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討論:我公司對三種小肽原料的檢測、結(jié)果與疑問(氮溶指數(shù))

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樓主
發(fā)表于 2007-10-4 09:43:59 | 只看該作者 回帖獎勵 |倒序瀏覽 |閱讀模式
前段時間有好幾家西南地區(qū)做小肽原料的廠家到我們公司推銷各自的小肽產(chǎn)品,從外觀、細度、氣味等反面看還是存在一定差別的。但他們大都宣傳說自己的產(chǎn)品是發(fā)酵生產(chǎn)的小肽,都說自己產(chǎn)品的酶解程度很高,小肽含量如何如何。并給我們提供了樣品和檢測方法。由于我們廠一直十分關(guān)注新型原料的開發(fā)和使用,對原料質(zhì)量的掌控和非常認真。因此針對這些廠家的樣品都按照他們的方法進行了檢測。
氮溶指數(shù)(TCA-NSI)檢測方法在下面,檢測的基本原理是:
第一步,先用三氯乙酸和離心的方法沉淀出不可溶蛋白,然后再用凱氏定氮法測定溶液中可溶蛋白(即可溶性小肽)占總樣品的百分含量C1。
第二步,用凱氏定氮測定樣品中的總蛋白C2。
第三步,用  可溶性蛋白的百分含量C1/總蛋白的百分含量C2 ,得到氮溶指數(shù)(TCA-NSI)
但。。。。。。。。。。結(jié)果卻令我十分費解,我們一共對3家產(chǎn)品進行了檢測,得到的C1(可溶性蛋白)的值卻驚人相似:31.25%、31.26%、31.26%。而所測得的粗蛋白值C2在46.5%~47.0%不等。其中一個的氮溶指數(shù)(TCA-NSI)=31.25%/46.72%=66.89%。其他的兩個樣品的氮溶指數(shù)(TCA-NSI)結(jié)果也和這個結(jié)果相差不多。
我比較納悶,雖然我們公司的品管部門的檢測十分認真負責,但畢竟是三個不同廠家生產(chǎn)的產(chǎn)品,而且是發(fā)酵產(chǎn)品,其發(fā)酵分解的程度也不會標準統(tǒng)一到這樣一個程度吧:可溶性蛋白31.25%、31.26%、31.26%。要真是這樣我還得真為我們國家飼料行業(yè)而高興呢。
單從粗蛋白含量上來看,使用的應該是高蛋白脫皮豆粕,具體的生產(chǎn)過程和工藝我們沒有見到,也不得而知。但是單從結(jié)果上來看,確實讓人很奇怪。雖然之前我也見過這個檢測方法,但我個人開始懷疑這個檢測方法和計算公式存在一定問題,懷疑我們所得的這個C1值31.26%是一個常數(shù),也就是試劑反應所得的結(jié)果,或者是按照該方法測任何蛋白原料,至少是豆類產(chǎn)品都會得到這樣的結(jié)果。所以我們用該方法對豆粕進行了化驗,可結(jié)果卻令人失望,可溶性蛋白的含量只有20%左右遠低于31.26%,根本不是我們原先設(shè)想的那樣。
于是這矛盾便產(chǎn)生了。我搞不懂了,究竟是什么原因,使得三家沒有任何關(guān)系的原料生產(chǎn)企業(yè),為我們提供了三種檢測結(jié)果驚人一致的樣品。俗話說:十個手指頭伸出來還不一樣長呢。所以在這里要請教各位高人,幫忙分析一下,究竟是為什么會出現(xiàn)這樣的情況。
附錄:氮溶指數(shù)(TCA-NSI)檢測方法
發(fā)酵大豆蛋白中小肽的測定
1、原理:
利用三氯醋酸作蛋白質(zhì)沉淀劑,將發(fā)酵大豆蛋白中的蛋白質(zhì)和肽鏈較長的肽沉淀,并將其中的短鏈小肽用酸溶解出來,經(jīng)過濾、離心、消化、蒸餾,測定其蛋白質(zhì)含量,并以其占樣品粗蛋白質(zhì)的百分數(shù)來表示含量。本方法是參照中華人民共和國輕工行業(yè)標準大豆肽粉標準(QB/ T 2653 -2004)基礎(chǔ)上修訂而來。
2、試劑及儀器:
1)100ml燒杯;
2)10ml,50ml移液管;
3)干過濾裝置;
4)半微量法或全量法粗蛋白質(zhì)測定的試劑和裝置;
5)15%三氯醋酸溶液;
6)4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘的離心機。
3、方法:
準確稱取樣品6克于100 ml燒杯中,準確加入15 %三氯乙酸溶液50 毫升,混合均勻,靜置5 分鐘,以中速定性濾紙干過濾,棄去少許初始濾液,將濾液轉(zhuǎn)移至離心管,在4000 轉(zhuǎn)/ 分鐘下離心10 分鐘,準確移取其上清液10ml于消化管中,按半微量法(消化后定容至100ml,準確移取其中10ml進行蒸餾)或全量法粗蛋白質(zhì)測定方法測定其粗蛋白質(zhì)含量。同時做空白試驗、測定樣品的粗蛋白質(zhì)的含量。
4、結(jié)果與計算:
小 肽%(半微量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×10×5÷m×100%÷cp×100%
小 肽%(全量法)=(V1-V0)×C×6.25×0.014×5÷m×100%÷cp×100%
            式中:
V1--餾出液消耗鹽酸標準液的體積,ml;
V0--空白試驗消耗鹽酸標準液的體積,ml;
C--鹽酸的摩爾濃度,mol/l;
6.25×0.014--蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)換系數(shù);
m--稱取樣品質(zhì)量,g;
cp—樣品的粗蛋白質(zhì)含量,%。
重復性:   A)、每個試樣的兩個平行樣間允許相對偏差為其算術(shù)平均值的10%,以其算術(shù)平均值上報結(jié)果;              
C)、所得的結(jié)果是指小肽占粗蛋白質(zhì)的百分含量。
因其中含有無機氮,測得結(jié)果應減去無機氮,見非蛋白氮的測定。
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沙發(fā)
 樓主| 發(fā)表于 2007-10-4 12:05:50 | 只看該作者
相當感動!有人來看我的東西。就是因為搞不明白才一起交流,大家一起研究研究,時間長了。不明白的也就變成明白的了。
板凳
發(fā)表于 2007-10-4 12:37:06 | 只看該作者
忒有技術(shù)含量了

