豬藍耳病的最新研究進展及其啟示

wjunfeng1982

作者：朱漢守

美國明尼蘇達大學(xué)

一、典型藍耳病的臨床表現(xiàn)
在早期，典型的藍耳病表現(xiàn)如下癥狀：母豬厭食、早產(chǎn)（一般是預(yù)產(chǎn)期前2～7天早產(chǎn)），產(chǎn)生大量的弱仔和木乃伊，弱仔豬基本上很難飼養(yǎng)成活，這是藍耳病區(qū)別于其它導(dǎo)致流產(chǎn)的豬病的特點。母豬主要是妊娠后期流產(chǎn)，一般是一過性流產(chǎn)，4～8周恢復(fù)正常。
未流產(chǎn)母豬所產(chǎn)下的小豬，或流產(chǎn)、早產(chǎn)存活下來的小豬，這些豬斷奶進入保育舍以后，主要的癥狀就是腹式呼吸且被毛雜亂，間質(zhì)肺炎相當(dāng)明顯（正常豬肺很軟，用手一按會塌陷，而且要很慢才能起的來，而患藍耳病豬只的肺很硬，肺間質(zhì)中充滿了各種細胞），但由于毒株的不同間質(zhì)肺炎嚴重程度的差異較大。
二、非典型藍耳病的特征
1997年以后，藍耳病（PRRS）發(fā)生的特征及臨床癥狀就和以往的典型藍耳病很不一樣了。
母豬妊娠早期開始出現(xiàn)流產(chǎn)，然后到中期和晚期流產(chǎn)，流產(chǎn)會反復(fù)，幾乎整個妊娠期都存在高的流產(chǎn)率，但幾乎沒有木乃伊和死胎，同時，發(fā)病時母豬的死亡率更高，可能超過5%。
三、藍耳病病毒粒子
藍耳病病毒有6個結(jié)構(gòu)蛋白，即GP3（分子量45KD）、GP4（分子量31KD）、GP2（分子量29KD）、GP5（分子量25KD）、M（分子量19KD）、N蛋白（分子量15KD）。只有病毒膜上的蛋白才有免疫原性，產(chǎn)生的抗體才能將病毒中和，即只有GP3、GP4、GP5蛋白產(chǎn)生的抗體才能夠中和病毒，換句話說，疫苗里要有這幾種蛋白才能有效抵抗藍耳病。
如果用活的病毒，包括使用全病毒做出來的疫苗感染豬群后，大部分豬產(chǎn)生的抗體，是由N蛋白產(chǎn)生的，用ELISA測抗體可知。也就是說，大多數(shù)時候ELISA檢測的結(jié)果同保護力沒有關(guān)系。
四、病毒序列分析
最常用的分析方法是用ORF5（5號開放閱讀框）基因的PCR產(chǎn)物直接測序，但是病毒序列的相似性不能說明它們之間是否具有交叉保護。 ORF5序列在豬場的運用：鑒別藍耳病的爆發(fā)是由原毒株引起還是變異株引起；豬場是單一感染還是幾種PRRSV毒株同時存在；追溯新毒株的來源；監(jiān)控場內(nèi)和場間特定毒株的傳播；鑒別疫苗毒和野毒。
以前測序需要測整個ORF5，而現(xiàn)在毒株的多樣性分析只看ORF5的受體部分，看這一部分的差異是否造成免疫力等方面的區(qū)別。依據(jù)ORF5的受體識別區(qū)進行分類，同一類的毒株可能具有交叉保護，而與其它類之間就沒有交叉保護。
五、藍耳病的主要生物安全措施及控制策略
PRRSV的分類和它的免疫原性迄今為止都沒有準確的方法，到現(xiàn)在為止，實際上就沒法分類。但是，豬場實踐中卻有很多實際有效的方法取得了巨大的成功。

1．后備母豬的檢疫及適應(yīng)性飼養(yǎng)
后備母豬隔離、檢疫和馴化等是相當(dāng)有用的方法，其要點是時間要長，共約90天。前30天是隔離檢疫期，在這期間采血、打疫苗，看看有沒有明顯的癥狀表現(xiàn)出來，30天后人工接種病毒，大部分是自家母豬場里采集到的病毒，理論上馴化40天以后不再散毒，但是一般是60天，然后再進入母豬群配種。為了這樣做，母豬場里需要專門建造后備母豬隔離舍。

2．運豬車的清潔
試驗發(fā)現(xiàn)，光用高壓水槍沖洗、熏蒸的效果都非常不理想，而用合適的消毒藥、8小時干燥等措施的效果較好。

3．保育舍的清潔策略
撤去風(fēng)扇、料槽、墊料和保溫?zé)舻龋A(yù)先沖洗30分鐘，用清潔劑清洗，高壓沖洗，用合適濃度的消毒劑消毒，使豬舍干燥并檢查，再準備料槽、墊料和保溫?zé)舻龋D(zhuǎn)入豬群前6～12小時控制溫度在適合的范圍。
要想控制好PRRS，除了必要的生物安全措施還需要血清學(xué)檢測；陽性場后備母豬的培育、隔離以及馴化（人工感染）；加強產(chǎn)仔舍管理盡可能得到陰性斷奶仔豬；穩(wěn)定母豬群及降低保育豬群飼養(yǎng)密度；場內(nèi)凈化，清群及監(jiān)測等策略。

