如何檢測轉(zhuǎn)基因大豆？

007畜牧

大豆
　　非轉(zhuǎn)基因大豆：為橢圓形狀，有點扁。肚臍為淺褐色。豆大小不一。打出來的豆?jié){為乳白色
　　轉(zhuǎn)基因大豆：為圓形，滾圓。肚臍為黃色或黃褐色。豆大小差不多。打出來的豆?jié){有點黃，用此豆制作的豆腐什么的都有點黃色。
　　簡單的檢驗方法：轉(zhuǎn)基因大豆不發(fā)芽!可以用水檢測!本土大豆用水浸泡三天會發(fā)芽! 轉(zhuǎn)基因大豆不會發(fā)芽，只不過是個體膨脹而已。
　　從這個發(fā)芽試驗過程，人們可以發(fā)現(xiàn)，這些轉(zhuǎn)基因大豆是一次性產(chǎn)生的果實，它們的胚芽是不具有生命本質(zhì)活性的，因此，就沒有延續(xù)后代的能力。相當(dāng)于一個人可以正常懷孕，但是每一次都是死胎，這就意味著生命的延續(xù)到此為止了。那么人類如果大規(guī)模的長期食用各種轉(zhuǎn)基因食品，其中危害人類的轉(zhuǎn)基因片斷，必然會潛移默化的影響直至改變?nèi)祟惐旧淼恼；?，抵抗力下降，怪病叢生，或者喪失生育能力都是情理之中的了?br />
豆粕
     以上是生大豆檢測方法，對于豆粕檢測只能選擇高科技手段來檢測。主要有以下幾種方法：
　　PCR檢測轉(zhuǎn)基因大豆： [目的]定性檢測轉(zhuǎn)基因大豆。[方法]以非轉(zhuǎn)基因大豆和CP4-EPSPS轉(zhuǎn)基因大豆為材料,以大豆內(nèi)源基因Lectin和外源基因5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因(CP4-EPSPS)為檢測的目的片段,建立PCR反應(yīng)體系。采用改進CTAB法提取大豆基因組DNA, 并對所提DNA進行PCR擴增和電泳檢測,確定轉(zhuǎn)基因大豆的PCR檢測限。
　　實時熒光定量PCR技術(shù)檢測轉(zhuǎn)基因大豆方法的建立：采用實時熒光定量PCR技術(shù) ,通過使用特異的引物和探針 ,對大豆中的內(nèi)源基因Lectin和轉(zhuǎn)基因大豆中的外源基因EPSPS進行了定量檢測 ,建立了Monsanto公司生產(chǎn)的商業(yè)化轉(zhuǎn)基因大豆Roundup Ready○R的定量PCR檢測方法。該方法的檢測靈敏度 <0 0 1% ,是國際上設(shè)定的轉(zhuǎn)基因最低限量的 10 0倍
　　用巢式和半巢式PCR檢測轉(zhuǎn)基因大豆Roundup Ready及其深加工食品：用從轉(zhuǎn)基因大豆(Glycinemax )顆粒中提取的DNA作為模板,經(jīng)過稀釋,形成不同濃度梯度的DNA溶液,然后用巢式和半巢式PCR進行擴增反應(yīng)。結(jié)果表明,巢式和半巢式PCR均可以擴增DNA濃度為10-14g/μL的溶液。用巢式和半巢式PCR對市場的食品原料和深加工食品進行檢測,可以從大豆油、醬油、面醬、大豆磷脂、豆腐、豆?jié){等食品原料和深加工食品的17個品牌的食品中檢測出大豆內(nèi)標(biāo)基因(housekeepinggene)。
　　ELISA方法定量檢測轉(zhuǎn)基因大豆及其產(chǎn)品的研究：以美國、阿根廷、巴西轉(zhuǎn)基因大豆等為材料,建立了ELISA法定量檢測抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆CP4 EP- SPS蛋白的方法,成功檢測出美國轉(zhuǎn)基因大豆含量為3.768%、阿根廷轉(zhuǎn)基因大豆含量為2.820%、巴西轉(zhuǎn)基因大含量為1.920%,轉(zhuǎn)基因豆粉、轉(zhuǎn)基因豆粕和中國大豆未檢測到CP4 EPSPS蛋白。此方法具有簡便、快速、穩(wěn)定等優(yōu)點,其檢測靈敏度可達到0.0075%,并且穩(wěn)定性良好,為抗草甘膦轉(zhuǎn)基因大豆中CP4 EPSPS蛋白的定量檢測提供了有效的手段。
　　LAMP（環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)）檢測轉(zhuǎn)基因大豆方法的建立：針對轉(zhuǎn)基因大豆的特異基因CP4-EPSPS(GenBank accession numberAY5966948)設(shè)計引物,用LAMP引物在線設(shè)計軟件設(shè)計引物。對反應(yīng)溫度、反應(yīng)時間、鎂離子濃度、Bst DNA聚合酶濃度等擴增條件進行優(yōu)化,建立了LAMP反應(yīng)體系,檢出限為0.01%。


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