樓主提出的值得注意了!
地毯
發(fā)表于 2007-10-4 13:02:27 | 只看該作者
原帖由 yinghuier 于 2007-10-4 09:48 發(fā)表
討論:我公司對三種小肽原料的檢測、結(jié)果與疑問(氮溶指數(shù))  添加到百度搜藏
前段時間有好幾家西南地區(qū)做小肽原料的廠家到我們公司推銷各自的小肽產(chǎn)品,從外觀、細度、氣味等反面看還是存在一定差別的。但他們大都 ...

1 粗蛋白在46%左右不一定就是去皮豆粕,發(fā)酵可能去掉一部分纖維素和水分,使蛋白會提高;
2.豆粕的可溶蛋白低,粉碎粒度如何,一般發(fā)酵豆粕產(chǎn)品要微粉或粉碎比較細的;
3. 可能三個廠子使用了相同的生產(chǎn)工藝,一個師傅培養(yǎng)出來的,顏色的不同是表象。
5
 樓主| 發(fā)表于 2007-10-4 16:18:47 | 只看該作者
原帖由 月亮花 于 2007-10-4 13:02 發(fā)表

1 粗蛋白在46%左右不一定就是去皮豆粕,發(fā)酵可能去掉一部分纖維素和水分,使蛋白會提高;
2.豆粕的可溶蛋白低,粉碎粒度如何,一般發(fā)酵豆粕產(chǎn)品要微粉或粉碎比較細的;
3. 可能三個廠子使用了相同的生產(chǎn)工藝,一 ...


有道理,無論是否是去皮,應該都是用豆粕生產(chǎn)的。
三種樣品的粉碎細度都很不好,應該98%以上過100目。
使用完全相同工藝的可能性不是很大?,F(xiàn)在主要的問題是搞不清楚為什么實驗測的的可溶性蛋白含量如此相近。
6
發(fā)表于 2007-10-4 19:15:05 | 只看該作者
呵呵,你再做另外一個試驗,把你的標準豆粕樣品,用水泡濕,放在高壓鍋里面,蒸煮30分鐘,樣品干燥后,再用你的辦法測量一下小肽的含量結(jié)果如何?
7
 樓主| 發(fā)表于 2007-10-5 08:09:56 | 只看該作者
原帖由 山中的漫游者 于 2007-10-4 19:15 發(fā)表
呵呵,你再做另外一個試驗,把你的標準豆粕樣品,用水泡濕,放在高壓鍋里面,蒸煮30分鐘,樣品干燥后,再用你的辦法測量一下小肽的含量結(jié)果如何?


請問博士,高溫高壓蒸煮的目的是什么?
是不是我提這樣的問題,揭開了某些人的秘密,觸及了某些人的利益?博士不方便說?
還有用水泡濕需要泡多長時間,泡到什么程度?謝謝!:jiu:
8
發(fā)表于 2007-10-5 08:25:47 | 只看該作者
是不是就是發(fā)酵豆粕?
9
發(fā)表于 2007-10-5 16:48:56 | 只看該作者
發(fā)酵方面,還是葉孤城有發(fā)言權(quán)!
10
發(fā)表于 2007-10-5 16:59:31 | 只看該作者
原帖由 yinghuier 于 2007-10-5 08:09 發(fā)表


請問博士,高溫高壓蒸煮的目的是什么?
是不是我提這樣的問題,揭開了某些人的秘密,觸及了某些人的利益?博士不方便說?
還有用水泡濕需要泡多長時間,泡到什么程度?謝謝!:jiu:

這與任何人的利益無關(guān),因為我只是一個猜測,所以建議你試驗一下,再告訴你。
我的猜猜是這樣的:
豆粕有20%多的水溶性小肽(用你的方法),發(fā)酵豆粕,不論什么工藝,在接種細菌以前都需要滅菌,也就是高壓蒸煮,而這個高壓蒸煮,本身是可以提高豆粕的消化利用率的,或者說,在蒸煮的時候,發(fā)生了很多水解反應,如果你測出來,蒸煮之后達到了31%多,就表明,三家的發(fā)酵都是無效的
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