自家疫苗制作方法

李小鵬

一、    儀器

恒溫干燥箱、組織搗碎機(jī)、高壓蒸氣滅菌器、天平、燒杯、漏斗、鐵架臺(tái)、手術(shù)刀、手術(shù)剪、鑷子、止血鉗、廣口瓶

二、    原料與物品

甲醛、甘油、紗布、注射用生理鹽水（無(wú)熱源物質(zhì)，以免注射時(shí)發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)，減少變態(tài)反應(yīng)）、膠手套、自家病豬的內(nèi)臟組織

三、
制作步驟

1              滅菌
將所需儀器、原料和物品進(jìn)行高壓滅菌。

2              取樣
采取自家病豬的內(nèi)臟器官和組織。一般原則：優(yōu)先采取含毒量最高的組織或器官，肝—脾—腎—肺—淋巴結(jié)（整個(gè)采樣過(guò)程要求無(wú)菌操作）。

3              去菌
用注射用生理鹽水洗去樣品表面的細(xì)菌。

4              剪碎
用手術(shù)刀、手術(shù)剪將樣品剪碎，去除其中的結(jié)締組織、血管等難以搗碎部分。

5              稱重
用天平稱量所剪碎的樣品，并記錄好其重量。

6              搗碎
用組織搗碎機(jī)將稱量好的樣品搗碎，呈肉湯樣，要求越碎越好。

7              凍融
將搗碎好的樣品置于冰箱內(nèi)反復(fù)凍融三次，凍融過(guò)程中前4小時(shí)內(nèi)，每隔20分鐘搖勻一次，盡量使病毒釋放出來(lái)。

8              過(guò)濾
凍融后完全溶解之后，用紗布過(guò)濾兩次，先用四層紗布過(guò)濾一次，再用八層紗布過(guò)濾一次即可

9
稀釋
用注射生理鹽水溶液以1：5的比例將樣品稀釋。

10          滅活
在稀釋好的樣品中添加0.4%甲醛（滅活劑）和5~10%甘油（保護(hù)劑），再將其置于37℃的恒溫干燥箱內(nèi)滅活24~48小時(shí)，盡量使病毒全部被滅活，但又必須最大限度地保持其抗原性。

11          安全檢測(cè)  用小白鼠進(jìn)行免疫接種，觀察其反應(yīng)和行為，同時(shí)剖解觀察其病理變化。

12          無(wú)菌檢驗(yàn)  用肉湯或瓊脂培養(yǎng)基培養(yǎng)，觀察其是否有細(xì)菌生長(zhǎng)。

13
分裝

14       免疫接種

15          效力檢驗(yàn)

四、  疫苗的使用說(shuō)明

1
保存
2~8℃冷藏

2
保質(zhì)期6個(gè)月

3
用法用量
使用前必須先充分搖勻，以2ML/頭進(jìn)行肌肉注射，于發(fā)病期前10~15天接種，也可用于緊急接種，一般免疫接種后10天左右產(chǎn)生免疫抗體。

唐朝2009

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