1. 概要 赭曲霉毒素A主要是由赭曲霉(Aspergillus ochraceus)和純綠青霉 (Penicillium viridicatum)產(chǎn)生的一種霉菌腎毒素,存在于糧食(小麥、玉米、大麥、燕麥、黑麥、大米和黍類等)、花生、蔬菜(豆類)等農(nóng)作物上。赭曲霉毒素A主要侵害動物肝臟與腎臟,引起腎臟損傷,大量的毒素也可能引起動物的腸黏膜炎癥和壞死。產(chǎn)生赭曲霉毒素A的霉菌(如赭曲霉、純綠青霉等)普遍存在,赭曲霉毒素A的污染可以發(fā)生在植物的生長、收獲、加工、貯藏和運輸?shù)冗^程中。中國規(guī)定谷物、豆類及其制品中赭曲霉毒素A不得超過5μg/kg,歐盟規(guī)定谷物、豆類及其制品中赭曲霉毒素A不得超過,3μg/kg。iCheck®赭曲霉毒素A定量快檢卡可以快速定量的檢測小麥及其制品中0-20ppb的赭曲霉毒素A含量。 2. 赭曲霉毒素A定量快檢卡測試包組成 1) iCheck®赭曲霉毒素A快檢卡(25個) 2) OTA微孔(25個) 3) 稀釋緩沖液CSB-1(5mL) 4) 200μL吸頭(50個) 5) OTA電子標定卡(1個) 6) 操作說明書 3. 試驗需要的設備 1)200μL 、1000μL微量移液器(各1支) 2)iCheck® 定量快檢儀(帶零點校正片) 3)多用途旋轉搖床 4)計時器 5) 電子稱 6)純水,或二次蒸餾水 7)提取液:甲醇+水(70+30) 8)漏斗 9)定性濾紙 10)50mL離心管 4. 試驗前的準備與儀器標定 1)使用前將快檢卡、緩沖液和待檢樣品恢復至室溫30分鐘。 2)設備零點校正:將零點校正片插入定量快檢儀測定室,點擊“零點校正”即可。 3)設備標定:將OTA電子標定卡插入定量快檢儀卡槽中,點擊讀取“進行標定”即可。測定時,不得將電子標定卡取出。 4)根據(jù)測定樣品數(shù)量,打開包裝袋,取出快檢卡和OTA微孔,將OTA微孔置于微孔架上。 5. 樣品處理與檢測 1)稱取5.0g粉碎(20目過篩)的玉米(或者大米)樣品于50mL離心管中,加入25.0mL 70%甲醇水提取液,置于旋轉搖床上旋轉振蕩提取5分鐘(或用高速均質器均質1分鐘,或用手劇烈振蕩3分鐘)。 2)用定性濾紙過濾,取120μL 稀釋緩沖液CSB-1于OTA微孔中,加入濾液30μL,用移液器吸打5次混勻,取100μL加入到快檢卡樣品孔中。 3)37℃(±2℃)反應10分鐘后,立即將快檢卡放入定量快檢儀中,點擊“分析”讀數(shù),即為樣品實際濃度。 6. 結果判定 1)檢測范圍:0-20ppb,定量限2.5ppb。 2)此檢測卡為定量快檢卡,若控制線(C)無紅線出現(xiàn),表明快檢卡失效。 3)如果測定值大于內部或標準限量值的80%(如大于4 ppb),請再重新測定一次。如果還是大于上述值,請用儀器法進行確認分析。 4)如果測定值大于20ppb,請將樣品提取液的濾液用70%甲醇水進行稀釋,最后定量快檢儀 的讀數(shù)乘以稀釋倍數(shù),即為樣品實際濃度。 7. 注意事項 1) 快檢卡在保質期內一次性使用。2-8℃冰箱保存使用前應平衡至室溫后再開袋使用。 2) 謹防快檢卡受潮,鋁箔包裝袋受損或快檢卡受潮后,檢測卡不要使用。 3) 盡量不要觸摸快檢卡中央的白色膜。 4) 所有溫育過程應避免陽光直射。 5) 鋁箔包裝袋中的小包是干燥劑,不可誤服。 6) 超過保質期不可使用。
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