六、PRRSV感染的血清學(xué)診斷
ELISA在很多地區(qū)是標準的檢測方法，但是，相比其它很多病毒，PRRSV有很多不同的地方。

ELISA檢測呈陽性最多能說明被病毒感染，并不意味著會出現(xiàn)臨床問題，也不能說明具有保護性，這和其它的病毒情況不一樣。

ELISA檢測呈陰性說明以下幾個可能性：豬群未感染；豬群剛感染但血清還沒有陽轉(zhuǎn)；豬群以前感染過但現(xiàn)在血清呈陰性（藍耳病一次感染后大約4個月左右轉(zhuǎn)陰，這在母豬群最典型）；豬群中的感染被清除且血清呈陰性；試驗敏感性低。
通過使用PCR（測抗原）、ELISA（測抗體）等方法在3周齡、6周齡、10周齡、14周齡、18周齡、22周齡時序列測樣，就知道自己的豬群是在什么時候感染的病毒。
七、公豬群的PRRSV檢測
公豬感染PRRSV以后，血清里很快就有病毒，而精液中則稍晚，因此，采集血液進行血清PCR檢測比精液檢測更敏感。
公豬檢測有兩個方法：一是做配對ELISA，做2次，間隔1個月，如果第2次檢測發(fā)現(xiàn)抗體上升，說明有病毒感染；二是做PCR，間隔1個月采血1次，每次都要將血樣留下一部分，下次檢測時要加上前1次的一起檢測，以免誤差。
可能有這樣的情況發(fā)生，每隔一段時間采同一頭公豬的血樣，連續(xù)4個月抗體都在下降，但是到第5個月卻又上升了，這種情況很可能是由于新的感染。
八、當(dāng)前PRRS控制中的難題
現(xiàn)在PRRS的控制還是有很多的問題，其中最大的問題是PRRSV有很多種亞型，而且到底怎么分型還不能準確知道，亞型之間的免疫原性也很差，相互沒有交叉的保護；第二，病毒多次感染以后就可能導(dǎo)致基因變異，在豬場產(chǎn)生產(chǎn)生新的病毒；第三，疫苗的免疫應(yīng)答不好，弱毒苗沒有加強免疫的應(yīng)答；第四，可通過精液傳播。
九、PRRS爆發(fā)時的管理指導(dǎo)
藍耳病爆發(fā)時要注意以下幾點：

1．確保所有的母豬盡快感染（人工感染），千萬不要再隔離，否則1年都結(jié)束不了。
（1）條件
后備豬是自己場生產(chǎn)的這種情況，如果這些豬在保育舍里已經(jīng)感染過PRRSV，就沒有必要做人工感染；如果后備豬在保育舍沒感染過或剛從外面引進的陰性后備母豬，就須做人工的血清感染。
（2）病毒接種液的制備
收集疑似藍耳病豬如流產(chǎn)母豬、弱仔等的血清，混合起來，感染陰性的小豬，再從陰性的小豬身上采集病毒血清。
（3）效果評價
接種血清3周以后，ELISA檢測100%呈陽性，這就說明接種的血清里含有足夠量的病毒，接種有效果。出問題的場其原因主要是：接種血清里病毒量不足；其它病原污染；錯誤的免疫方法；錯誤的病毒測定方法。

2．不要返飼母豬的胎衣等病料，因為里面的病毒量很少，基本上沒什么作用。

3．禁止24小時以外的交叉代養(yǎng)，尤其不要在產(chǎn)房之間代養(yǎng)小豬，要避免仔豬在產(chǎn)仔舍之間的移動。

4．PRRS爆發(fā)期間，要多淘、快淘病仔和弱仔豬.

5．轉(zhuǎn)入保育舍前淘汰體重過輕的斷奶仔豬，保育舍嚴格的全進全出措施，防止繼發(fā)感染等。
十、藍耳病的凈化
對于母豬舍、保育舍、育肥舍分開的豬場，其凈化起來就比較容易。通過血清學(xué)調(diào)查了解豬場病毒感染情況，找到陰性豬來源，并檢查生物安全。一次購入2個月用的后備母豬，同時接種本場血清，然后封群，停止引進陰性后備豬6個月（藍耳病的散毒期約是40多天，再長也就是80多天，而凈化則需要2倍的時間，一般是200d）。6個月封群快結(jié)束時，清空保育舍仔豬。這樣的豬場就凈化了藍耳病。（詳見《今日養(yǎng)豬業(yè)》2009年第3期）
十一、PRRSV疫苗的新進展
美國在PRRS疫苗方面有一些新的嘗試，其中一個就是做區(qū)域性的自家的亞單位疫苗，從豬場或某一地區(qū)的病毒分離出來，并選擇特定的毒株進行培養(yǎng)，用特定的方法只把病毒膜蛋白提取出來，做成亞單位疫苗。
美國農(nóng)業(yè)部調(diào)查顯示，藍耳病弱毒苗的用量在美國已大大的降低了?，F(xiàn)在看來，藍耳病的基因測序?qū)ΡＷo力沒有什么指導(dǎo)意義。至于疫苗是否有效，沒有統(tǒng)一的經(jīng)驗，最好的判斷方法是測試，測試疫苗是否有效的方法如下：
已經(jīng)感染過藍耳病即將淘汰的母豬，采血測抗體，然后注射疫苗，4周后再采血測抗體，如果抗體變化很小或不變，就說明母豬的抗體能夠中和疫苗的病毒，則認為弱毒苗有效；如果抗體上升了，就說明原來母豬有的抗體對疫苗病毒是沒用的，疫苗還能產(chǎn)生新的抗體。

hujinshui

沒見到確有效的疫苗