前段時間有好幾家西南地區(qū)做小肽原料的廠家到我們公司推銷各自的小肽產(chǎn)品,從外觀、細度、氣味等反面看還是存在一定差別的。但他們大都宣傳說自己的產(chǎn)品是發(fā)酵生產(chǎn)的小肽,都說自己產(chǎn)品的酶解程度很高,小肽含量如何如何。并給我們提供了樣品和檢測方法。由于我們廠一直十分關(guān)注新型原料的開發(fā)和使用,對原料質(zhì)量的掌控和非常認真。因此針對這些廠家的樣品都按照他們的方法進行了檢測。
氮溶指數(shù)(TCA-NSI)檢測方法在下面,檢測的基本原理是:
第一步,先用三氯乙酸和離心的方法沉淀出不可溶蛋白,然后再用凱氏定氮法測定溶液中可溶蛋白(即可溶性小肽)占總樣品的百分含量C1。
第二步,用凱氏定氮測定樣品中的總蛋白C2。
第三步,用 可溶性蛋白的百分含量C1/總蛋白的百分含量C2 ,得到氮溶指數(shù)(TCA-NSI)
但。。。。。。。。。。結(jié)果卻令我十分費解,我們一共對3家產(chǎn)品進行了檢測,得到的C1(可溶性蛋白)的值卻驚人相似:31.25%、31.26%、31.26%。而所測得的粗蛋白值C2在46.5%~47.0%不等。其中一個的氮溶指數(shù)(TCA-NSI)=31.25%/46.72%=66.89%。其他的兩個樣品的氮溶指數(shù)(TCA-NSI)結(jié)果也和這個結(jié)果相差不多。
我比較納悶,雖然我們公司的品管部門的檢測十分認真負責,但畢竟是三個不同廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品,而且是發(fā)酵產(chǎn)品,其發(fā)酵分解的程度也不會標準統(tǒng)一到這樣一個程度吧:可溶性蛋白31.25%、31.26%、31.26%。要真是這樣我還得真為我們國家飼料行業(yè)而高興呢。
單從粗蛋白含量上來看,使用的應該是高蛋白脫皮豆粕,具體的生產(chǎn)過程和工藝我們沒有見到,也不得而知。但是單從結(jié)果上來看,確實讓人很奇怪。雖然之前我也見過這個檢測方法,但我個人開始懷疑這個檢測方法和計算公式存在一定問題,懷疑我們所得的這個C1值31.26%是一個常數(shù),也就是試劑反應所得的結(jié)果,或者是按照該方法測任何蛋白原料,至少是豆類產(chǎn)品都會得到這樣的結(jié)果。所以我們用該方法對豆粕進行了化驗,可結(jié)果卻令人失望,可溶性蛋白的含量只有20%左右遠低于31.26%,根本不是我們原先設(shè)想的那樣。
于是這矛盾便產(chǎn)生了。我搞不懂了,究竟是什么原因,使得三家沒有任何關(guān)系的原料生產(chǎn)企業(yè),為我們提供了三種檢測結(jié)果驚人一致的樣品。俗話說:十個手指頭伸出來還不一樣長呢。所以在這里要請教各位高人,幫忙分析一下,究竟是為什么會出現(xiàn)這樣的情況。
附錄:氮溶指數(shù)(TCA-NSI)檢測方法
發(fā)酵大豆蛋白中小肽的測定
1、原理:
利用三氯醋酸作蛋白質(zhì)沉淀劑,將發(fā)酵大豆蛋白中的蛋白質(zhì)和肽鏈較長的肽沉淀,并將其中的短鏈小肽用酸溶解出來,經(jīng)過濾、離心、消化、蒸餾,測定其蛋白質(zhì)含量,并以其占樣品粗蛋白質(zhì)的百分數(shù)來表示含量。本方法是參照中華人民共和國輕工行業(yè)標準大豆肽粉標準(QB/ T 2653 -2004)基礎(chǔ)上修訂而來。
2、試劑及儀器:
1)100ml燒杯;
2)10ml,50ml移液管;
3)干過濾裝置;
4)半微量法或全量法粗蛋白質(zhì)測定的試劑和裝置;
5)15%三氯醋酸溶液;
6)4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘的離心機。
3、方法:
準確稱取樣品6克于100 ml燒杯中,準確加入15 %三氯乙酸溶液50 毫升,混合均勻,靜置5 分鐘,以中速定性濾紙干過濾,棄去少許初始濾液,將濾液轉(zhuǎn)移至離心管,在4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘下離心10 分鐘,準確移取其上清液10ml于消化管中,按半微量法(消化后定容至100ml,準確移取其中10ml進行蒸餾)或全量法粗蛋白質(zhì)測定方法測定其粗蛋白質(zhì)含量。同時做空白試驗、測定樣品的粗蛋白質(zhì)的含量。
4、結(jié)果與計算:
小 肽%(半微量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100%
小 肽%(全量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100%
式中:
V1--餾出液消耗鹽酸標準液的體積,ml;
V0--空白試驗消耗鹽酸標準液的體積,ml;
C--鹽酸的摩爾濃度,mol/l;
6.25×0.014--蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換系數(shù);
m--稱取樣品質(zhì)量,g;
cp—樣品的粗蛋白質(zhì)含量,%。
重復性: A)、每個試樣的兩個平行樣間允許相對偏差為其算術(shù)平均值的10%,以其算術(shù)平均值上報結(jié)果;
C)、所得的結(jié)果是指小肽占粗蛋白質(zhì)的百分含量。
因其中含有無機氮,測得結(jié)果應減去無機氮,見非蛋白氮的測定。 |
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