶液，搖勻從電爐上取下。怎么有時(shí)候是藍(lán)色有時(shí)候是墨綠渾濁的？而且過濾時(shí)間特別長必須過夜（濾紙也折成花兒了）才能過濾完全，并且濾液有的是藍(lán)色，有的卻是墨綠色黑黑的。燒杯貼壁的殘留物說是用熱的蒸餾水洗怎么也洗不掉，很難辦。
2.有人說消解催化劑比例是1：10，但是我看到又有的地方說是1：15，應(yīng)當(dāng)哪個(gè)比例為宜？
3.消解時(shí)間大概是多少？2h后里面還有殘留的，應(yīng)該是濾紙，是不是一定要用定量濾紙？
4.消解液一次直接被我從燒瓶口到處居然在瓶頸接近瓶口1/5的地方生成黃色的物質(zhì)，為何？
5.定容到100ml中的液體要立即定氮嗎？就過了一天，發(fā)現(xiàn)液面下降的厲害，差不多有3ml憑空消失了？
6.為了省事，將半微量蒸餾、反應(yīng)、冷凝的裝置裝到一個(gè)鐵架臺(tái)上，冷凝管上口處涂了凡士林，但是還是漏氣，又怕定氮裝置彎頭處容易折斷，該怎么辦？

中國畜牧王

上學(xué)的時(shí)候沒有好好學(xué)吧？我們剛剛學(xué)過這一點(diǎn)，你可以查查教科書，不過可能教科書上的知識(shí)跟實(shí)際的會(huì)有一定差距的，這就要靠經(jīng)驗(yàn)了吧

samlinfing

回復(fù) 2# 中國畜牧王

哎，別提了。我專業(yè)是應(yīng)用生物技術(shù)。分析化學(xué)是學(xué)過，凱氏定氮也做過，是沒學(xué)好。望指教一二啊

楊紅艷

我和你的裝置不一樣 但也遇到相同的問題 2小時(shí)候有殘留那是濾紙 催化劑1：10即可 加硫酸時(shí)比粗蛋白多5毫升  還有過濾時(shí)要用80度或開水刷洗杯壁 很好刷的  如果是動(dòng)物原料話就會(huì)發(fā)墨綠色{含油脂大的

會(huì)飛的花朵

凱氏定氮發(fā)，現(xiàn)在公司不讓用了。。。

554912421

回復(fù) 5# 會(huì)飛的花朵


    請教一下，你們是用什么方法測的

會(huì)飛的花朵

回復(fù) 6# 554912421


    燃燒法。。

samlinfing

回復(fù) 4# 楊紅艷

恩，我一會(huì)去試試。 thx

MHHY

催化劑加多少?。?/td>